Los grupos tiol se mantienen en un estado reducido a una concentración de aproximadamente ~ 5 mM en células animales.[5] El glutatión no es un nutriente esencial, ya que se puede sintetizar a partir de los aminoácidos: cisteína (Cys/C), ácido glutámico (Glu/E) y glicina (Gly/G) su fórmula Cys-Glu-Gly o C-E-G.[6] El glutatión se sintetiza en dos pasos dependientes del trifosfato de adenosina: En animales e insectos, la glutamato cisteína ligasa (GCL) es una enzima heterodimérica compuesta por un catalizador (GCLC) y subunidad moduladora (GCLM).[11] La glutamato cisteína ligasa de las plantas (GCL) es una enzima redox homodimérica sensible, conservada en el reino vegetal.[12] En un ambiente oxidante, se forman puentes disulfuro intermoleculares, y la enzima cambia al estado dimérico activo.[15] La ruta de biosíntesis del glutatión se encuentra en algunas bacterias, como las cianobacterias y proteobacterias, pero está ausente en muchas otras.La mayoría de los organismos eucariotas sintetizan glutatión, incluidos los seres humanos, pero algunos no, como las leguminosas, Entamoeba y Giardia.Esta reacción es posible debido a que el glutatión se encuentra en una proporción relativamente alta en las células (de hasta 5 mM, en los hepatocitos).Este metabolito tóxico es el responsable del daño hepático y renal causado por la sobredosis de paracetamol cuando se agota el GSH.Esta capacidad protege los grupos tiol celulares, que de lo contrario se modificarían covalentemente.La glioxalasa II cataliza la hidrólisis de la SD-lactoil-glutatión a glutatión y ácido D-láctico.Es el precursor de las fitoquelatinas, oligómeros del glutatión que quelan metales pesados como el cadmio.[41] También, que la silimarina, componente del Silybum marianum (cardo mariano), puede llegar a reponer los niveles de glutatión.Así, en gran medida, se reduce al mínimo cualquier posibilidad de sobredosis.Muchas patologías clínicas están asociadas con el estrés oxidativo y se detallan en numerosas referencias médicas.[45] Las concentraciones de glutatión en las células tumorales son altas y este puede ser un factor importante en la resistencia a la quimioterapia.Sin la protección de la lesión oxidativa otorgada por el glutatión, las células pueden dañarse o destruirse.En este procedimiento, se lisan las células y tioles extraídos mediante un buffer de ácido clorhídrico.La cuantificación se realiza por CLSM después de la aplicación del colorante a las células vivas.