La acción tiene lugar en la hacienda que aportó al matrimonio la primera mujer de Serebriakov.
Pero cuando llega a la hacienda Serebriakov, Vania se percata de que este es un verdadero fracasado.
A la finca llega Ástrov, el médico de la región que además es íntimo amigo del tío Vania desde hace por lo menos diez años.
Sonia está enamorada de Ástrov desde hace seis años y nunca se ha atrevido a decírselo.
Esto retiene al doctor Ástrov y lo obliga a pasar la noche ahí.
El tío Vania, ya ebrio, busca a Elena e intenta besarla pero ella lo rechaza rotundamente dejándolo destrozado.
Al comienzo del tercer acto Sonia le pide ayuda a Elena para saber cuáles son los sentimientos de Ástrov.
Los ánimos se crispan todavía más cuando Serebriakov reúne a la familia y propone vender la hacienda e invertir el dinero en papeles del Estado y con el sobrante comprar otra finca en Finlandia para vivir allí solo con Elena.
La discusión acaba con un tío Vania furioso que dispara en dos ocasiones a su cuñado, errando ambos tiros.