De esta forma ponía impedimentos para que la Corona inglesa recayera sobre una cabeza extranjera.El mundo católico consideraba a la reina de Escocia como reina de Inglaterra al morir María I, y no así a la protestante Isabel.En 1560, cuando María Estuardo quedó viuda de su primer marido Francisco II de Francia, Margarita le envió a su hijo para que los jóvenes se conocieran.En 1565 se realizó el matrimonio el que no fue aprobado por la reina Isabel, debido al reforzamiento que este significaba para su prima y rival de Escocia como pretendiente a su trono.El proyecto, sin embargo, nunca se llevó a cabo y Jacobo creció en Escocia bajo la regencia de su tío Moray.