Ordenado presbítero en 1431, ya en 1436 fue nombrado abad de un monasterio basiliano, y al año siguiente el emperador Juan VIII Paleólogo le nombró arzobispo de Nicea.
Besarión apoyó la unión y ganó el favor del Papa Eugenio IV, que lo creó cardenal en el consistorio del 18 de diciembre de 1439.
Entre 1450 y 1455 ofició como legado pontificio en Bolonia, durante la signoria de Sante Bentivoglio.
[3] En 1463 fue nombrado patriarca de la Iglesia Católica en Constantinopla, por el Papa Pío II, sucediendo al anterior Patriarca, Isidoro de Kiev (1458–1462), ya fallecido.
En el viaje de regreso, debido a las penurias, sus condiciones empeoraron y murió en Rávena, en casa de Antonio Dandolo, su amigo veneciano y alcalde del lugar.