El procedimiento se llevó a cabo con una extracción ácido-base, para extraer el grupo carboxilo en la luciferina.

La estructura fue confirmado más tarde por el uso combinado de espectroscopia infrarroja, Espectroscopía UV-Vis y métodos sintéticos para degradar el compuesto en fragmentos identificables.

Las soluciones alcalinas causaron una corrimiento hacia el rojo de la absorción probable debido a deprotonación del grupo hidroxilo en el benzotiazol, pero no afectaban a la emisión de fluorescencia.

La luz emitida por Photuris pennsylvanica salió en 552 nm (verde-amarillo) mientras que Pyrophorus plagiophthalamus 'se midió' y emitió luz a 582 nm (naranja) en el de órganos ventral.

En la luciérnaga, la oxidación de luciferinas, que es catalizada por las luciferasas, produce un compuesto peroxi 1,2-dioxetano.