[1]​ Como suplemento, se utiliza para tratar la deficiencia de vitamina B12, incluida la anemia perniciosa.

[1]​[2]​ Otros usos incluyen el tratamiento del envenenamiento por cianuro, la atrofia óptica de Leber y la ambliopía tóxica.

[2]​ Pueden incluir diarrea, niveles bajos de potasio en la sangre, reacciones alérgicas y presión arterial alta.

[7]​ Los alimentos que naturalmente contienen vitamina B12 incluyen carne, huevos y productos lácteos.

[10]​ En los Estados Unidos esta cantidad al por mayor costaba en 2016 alrededor de US$0,84.

Junto con el folato, las cobalaminas son cofactores esenciales requeridos para la síntesis de ADN en células donde se produce replicación y división cromosómica, especialmente las células de médula ósea y mieloide.

El grupo R variable da lugar a las cuatro cobalaminas más conocidas: CNCbl, metilcobalamina, 5-desoxiadenosilcobalamina y OHCbl.

Las cobalaminas circulan unidas a proteínas séricas llamadas transcobalaminas (TC) y haptocorrinas.

La hidroxicobalamina tiene una mayor afinidad por la proteína de transporte TC II que la cianocobalamina o 5-desoxiadenosilcobalamina.

Desde un punto de vista bioquímico, dos reacciones enzimáticas esenciales requieren vitamina B12 (cobalamina).

La interacción folato-cobalamina es fundamental para la síntesis normal de purinas y pirimidinas, y la transferencia del grupo metilo a cobalamina es esencial para el suministro adecuado de tetrahidrofolato, el sustrato para los pasos metabólicos que requieren folato.