Una tira reactiva o tira reactiva de orina es una herramienta de diagnóstico básica que se utiliza para determinar cambios patológicos en la orina de un paciente en un análisis de orina estándar . [1]
Una tira reactiva de orina estándar puede contener hasta 10 almohadillas químicas o reactivos diferentes que reaccionan (cambian de color) cuando se sumergen y luego se retiran de una muestra de orina . La prueba a menudo se puede leer en tan solo 60 a 120 segundos después de la inmersión, aunque ciertas pruebas requieren más tiempo. El análisis de rutina de la orina con tiras multiparamétricas es el primer paso en el diagnóstico de una amplia gama de enfermedades. El análisis incluye pruebas de presencia de proteínas , glucosa , cetonas , hemoglobina , bilirrubina , urobilinógeno , acetona , nitrito y leucocitos, así como pruebas de pH y gravedad específica o para detectar infecciones por diferentes patógenos. [2]
Las tiras reactivas consisten en una cinta de plástico o papel de unos 5 milímetros de ancho. Las tiras de plástico tienen almohadillas impregnadas con sustancias químicas que reaccionan con los compuestos presentes en la orina produciendo un color característico. En el caso de las tiras de papel, los reactivos se absorben directamente sobre el papel. Las tiras de papel suelen ser específicas para una única reacción (por ejemplo, la medición del pH), mientras que las tiras con almohadillas permiten realizar varias determinaciones simultáneamente. [2]
Existen tiras que sirven para diferentes propósitos, como las tiras cualitativas que solo determinan si la muestra es positiva o negativa, o las semicuantitativas que además de brindar una reacción positiva o negativa también brindan una estimación de un resultado cuantitativo, en estas últimas las reacciones de color son aproximadamente proporcionales a la concentración de la sustancia que se está probando en la muestra. [2] La lectura de los resultados se realiza comparando los colores de las almohadillas con una escala de colores proporcionada por el fabricante, no se necesita equipo adicional. [3]
Este tipo de análisis es muy común en el control y seguimiento de pacientes diabéticos. [2] El tiempo que tarda en aparecer el resultado de la prueba en la tira puede variar desde unos minutos después de la prueba hasta 30 minutos después de la inmersión de la tira en la orina (dependiendo de la marca del producto utilizado).
Los valores semicuantitativos se suelen expresar como: trazas, 1+, 2+, 3+ y 4+; aunque las pruebas también pueden calcularse como miligramos por decilitro. Los lectores automáticos de tiras reactivas también proporcionan resultados utilizando unidades del Sistema Internacional de Unidades . [2]
El método de ensayo consiste en sumergir la tira reactiva completamente en una muestra de orina bien mezclada durante un breve periodo de tiempo, extraerla del recipiente y apoyar el borde de la tira sobre la boca del recipiente para retirar el exceso de orina. A continuación, se deja reposar la tira durante el tiempo necesario para que se produzcan las reacciones (normalmente entre 1 y 2 minutos) y, por último, se comparan los colores que aparecen con la escala cromática proporcionada por el fabricante.
Una técnica inadecuada puede producir resultados falsos, por ejemplo, los leucocitos y eritrocitos precipitan en el fondo del recipiente y pueden no ser detectados si la muestra no está bien mezclada, y de la misma manera, si queda un exceso de orina en la tira después de haberla retirado de la muestra de prueba, puede provocar que los reactivos se derramen de las almohadillas a las almohadillas adyacentes, lo que resulta en una mezcla y distorsión de los colores. Para garantizar que esto no ocurra, se recomienda secar los bordes de la tira sobre papel absorbente. [2]
Los pulmones y los riñones son los principales reguladores del equilibrio ácido/álcali del organismo. El equilibrio se mantiene mediante la excreción controlada de hidrógenos ácidos en forma de iones amoniaco , fosfato monohidrogenado , ácidos orgánicos débiles y mediante la reabsorción de bicarbonato mediante filtración glomerular en los túbulos contorneados de la nefrona. El pH de la orina varía normalmente entre 4,5 y 8, siendo la primera orina producida por la mañana generalmente más ácida y la orina producida después de las comidas generalmente más alcalina. [4] No se proporcionan valores de referencia normales para el pH de la orina ya que la variación es demasiado amplia y los resultados deben considerarse en el contexto de los otros parámetros cuantificables. [4]
La determinación del pH urinario tiene dos objetivos principales, uno de carácter diagnóstico y otro terapéutico. Por un lado, proporciona información sobre el equilibrio entre ácido y álcali en un paciente y permite identificar las sustancias que están presentes en la orina en forma cristalina. Por otro lado, ciertas enfermedades requieren que el paciente mantenga el pH de su orina dentro de unos márgenes estrechos, ya sea para favorecer la eliminación de agentes quimioterapéuticos, evitar la precipitación de sales que favorecen la formación de cálculos renales o para facilitar el control de una infección urinaria. La regulación de la dieta controla principalmente el pH urinario, aunque el uso de medicamentos también puede controlarlo. Las dietas ricas en proteínas animales tienden a producir orina ácida, mientras que las dietas compuestas principalmente de vegetales tienden a producir orina alcalina. [4]
Las marcas comerciales miden el pH en incrementos de 0,5 o 1 unidad de pH entre pH 5 y 9. Para diferenciar el pH en este amplio rango es común utilizar un sistema indicador doble que comprende rojo de metilo y azul de bromotimol . [5] El rojo de metilo produce un cambio de color de rojo a amarillo en el rango de pH 4 a 6 y el azul de bromotimol cambia de amarillo a azul entre pH 6 y 9. En el rango de 5 a 9 las tiras muestran colores que cambian de naranja a pH 5, pasando por amarillo y verde hasta azul oscuro a pH 9. [6]
Una de las funciones importantes de los riñones es la reabsorción de agua después de la filtración glomerular. El complejo proceso de reabsorción suele ser una de las primeras funciones renales que se ven afectadas por la enfermedad. La gravedad específica de la orina es una medida de su densidad en comparación con el H2O y depende de la cantidad y densidad de solutos (las moléculas con más masa por volumen aumentan la medida de la gravedad específica). La medición de la gravedad específica no debe confundirse con la medición de la concentración osmótica , que está más relacionada con el número de partículas que con su masa. [7]
La prueba de gravedad específica en la orina se basa en el cambio de la constante de disociación (pKa ) de un polielectrolito aniónico (poli-(metil vinil éter/anhídrido maleico)) en un medio alcalino que está ionizado y libera iones de hidrógeno en proporción al número de cationes presentes en la solución. [6] Cuanto mayor sea la concentración de cationes en la orina, más iones de hidrógeno se liberan, reduciendo así el pH. La almohadilla también incluye azul de bromotimol, que mide este cambio de pH. [6] [8] Debe recordarse que la tira reactiva solo mide la concentración de cationes, por lo que es posible que la orina con una alta concentración de solutos no iónicos (como glucosa o urea) o con compuestos de alto peso molecular (como los medios utilizados para proporcionar contraste radiográfico) arroje un resultado que será erróneamente inferior al medido por densitometría. Los colores varían desde el azul oscuro con una lectura de 1.000 hasta el amarillo para una lectura de 1.030. [8] [9]
Concentraciones elevadas de proteína producen resultados de densidad específica ligeramente elevados como consecuencia del error proteico del indicador; además, las muestras con un pH superior a 6,5 dan lecturas más bajas como resultado del sesgo del indicador. Por este motivo, los fabricantes recomiendan que se sumen 5 unidades a la lectura de gravedad específica cuando el pH sea superior a 6,5. [8]
La sangre puede estar presente en la orina en forma de glóbulos rojos intactos (hematuria) o como producto de la destrucción de los glóbulos rojos, la hemoglobina (hemoglobinuria). La sangre presente en grandes cantidades se puede detectar visualmente. La hematuria produce orina roja turbia, y la hemoglobinuria aparece como una muestra roja clara. Cualquier cantidad de sangre mayor de cinco células por microlitro de orina se considera clínicamente significativa; el examen visual no puede confiarse en la presencia de sangre. El examen microscópico del sedimento urinario muestra glóbulos rojos intactos, pero no se detecta hemoglobina libre producida por trastornos hemolíticos o lisis de glóbulos rojos. Por lo tanto, las pruebas químicas para la hemoglobina proporcionan el medio más preciso para determinar la presencia de sangre. Una vez que se ha detectado sangre, el examen microscópico se puede utilizar para diferenciar entre hematuria y hemoglobinuria.
Las pruebas químicas de sangre utilizan la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina para catalizar una reacción entre el componente hemo de la hemoglobina y la mioglobina y el cromógeno (una sustancia que adquiere color después de una reacción química) tetrametilbencidina para producir un cromógeno oxidado, que tiene un color verde azulado. Los fabricantes de tiras reactivas incorporan peróxido y tetrametilbencidina en el área de prueba de sangre. Se proporcionan dos tablas de colores que corresponden a las reacciones que ocurren con hemoglobinuria, mioglobinuria y hematuria (RBC). En presencia de hemoglobina/mioglobina libre, aparece un color uniforme que va desde un amarillo negativo a un verde azulado fuertemente positivo en la almohadilla. Por el contrario, los glóbulos rojos intactos se lisan cuando entran en contacto con la almohadilla, y la hemoglobina liberada produce una reacción aislada que da como resultado un patrón moteado en la almohadilla. Las pruebas con tiras reactivas pueden detectar concentraciones tan bajas como cinco glóbulos rojos por microlitro; Sin embargo, se debe tener cuidado al comparar estas cifras con los valores microscópicos reales, porque la naturaleza absorbente de la compresa atrae parte de la orina. Para los informes se utilizan los términos traza, pequeña, moderada y grande (o traza, 1+, 2+ y 3+).
Se pueden observar reacciones positivas falsas debido a la contaminación menstrual. También ocurren si hay detergentes oxidantes fuertes en el recipiente de la muestra. La peroxidasa vegetal y las enzimas bacterianas, incluida la peroxidasa de Escherichia coli , también pueden causar reacciones positivas falsas. Por lo tanto, los sedimentos que contienen bacterias deben revisarse de cerca para detectar la presencia de glóbulos rojos. Tradicionalmente, el ácido ascórbico (vitamina C) se ha asociado con reacciones negativas falsas en las tiras reactivas para la sangre. Tanto Multistix como Chemstrip han modificado sus tiras reactivas para reducir esta interferencia a niveles muy altos de ácido ascórbico, y Chemstrip recubre la almohadilla reactiva con una malla impregnada de yodato que oxida el ácido ascórbico antes de que llegue a la almohadilla reactiva. Las reacciones negativas falsas pueden resultar cuando la orina con una gravedad específica alta contiene glóbulos rojos crenados que no se lisan cuando entran en contacto con la almohadilla reactiva. También se puede observar una disminución de la reactividad cuando se utiliza formalina como conservante o cuando hay un medicamento para la hipertensión llamado captopril o una concentración elevada de nitrito. Los glóbulos rojos se depositan en el fondo del recipiente de la muestra y, si no se mezcla la muestra antes de la prueba, se obtiene una lectura falsamente disminuida. [10]
Con ayuda de exámenes de rutina se pueden identificar los primeros síntomas de los siguientes cuatro grupos:
Parámetros de detección: Muchas enfermedades renales y del tracto urinario pueden ser asintomáticas durante un largo período de tiempo. Se recomienda el análisis de orina de rutina como un paso básico pero fundamental para identificar daño renal y/o enfermedad del tracto urinario en una etapa temprana, especialmente en poblaciones de alto riesgo como diabéticos , hipertensos , afroamericanos , polinesios y aquellos con antecedentes familiares . [11]
Las enfermedades específicas del riñón y del tracto urinario que se pueden identificar incluyen: enfermedad renal crónica , glomerulonefritis , proteinuria y hematuria .
De las pruebas químicas de rutina que se realizan en la orina, la más indicativa de enfermedad renal es la determinación de proteínas. La proteinuria se asocia a menudo con enfermedad renal temprana, por lo que la prueba de proteínas urinarias es una parte importante de cualquier examen físico. La orina normal contiene muy poca proteína, generalmente menos de 100–300 mg/L o se excretan 100 mg por 24 horas. Esta proteína consiste principalmente en proteínas séricas de bajo peso molecular que han sido filtradas por el glomérulo y proteínas producidas en el tracto genitourinario. Debido a su bajo peso molecular, la albúmina es la principal proteína sérica que se encuentra en el plasma, el contenido normal de albúmina urinaria es bajo porque la mayoría de la albúmina presente en el glomérulo no se filtra, y gran parte de la albúmina filtrada se reabsorbe en los túbulos. Otras proteínas incluyen pequeñas cantidades de microglobulinas séricas y tubulares. Uromodulina producida por las células epiteliales tubulares renales y proteínas de secreciones prostáticas, seminales y vaginales. La uromodulina se produce rutinariamente en el tubo contorneado distal y forma la matriz de los cilindros.
Las pruebas tradicionales con tiras reactivas para detectar proteínas utilizan el principio del error proteico de los indicadores para producir una reacción colorimétrica visible. Contrariamente a la creencia general de que los indicadores producen colores específicos en respuesta a niveles de pH particulares, ciertos indicadores cambian de color en presencia de proteínas aunque el pH del medio permanezca constante. Esto se debe a que las proteínas aceptan iones de hidrógeno del indicador. La prueba es más sensible a la albúmina porque esta contiene más grupos amino para aceptar los iones de hidrógeno que otras proteínas. Según el fabricante, la zona proteica de la tira contiene diferentes sustancias químicas. Multistix contiene azul de tetrabromofenol y Chemstrip contiene 3',3”,5',5”-tetraclorofenol, 3,4,5,6-tetrabromosulfonftaleína. Ambos contienen un tampón ácido para mantener el pH a un nivel constante. A un nivel de pH de 3, ambos indicadores aparecen amarillos en ausencia de proteínas. Sin embargo, a medida que aumenta la concentración de proteínas, el color progresa a través de varios tonos de verde y finalmente al azul. Las lecturas se informan en términos de negativo, trazas, 1+, 2+, 3+ y 4+ o los valores semicuantitativos de 30, 100, 300 o 2000 mg/dL correspondientes a cada cambio de color. Los valores de trazas se consideran inferiores a 30 mg/dL. La interpretación de las lecturas de trazas puede ser difícil. [12]
La principal fuente de error con las tiras reactivas se produce con orinas alcalinas altamente tamponadas que anulan el sistema de tampón ácido, lo que produce un aumento del pH y un cambio de color no relacionado con la concentración de proteínas. Del mismo modo, un error técnico al permitir que la almohadilla reactiva permanezca en contacto con la orina durante un período prolongado puede eliminar el tampón. Se obtienen lecturas falsas positivas cuando la reacción no se produce en condiciones ácidas. La orina altamente pigmentada y la contaminación del recipiente con compuestos de amonio cuaternario, detergentes y antisépticos también causan lecturas falsas positivas. Una lectura de trazas falsa positiva puede ocurrir en muestras con una gravedad específica alta.
La presencia de sangre en la orina es, de todos los parámetros que se examinan habitualmente, el que se relaciona más estrechamente con un daño traumático en los riñones o en el tracto genitourinario. Las causas más frecuentes de hematuria son: nefrolitiasis , enfermedad glomerular , tumores , pielonefritis , exposición a nefrotoxinas y tratamiento con anticoagulantes . La hematuria no patológica puede observarse después de un ejercicio extenuante y durante la menstruación . El número normal de glóbulos rojos en la orina no debería superar habitualmente los 3 por campo de gran aumento. [13]
Un resultado positivo en la prueba de orina puede indicar también hemoglobinuria , que no es detectable con un microscopio debido a la lisis de los glóbulos rojos en el tracto urinario (particularmente en orina alcalina o diluida), o hemólisis intravascular . En condiciones normales, la formación de complejos haptoglobina -hemoglobina impide la filtración glomerular, pero si la hemólisis es extensa, se excede la capacidad de captación de la haptoglobina y puede aparecer hemoglobina en la orina. La hemoglobinuria puede ser causada por anemia hemolítica, transfusiones de sangre, quemaduras extensas , la picadura de la araña reclusa (Loxosceles), infecciones y ejercicio extenuante.
La prueba de orina con tira reactiva para detectar sangre se basa en la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina al catalizar una reacción entre el peróxido de hidrógeno y el cromógeno tetrametilbencidina para producir un producto de oxidación de color azul oscuro. [6] [13] El color resultante puede variar entre verde y azul oscuro dependiendo de la cantidad de hemoglobina. [13]
La presencia de mioglobina en la orina da una reacción positiva en el análisis de sangre de la tira reactiva, pero la orina aparece clara con una coloración entre roja y marrón. La presencia de mioglobina en lugar de hemoglobina puede ser causada por patologías asociadas con daño muscular ( rabdomiólisis ), como traumatismo , síndrome de aplastamiento , coma prolongado, convulsiones , atrofia muscular progresiva , alcoholismo , abuso de heroína y actividad física extenuante.
La fracción hemo de estas proteínas es tóxica para los túbulos renales y concentraciones elevadas pueden causar lesión renal aguda .
Para distinguir entre hemoglobinuria y mioglobinuria es posible utilizar una prueba de precipitación con sulfato de amonio. Esta prueba consiste en añadir 2,8 g de sulfato de amonio a 5 ml de orina centrifugada, mezclar bien y, tras 5 minutos, filtrar la muestra y centrifugar de nuevo. La hemoglobina precipita junto con el sulfato de amonio, pero no la mioglobina. El análisis del sobrenadante en busca de sangre con una tira reactiva dará un resultado positivo si hay mioglobina y negativo si hay hemoglobina.
La prueba puede dar falsos positivos si hay residuos fuertes de oxidantes o peróxido en el material de laboratorio utilizado para el análisis. [13]
Alrededor del 30-40% de los diabéticos tipo I y alrededor del 20% de los diabéticos tipo II padecen con el tiempo una nefropatía, por lo que el reconocimiento temprano de la diabetes es de gran importancia para el futuro estado de salud de estos pacientes.
Los trastornos específicos del metabolismo de los carbohidratos que se pueden identificar incluyen diabetes mellitus , glucosuria y cetonuria .
En condiciones normales, casi toda la glucosa eliminada en el glomérulo se reabsorbe en el túbulo contorneado proximal. Si el nivel de glucosa en sangre aumenta, como ocurre en la diabetes mellitus, se supera la capacidad del túbulo contorneado para reabsorber glucosa (efecto conocido como umbral de reabsorción renal ). Para la glucosa, este umbral se encuentra entre 160-180 mg/dl. Las concentraciones de glucosa varían de un individuo a otro, y una persona sana puede presentar glucosuria transitoria después de una comida rica en azúcares, por lo que los resultados más representativos son los obtenidos al menos dos horas después de la ingesta de alimentos.
La detección de glucosa mediante tiras reactivas se basa en la reacción enzimática de la glucosa oxidasa . Esta enzima cataliza la oxidación de la glucosa por el oxígeno atmosférico para formar ácido glucónico y peróxido de hidrógeno . Una segunda reacción vinculada, mediada por una peroxidasa , cataliza la reacción entre el peróxido y un cromógeno (una sustancia que adquiere color después de una reacción química) para formar un compuesto coloreado que indica la concentración de glucosa. [6]
La reacción es específica para la glucosa, como ocurre en todas las reacciones enzimáticas, pero puede proporcionar algunos resultados falsos positivos debido a la presencia de trazas de agentes oxidantes fuertes o peróxido de desinfectantes utilizados en instrumentos de laboratorio. [6]
El término cetonas o cuerpos cetónicos en realidad se refiere a tres productos intermedios en el metabolismo de los ácidos grasos ; acetona , ácido acetoacético y ácido beta-hidroxibutírico . Generalmente no se encuentran concentraciones elevadas de cetonas en la orina, ya que todas estas sustancias se metabolizan completamente, produciendo energía, dióxido de carbono y agua. Sin embargo, la alteración del metabolismo de los carbohidratos puede provocar desequilibrios metabólicos y la aparición de cetonas como subproducto del metabolismo de las reservas de grasa de un organismo.
Un aumento en el metabolismo de las grasas puede ser el resultado de la inanición o malabsorción , la incapacidad de metabolizar los carbohidratos (como ocurre, por ejemplo, en la diabetes) o debido a pérdidas por vómitos frecuentes.
El control de la cetona urinaria es particularmente útil en el manejo y seguimiento de la diabetes mellitus tipo 1. La cetonuria indica una deficiencia de insulina que indica la necesidad de regular su dosificación. Un aumento en la concentración sanguínea de cetona produce un desequilibrio hidroelectrolitario , deshidratación y si no se corrige, acidosis y al final coma diabético .
Los tres compuestos cetónicos aparecen en proporciones diferentes en la orina, aunque estas proporciones son relativamente constantes en las distintas muestras, ya que tanto la acetona como el ácido beta-hidroxibutírico se producen a partir del ácido acetoacético. Las proporciones son 78% de ácido beta-hidroxibutírico, 20% de ácido acetoacético y 2% de acetona.
La prueba utilizada en las tiras reactivas de orina se basa en la reacción del nitroprusiato de sodio (nitroferricianuro). En esta reacción, el ácido acetilacético en un medio alcalino reacciona con el nitroprusiato de sodio produciendo un complejo de color magenta: [6] [14]
El test no mide el ácido beta-hidroxibutírico y es débilmente sensible a la acetona cuando se añade glicina a la reacción. Sin embargo, como estos compuestos se derivan del ácido acetoacético, se puede suponer su existencia y, por lo tanto, no es necesario un test aparte. Los medicamentos que contienen grupos sulfhidrilo, como el mercaptoetano sulfonato Na ( Mesna ), el captopril y la L-DOPA, pueden dar una coloración atípica. Puede producirse un falso negativo en muestras que no se hayan almacenado adecuadamente debido a la volatilización y la degradación bacteriana.
En muchas enfermedades hepáticas, los pacientes suelen presentar síntomas patológicos en una fase tardía. Un diagnóstico precoz permite aplicar a tiempo las medidas terapéuticas adecuadas, evitando así daños posteriores y nuevas infecciones.
Las enfermedades hepáticas específicas y los trastornos hemolíticos que se pueden identificar incluyen enfermedad hepática (acompañada de ictericia ), cirrosis , urobilinogenuria y bilirrubinuria .
La bilirrubina es un compuesto altamente pigmentado que es un subproducto de la degradación de la hemoglobina. La hemoglobina que se libera después de que el sistema fagocítico mononuclear (ubicado en el hígado y el bazo ) retira los glóbulos rojos viejos de la circulación se degrada en sus componentes; hierro , protoporfirina y proteína . Las células del sistema convierten la protoporfirina en bilirrubina no conjugada que pasa a través del sistema circulatorio unida a proteínas, particularmente a la albúmina. El riñón no puede filtrar esta bilirrubina ya que está unida a proteínas, sin embargo, se conjuga con ácido glucurónico en el hígado para formar bilirrubina conjugada soluble en agua. Esta bilirrubina conjugada normalmente no aparece en la orina ya que se excreta directamente desde el intestino en la bilis . Las bacterias intestinales reducen la bilirrubina a urobilinógeno , que luego se oxida y se excreta en las heces como estercobilina o en la orina como urobilina .
La bilirrubina conjugada aparece en la orina cuando se altera el ciclo normal de degradación por obstrucción de las vías biliares o cuando se daña la integridad funcional del riñón, lo que permite el escape de bilirrubina conjugada a la circulación como ocurre en la hepatitis y la cirrosis hepática .
La detección de bilirrubina urinaria es una indicación temprana de enfermedad hepática y su presencia o ausencia puede utilizarse para determinar las causas de ictericia clínica .
La ictericia producida por la destrucción acelerada de glóbulos rojos no produce bilirrubinuria, ya que la bilirrubina sérica elevada se encuentra en forma no conjugada y los riñones son incapaces de excretarla.
Las tiras reactivas utilizan una reacción de diazotación para detectar la bilirrubina. La bilirrubina se combina con una sal de diazonio (2,4-dicloroanilina o 2,6-diclorobenceno-diazonio-tetrafluoroborato) en un medio ácido para producir un colorante azoico con una coloración que varía del rosa al violeta: [6]
Las reacciones positivas falsas pueden deberse a pigmentos inusuales en la orina (por ejemplo, metabolitos de fenazopiridina de color naranja amarillento , indican y los metabolitos del medicamento Lodine ( Etodolac )). Los negativos falsos también pueden deberse a muestras mal almacenadas, ya que la bilirrubina es fotosensible y sufre fotooxidación a biliverdina cuando se expone a la luz, o puede ocurrir hidrólisis del glucurónido produciendo bilirrubina libre que es menos reactiva. [6]
Las bacterias intestinales convierten la bilirrubina conjugada que se excreta por el conducto biliar hacia el intestino en urobilinógeno y estercobilinógeno . Parte del urobilinógeno se reabsorbe en el intestino y luego circula en la sangre hasta el hígado, donde se excreta. Una pequeña parte de este urobilinógeno recirculado se filtra por los riñones y aparece en la orina (menos de 1 mg/dl de orina). El estercobilinógeno no se puede reabsorber y permanece en el intestino. [15] [16]
Cualquier deterioro de la función hepática reduce su capacidad para procesar el urobilinógeno recirculado. [15] El exceso que queda en la sangre es filtrado por los riñones y aparece en la orina. Cuando se producen trastornos hemolíticos, la cantidad de bilirrubina no conjugada presente en la sangre aumenta provocando un aumento de la excreción hepática de bilirrubina conjugada, lo que da lugar a mayores cantidades de urobilinógeno que a su vez provoca un aumento de la reabsorción, recirculación y excreción renal. [15] [16]
Las reacciones que tienen lugar en la tira reactiva varían según el fabricante, pero en realidad hay dos reacciones que se utilizan con más frecuencia. Algunos fabricantes utilizan la reacción de Ehrlich (1), en la que el urobilinógeno reacciona con p-dimetilaminobenzaldehído ( reactivo de Ehrlich ) para producir colores que varían del rosa claro al oscuro. Otros fabricantes utilizan una reacción de acoplamiento diazo (2) que utiliza tetrafluoroborato de 4-metoxibenceno-diazonio para producir colores que varían del blanco al rosa. Esta última reacción es más específica. [17]
Varias sustancias interfieren con la reacción de Ehrlich en la tira Multistix: porfobilinógeno, indican, ácido p-aminosalicílico, sulfonamida, metildopa, procaína y clorpromazina. La prueba debe realizarse a temperatura ambiente, ya que la sensibilidad de la reacción aumenta con la temperatura. Las muestras mal almacenadas pueden dar resultados falsos negativos, ya que el urobilinógeno sufre fotooxidación a urobilina, que no reacciona. El formaldehído utilizado como conservante produce falsos negativos en ambas reacciones. [16]
Se pueden identificar infecciones urinarias, incluidas bacteriuria y piuria .
La prueba de nitritos es un método de detección rápida de posibles infecciones asintomáticas causadas por bacterias reductoras de nitrato. Algunas de las especies de bacterias gramnegativas que más comúnmente causan infecciones del tracto urinario ( Escherichia coli , Enterobacter , Klebsiella , Citrobacter y Proteus ) tienen enzimas que reducen el nitrato presente en la orina a nitrito. [18] La prueba es un método de detección rápida de posibles infecciones por bacterias entéricas, pero no reemplaza las pruebas de orina ni el examen microscópico como herramientas diagnósticas, ni el seguimiento posterior ya que muchos otros microorganismos que no reducen el nitrato ( bacterias grampositivas y levaduras) también pueden causar infecciones urinarias. [19] [20]
Las tiras reactivas detectan el nitrito mediante la reacción de Griess en la que el nitrito reacciona en un medio ácido con una amina aromática (ácido para-arsanílico o sulfanilamida) para formar una sal de diazonio que a su vez reacciona con tetrahidrobenzoquinolina para producir un colorante azoico rosa. [6] [20]
La prueba de nitrito no es particularmente confiable y los resultados negativos en presencia de síntomas clínicos no son infrecuentes, lo que significa que la prueba no debe tomarse como concluyente. Se pueden obtener resultados negativos en presencia de microorganismos no reductores de nitrato. Las bacterias reductoras de nitrato deben permanecer en contacto con el nitrato durante el tiempo suficiente para producir cantidades detectables (primera orina producida en la mañana o al menos con una retención urinaria de 4 horas). Un gran número de bacterias pueden reaccionar para reducir el nitrito a nitrógeno, lo que dará un resultado negativo falso. El uso de antibióticos inhibirá el metabolismo bacteriano causando resultados negativos incluso aunque las bacterias estén presentes. Además, algunas sustancias como el ácido ascórbico competirán con la reacción de Greiss dando lecturas poco representativas. [6] [20]
Es normal encontrar hasta 3 (ocasionalmente 5) leucocitos por campo de gran aumento (40X) en una muestra de orina, y las mujeres tienen resultados ligeramente más altos debido a la contaminación vaginal. [ cita requerida ] Los números más altos indican infección urinaria. La prueba de tira reactiva de orina para glóbulos blancos detecta la esterasa leucocitaria, que está presente en los gránulos azurófilos de monocitos y granulocitos ( neutrófilos , eosinófilos y basófilos ). Las bacterias, los linfocitos y las células epiteliales del tracto genitourinario no contienen esterasas. [21] Los granulocitos neutrófilos son los leucocitos más comúnmente asociados con las infecciones urinarias. Una prueba positiva para la esterasa leucocitaria normalmente indica la presencia de bacterias y una prueba de nitrito positiva (aunque no siempre es el caso). Las infecciones causadas por Trichomonas , Chlamydia y levaduras producen leucocituria sin bacteriuria. La inflamación de los tejidos renales ( nefritis intersticial ) puede producir leucocituria, en particular nefritis intersticial tóxica con predominio de eosinófilos. [21]
La prueba de esterasa leucocitaria es puramente indicativa y no debe confiarse únicamente en ella para el diagnóstico, ya que no reemplaza los exámenes microscópicos o de cultivo de orina. [19]
La reacción de la tira reactiva de orina se basa en la acción de la esterasa leucocitaria al catalizar la hidrólisis de un éster de ácido indolcarboxílico. El indoxilo que se libera se combina con una sal de diazonio para producir un colorante azólico de color violeta. [21]
La reacción de la esterasa necesita unos 2 minutos para tener lugar. La presencia de agentes oxidantes fuertes o formaldehído puede causar falsos positivos. Los resultados falsos negativos están asociados con concentraciones elevadas de proteína (superiores a 500 mg/dl), glucosa (superior a 3 g/dl), ácido oxálico y ácido ascórbico . La orina con una gravedad específica alta también puede causar crenación leucocitaria, lo que puede impedir la liberación de las esterasas. [22]
El límite de detección de una prueba es la concentración a partir de la cual la prueba comienza a pasar de negativa a positiva. Aunque el límite de detección puede variar entre muestras de orina, se define como la concentración del analito que produce una reacción positiva en el 90 % de las muestras de orina examinadas.
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Las tiras reactivas de orina se pueden utilizar en muchas áreas de la cadena de atención médica, incluida la detección para exámenes de rutina, el monitoreo del tratamiento, el autocontrol por parte de los pacientes y/o la medicina preventiva general.
Las tiras reactivas para análisis de orina se utilizan para realizar pruebas de detección tanto en hospitales como en la práctica médica general. El objetivo de la prueba de detección es la identificación temprana de posibles pacientes mediante el examen de grandes grupos de la población. La importancia de la detección de diabetes y enfermedades renales entre las poblaciones de alto riesgo está adquiriendo cada vez mayor importancia.
El seguimiento del tratamiento con ayuda de tiras reactivas de orina permite al profesional sanitario verificar los resultados de la terapia prescrita y, si es necesario, introducir cambios en el curso de la terapia.
El autocontrol con tiras reactivas de orina bajo la supervisión de un profesional sanitario es un método eficaz para controlar el estado de la enfermedad. Esto se aplica especialmente a los diabéticos , para quienes la idea del autocontrol del estado metabólico (determinaciones de glucosa y cetonas) es evidente.
En medicina veterinaria, especialmente en gatos y perros, la tira reactiva se puede utilizar para realizar análisis de orina.
En muchas culturas, la orina se consideraba un fluido místico y en algunas culturas se sigue considerando así hasta el día de hoy. Entre sus usos se encuentran la curación de heridas, la estimulación de las defensas del organismo y los exámenes para diagnosticar la presencia de enfermedades.
Fue recién hacia finales del siglo XVIII que los médicos interesados en la química dirigieron su atención a la base científica del análisis de orina y a su uso en la medicina práctica.
Aunque las tiras reactivas han cambiado poco en apariencia desde los años 60, ahora contienen una serie de innovaciones. Nuevas técnicas de impregnación, indicadores de color más estables y la mejora constante de la gradación de color han contribuido a que el uso de las tiras reactivas de orina se haya establecido en la práctica clínica y general como un instrumento de diagnóstico fiable. El menú de parámetros ofrecidos ha ido creciendo de forma constante en las décadas posteriores.
Se sabe que el ácido ascórbico (vitamina C) interfiere con la reacción de oxidación de la sangre y la glucosa en las tiras reactivas de orina comunes. Algunas tiras reactivas de orina están protegidas contra la interferencia con el yodato, que elimina el ácido ascórbico por oxidación. [25] Algunas tiras reactivas incluyen una prueba para el ascorbato urinario.
Durante la detección de rutina, si se identifica un resultado positivo para leucocitos, sangre, proteínas, nitrito y un pH mayor a 7, el sedimento de orina puede analizarse microscópicamente para precisar aún más el diagnóstico.
El análisis automático de tiras reactivas de orina mediante analizadores automáticos de tiras reactivas de orina es una práctica bien establecida en el análisis de orina actual. Pueden medir calcio , sangre, glucosa, bilirrubina, urobilinógeno, cetonas, leucocitos, creatinina , microalbúmina , pH, ácido ascórbico y proteínas. [26]
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