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ARN mensajero modificado con nucleósidos

Un ARN mensajero modificado con nucleósidos ( modRNA ) es un ARN mensajero sintético (ARNm) en el que algunos nucleósidos se reemplazan por otros nucleósidos modificados naturalmente o por análogos de nucleósidos sintéticos . [1] El modRNA se utiliza para inducir la producción de una proteína deseada en ciertas células. Una aplicación importante es el desarrollo de vacunas de ARNm , de las cuales las primeras autorizadas fueron las vacunas contra la COVID-19 (como Comirnaty y Spikevax ).

Fondo

Un ribosoma (representado en verde) crea una proteína (representada aquí como una cadena de cuentas que representan aminoácidos ) codificada en un ARNm (representado como una cinta de nucleótidos ) que puede modificarse para reducir la inflamación en la célula.

El ARNm se produce sintetizando una cadena de ácido ribonucleico (ARN) a partir de bloques de construcción de nucleótidos de acuerdo con una plantilla de ácido desoxirribonucleico (ADN), un proceso que se llama transcripción . [2] Cuando los bloques de construcción proporcionados a la ARN polimerasa incluyen nucleósidos no estándar como pseudouridina , en lugar de los nucleósidos estándar adenosina , citidina , guanosina y uridina , el ARNm resultante se describe como modificado con nucleósidos. [3]

La producción de proteínas comienza con el ensamblaje de los ribosomas en el ARNm, que luego sirve como modelo para la síntesis de proteínas al especificar su secuencia de aminoácidos según el código genético en el proceso de biosíntesis de proteínas llamado traducción . [4]

Descripción general

Para inducir a las células a que fabriquen proteínas que normalmente no producen, es posible introducir ARNm heterólogo en el citoplasma de la célula, evitando la necesidad de transcripción. En otras palabras, se "introduce" de contrabando un modelo para las proteínas extrañas en las células. Sin embargo, para lograr este objetivo, se deben eludir los sistemas celulares que impiden la penetración y la traducción del ARNm extraño. Existen enzimas casi ubicuas llamadas ribonucleasas (también llamadas ARNasas) que descomponen el ARNm desprotegido. [5] También existen barreras intracelulares contra el ARNm extraño, como los receptores del sistema inmunitario innato , el receptor tipo Toll (TLR) 7 y el TLR8 , ubicados en las membranas endosómicas . Los sensores de ARN como TLR7 y TLR8 pueden reducir drásticamente la síntesis de proteínas en la célula, desencadenar la liberación de citocinas como el interferón y el TNF-alfa y, cuando son lo suficientemente intensos, provocar la muerte celular programada . [6]

La naturaleza inflamatoria del ARN exógeno se puede enmascarar modificando los nucleósidos en el ARNm. [7] Por ejemplo, la uridina se puede reemplazar con un nucleósido similar como pseudouridina (Ψ) o N1-metil-pseudouridina (m1Ψ), [8] y la citosina se puede reemplazar por 5-metilcitosina . [9] Algunos de estos, como pseudouridina y 5-metilcitosina, ocurren naturalmente en eucariotas , [10] mientras que m1Ψ ocurre naturalmente en arqueas . [11] La inclusión de estos nucleósidos modificados altera la estructura secundaria del ARNm, lo que puede reducir el reconocimiento por el sistema inmunológico innato mientras que aún permite una traducción efectiva. [9]

Importancia de las regiones no traducidas

Un ARNm normal comienza y termina con secciones que no codifican aminoácidos de la proteína real. Estas secuencias en los extremos 5′ y 3′ de una cadena de ARNm se denominan regiones no traducidas (UTR). Las dos UTR en los extremos de sus cadenas son esenciales para la estabilidad de un ARNm y también de un ARNm modificado, así como para la eficiencia de la traducción, es decir, para la cantidad de proteína producida. Al seleccionar las UTR adecuadas durante la síntesis de un ARNm modificado, se puede optimizar la producción de la proteína diana en las células diana. [5] [12]

Entrega

Comparación de la captación de ARN y ARNm por la célula

La introducción de modRNA en determinadas células diana presenta diversas dificultades. En primer lugar, el modRNA debe protegerse de las ribonucleasas [5] . Esto se puede lograr, por ejemplo, envolviéndolo en liposomas . Este "envasado" también puede ayudar a garantizar que el modRNA sea absorbido por las células diana. Esto es útil, por ejemplo, cuando se utiliza en vacunas , ya que las nanopartículas son absorbidas por las células dendríticas y los macrófagos , que desempeñan un papel importante en la activación del sistema inmunológico [13] .

Además, puede ser deseable que el ARNm modificado aplicado se introduzca en células corporales específicas. Este es el caso, por ejemplo, si se desea estimular la multiplicación de células del músculo cardíaco . En este caso, el ARNm modificado empaquetado se puede inyectar directamente en una arteria , como una arteria coronaria . [14]

Aplicaciones

Un campo de aplicación importante son las vacunas de ARNm .

Karikó y Weissman fueron pioneros en reemplazar la uridina con pseudouridina para evadir el sistema inmunológico innato en 2005. [15] [16] Ganaron el Premio Nobel de Fisiología o Medicina de 2023 como resultado de su trabajo. [17]

Otro hito se logró al demostrar la eficacia salvadora de vidas del ARNm modificado con nucleósidos en un modelo de ratón con una enfermedad pulmonar letal, por parte del equipo de Kormann y otros en 2011. [18]

La N1-metil-pseudouridina se utilizó en ensayos de vacunas contra el Zika , [19] [20] [21] el VIH-1 , [21] la influenza , [21] y el Ébola [22] en 2017-2018. [23] :  5

Las primeras vacunas autorizadas para su uso en humanos fueron las vacunas contra la COVID-19 para combatir el SARS-CoV-2 . [24] [25] [26] [27] [28] [29] [30] Entre los ejemplos de vacunas contra la COVID-19 que utilizan ARNm se incluyen las desarrolladas en colaboración con BioNTech / Pfizer ( BNT162b2 ) y Moderna ( ARNm-1273 ). [31] [32] [33] Sin embargo, la vacuna zorecimeran desarrollada por Curevac utiliza ARN sin modificar, [34] en lugar de basarse en la optimización de codones para minimizar la presencia de uridina. Sin embargo, esta vacuna es menos eficaz. [35] [16]

Otros posibles usos del modRNA incluyen la regeneración del tejido muscular cardíaco dañado, [36] [37] una herramienta de reemplazo de enzimas [38] y la terapia contra el cáncer. [39] [40]

Referencias

  1. ^ Chien KR, Zangi L, Lui KO (octubre de 2014). "ARNm sintético modificado químicamente (modRNA): hacia una nueva plataforma tecnológica para la biología y la medicina cardiovascular". Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine . 5 (1): a014035. doi :10.1101/cshperspect.a014035. PMC  4292072 . PMID  25301935.
  2. ^ Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2002). Del ADN al ARN (4.ª ed.). Garland Science.
  3. ^ Pardi N, Weissman D (2017). "Vacunas de ARNm modificadas con nucleósidos para enfermedades infecciosas". Vacunas de ARN . Métodos en biología molecular. Vol. 1499. Clifton, NJ págs. 109-121. doi :10.1007/978-1-4939-6481-9_6. ISBN . 978-1-4939-6479-6. Número de identificación personal  27987145.{{cite book}}: Mantenimiento de CS1: falta la ubicación del editor ( enlace )
  4. ^ Lodish H, Berk A, Zipursky SL, Matsudaira P, Baltimore D, Darnell J (2000). Los tres roles del ARN en la síntesis de proteínas (4.ª ed.). Nueva York: WH Freeman. págs. Sección 4.4.
  5. ^ abc Schlake T, Thess A, Fotin-Mleczek M, Kallen KJ (noviembre de 2012). "Desarrollo de tecnologías de vacunas de ARNm". RNA Biology . 9 (11): 1319–1330. doi :10.4161/rna.22269. PMC 3597572 . PMID  23064118. 
  6. ^ Dalpke A, Helm M (junio de 2012). "Estimulación del receptor tipo Toll mediada por ARN en la salud y la enfermedad". RNA Biology . 9 (6): 828–842. doi :10.4161/rna.20206. PMC 3495747 . PMID  22617878. 
  7. ^ Karikó K, Buckstein M, Ni H, Weissman D (agosto de 2005). "Supresión del reconocimiento de ARN por receptores tipo Toll: el impacto de la modificación de nucleósidos y el origen evolutivo del ARN". Inmunidad . 23 (2): 165–175. doi : 10.1016/j.immuni.2005.06.008 . PMID  16111635.
  8. ^ Andries O, Mc Cafferty S, De Smedt SC, Weiss R, Sanders NN, Kitada T (noviembre de 2015). "El ARNm con N(1)-metilpseudouridina incorporado supera al ARNm con pseudouridina incorporada al proporcionar una expresión proteica mejorada y una inmunogenicidad reducida en líneas celulares de mamíferos y ratones". Journal of Controlled Release . 217 : 337–344. doi :10.1016/j.jconrel.2015.08.051. hdl : 1854/LU-6993270 . PMID  26342664.
  9. ^ ab Svitkin YV, Cheng YM, Chakraborty T, Presnyak V, John M, Sonenberg N (junio de 2017). "La N1-metil-pseudouridina en el ARNm mejora la traducción a través de mecanismos dependientes e independientes de eIF2α al aumentar la densidad de ribosomas". Nucleic Acids Research . 45 (10): 6023–6036. doi :10.1093/nar/gkx135. PMC 5449617 . PMID  28334758. 
  10. ^ Hoernes TP, Clementi N, Faserl K, Glasner H, Breuker K, Lindner H, et al. (enero de 2016). "Las modificaciones de nucleótidos dentro de los ARN mensajeros bacterianos regulan su traducción y son capaces de reconfigurar el código genético". Nucleic Acids Research . 44 (2): 852–862. doi :10.1093/nar/gkv1182. PMC 4737146 . PMID  26578598. 
  11. ^ Wurm JP, Griese M, Bahr U, Held M, Heckel A, Karas M, et al. (marzo de 2012). "Identificación de la enzima responsable de la metilación N1 de pseudouridina 54 en ARNt arqueales". ARN . 18 (3): 412–420. doi :10.1261/rna.028498.111. PMC 3285930 . PMID  22274954. Por el contrario, en la mayoría de las arqueas esta posición está ocupada por otro nucleótido hipermodificado: la pseudouridina isostérica N1-metilada. 
  12. ^ Orlandini von Niessen AG, Poleganov MA, Rechner C, Plaschke A, Kranz LM, Fesser S, et al. (abril de 2019). "Mejora de la administración de genes terapéuticos basada en ARNm mediante el aumento de la expresión de los UTR 3' identificados mediante el cribado de la biblioteca celular". Molecular Therapy . 27 (4): 824–836. doi :10.1016/j.ymthe.2018.12.011. PMC 6453560 . PMID  30638957. 
  13. ^ Zhao L, Seth A, Wibowo N, Zhao CX, Mitter N, Yu C, Middelberg AP (enero de 2014). "Vacunas de nanopartículas". Vacuna . 32 (3): 327–337. doi : 10.1016/j.vaccine.2013.11.069 . PMID  24295808.
  14. ^ Carlsson L, Clarke JC, Yen C, Gregoire F, Albery T, Billger M, et al. (junio de 2018). "El ARNm de VEGF-A purificado y biocompatible mejora la función cardíaca después de una inyección intracardíaca 1 semana después de un infarto de miocardio en cerdos". Terapia molecular. Métodos y desarrollo clínico . 9 : 330–346. doi : 10.1016/j.omtm.2018.04.003. PMC 6054703. PMID  30038937. 
  15. ^ Karikó K, Buckstein M, Ni H, Weissman D (agosto de 2005). "Supresión del reconocimiento de ARN por receptores tipo Toll: el impacto de la modificación de nucleósidos y el origen evolutivo del ARN". Inmunidad . 23 (2): 165–175. doi : 10.1016/j.immuni.2005.06.008 . PMID  16111635.
  16. ^ ab Dolgin E (septiembre de 2021). "La enredada historia de las vacunas de ARNm". Nature . 597 (7876): 318–324. Bibcode :2021Natur.597..318D. doi :10.1038/d41586-021-02483-w. PMID  34522017. S2CID  237515383.
  17. ^ "El Premio Nobel de Fisiología o Medicina 2023".
  18. ^ Kormann, Michael SD; Hasenpusch, Günther; Aneja, Manish K.; Nica, Gabriela; Flemmer, Andreas W.; Herber-Jonat, Susanne; Huppmann, Marceline; Mays, Lauren E.; Illenyi, Marta; Schams, Andrea; Griese, Matthias; Bittmann, Iris; Handgretinger, Rupert; Hartl, Dominik; Rosenecker, Joseph (febrero de 2011). "Expresión de proteínas terapéuticas después de la administración de ARNm modificado químicamente en ratones". Nature Biotechnology . 29 (2): 154–157. doi :10.1038/nbt.1733. ISSN  1546-1696. PMID  21217696. S2CID  205275040.
  19. ^ Pardi N, Hogan MJ, Pelc RS, Muramatsu H, Andersen H, DeMaso CR, et al. (marzo de 2017). "Protección contra el virus del Zika mediante una vacuna de ARNm modificada con nucleósidos de baja dosis". Nature . 543 (7644): 248–251. Bibcode :2017Natur.543..248P. doi :10.1038/nature21428. PMC 5344708 . PMID  28151488. Diseñamos una potente vacuna anti-ZIKV... que contiene el nucleósido modificado 1-metilpseudouridina (m1Ψ) 
  20. ^ Richner JM, Himansu S, Dowd KA, Butler SL, Salazar V, Fox JM, et al. (marzo de 2017). "Las vacunas de ARNm modificadas protegen contra la infección por el virus del Zika". Cell . 168 (6): 1114–1125.e10. doi :10.1016/j.cell.2017.02.017. PMC 5388441 . PMID  28222903. El ARNm se sintetizó... donde el UTP se sustituyó por 1-metilpseudoUTP 
  21. ^ abc Pardi N, Hogan MJ, Naradikian MS, Parkhouse K, Cain DW, Jones L, et al. (junio de 2018). "Las vacunas de ARNm modificadas con nucleósidos inducen respuestas potentes de células B del centro germinal y de las células T foliculares auxiliares". The Journal of Experimental Medicine . 215 (6): 1571–1588. doi :10.1084/jem.20171450. PMC 5987916 . PMID  29739835. En este estudio, caracterizamos la inmunogenicidad de tres vacunas que consisten en ARNm-LNP modificados con m1Ψ y purificados por FPLC que codifican la envoltura del VIH-1 (Env), la prM-E del virus de la influenza (HA) y la hemaglutinina del virus de la influenza (HA). 
  22. ^ Meyer M, Huang E, Yuzhakov O, Ramanathan P, Ciaramella G, Bukreyev A (enero de 2018). "Las vacunas basadas en ARNm modificados provocan respuestas inmunitarias sólidas y protegen a los conejillos de indias de la enfermedad del virus del Ébola". The Journal of Infectious Diseases . 217 (3): 451–455. doi :10.1093/infdis/jix592. PMC 5853918 . PMID  29281112. Se sintetizaron dos vacunas de ARNm... donde el UTP se sustituyó por 1-metilpseudo UTP 
  23. ^ Morais P, Adachi H, Yu YT (4 de noviembre de 2021). "La contribución crítica de la pseudouridina a las vacunas de ARNm contra la COVID-19". Frontiers in Cell and Developmental Biology . 9 : 789427. doi : 10.3389/fcell.2021.789427 . PMC 8600071 . PMID  34805188. 
  24. ^ "Pfizer y BioNTech celebran la histórica primera autorización en EE. UU. de una vacuna para prevenir la COVID-19". www.businesswire.com . 12 de diciembre de 2020.
  25. ^ Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, Absalon J, Gurtman A, Lockhart S, et al. (diciembre de 2020). "Seguridad y eficacia de la vacuna de ARNm BNT162b2 contra la COVID-19". The New England Journal of Medicine . 383 (27): 2603–2615. doi :10.1056/NEJMoa2034577. PMC 7745181 . PMID  33301246. S2CID  228087117. 
  26. ^ Hohmann-Jeddi C (10 de noviembre de 2020). "Hoffnungsträger BNT162b2: ¿Cómo funcionan los componentes del ARNm?". Pharmazeutische Zeitung (en alemán) . Consultado el 28 de noviembre de 2020 .
  27. ^ Abbasi J (septiembre de 2020). "COVID-19 y vacunas de ARNm: primera prueba a gran escala para un nuevo enfoque". JAMA . 324 (12): 1125–1127. doi : 10.1001/jama.2020.16866 . PMID  32880613. S2CID  221476409.
  28. ^ Vogel A, Kanevsky I, Che Y, Swanson K, Muik A, Vormehr M, et al. (8 de septiembre de 2020). "Una vacuna de ARN de prefusión contra la proteína spike del SARS-CoV-2 es altamente inmunogénica y previene la infección pulmonar en primates no humanos" (PDF) . bioRxiv . doi :10.1101/2020.09.08.280818. S2CID  221589144.
  29. ^ "Condiciones de autorización para la vacuna contra la COVID-19 de Pfizer/BioNTech" (Decisión). Agencia Reguladora de Medicamentos y Productos Sanitarios. 8 de diciembre de 2020.
  30. ^ Oficina del Comisionado (14 de diciembre de 2020). "Vacuna Pfizer-BioNTech contra la COVID-19". www.fda.gov (Decisión). FDA de EE. UU . .
  31. ^ Krammer F (octubre de 2020). «Vacunas contra el SARS-CoV-2 en desarrollo». Nature . 586 (7830): 516–527. Bibcode :2020Natur.586..516K. doi : 10.1038/s41586-020-2798-3 . PMID  32967006. S2CID  221887746.
  32. ^ "La línea de producción de Moderna". Moderna . Consultado el 28 de noviembre de 2020 .
  33. ^ Dolgin E (noviembre de 2020). "Las vacunas contra la COVID-19 están a punto de lanzarse, pero el impacto en la pandemia es incierto". Nature Biotechnology : d41587–020–00022-y. doi :10.1038/d41587-020-00022-y. PMID  33239758. S2CID  227176634.
  34. ^ "COVID-19". CureVac . Consultado el 21 de diciembre de 2020 .
  35. ^ Dolgin E (junio de 2021). "La disminución de la eficacia de la vacuna contra la COVID-19 de CureVac pone de relieve los desafíos del diseño del ARNm". Nature . 594 (7864): 483. Bibcode :2021Natur.594..483D. doi : 10.1038/d41586-021-01661-0 . PMID  34145413. S2CID  235480198.
  36. ^ Kaur K, Zangi L (diciembre de 2020). "ARNm modificado como herramienta terapéutica para el corazón". Medicamentos y terapia cardiovascular . 34 (6): 871–880. doi :10.1007/s10557-020-07051-4. PMC 7441140. PMID  32822006 . 
  37. ^ Zangi L, Lui KO, von Gise A, Ma Q, Ebina W, Ptaszek LM, et al. (octubre de 2013). "El ARNm modificado dirige el destino de las células progenitoras cardíacas e induce la regeneración vascular después de un infarto de miocardio". Nature Biotechnology . 31 (10): 898–907. doi :10.1038/nbt.2682. PMC 4058317 . PMID  24013197. 
  38. ^ Ter Huurne, Menno; Parker, Benjamin L.; Liu, Ning Qing; Qian, Elizabeth Ling; Vivien, Celine; Karavendzas, Kathy; Mills, Richard J.; Saville, Jennifer T.; Abu-Bonsrah, Dad; Wise, Andrea F.; Hudson, James E.; Talbot, Andrew S.; Finn, Patrick F.; Martini, Paolo GV; Fuller, Maria (7 de septiembre de 2023). "El tratamiento con ARN modificado con GLA reduce los niveles de GB3 en cardiomiocitos derivados de iPSC de individuos afectados por Fabry". Revista estadounidense de genética humana . 110 (9): 1600–1605. doi :10.1016/j.ajhg.2023.07.013. ISSN  1537-6605. PMC 10502840 . Número de modelo:  PMID37607539. 
  39. ^ McNamara MA, Nair SK, Holl EK (2015). "Vacunas basadas en ARN en inmunoterapia contra el cáncer". Revista de investigación inmunológica . 2015 : 794528. doi : 10.1155/2015/794528 . PMC 4668311. PMID  26665011 . 
  40. ^ Verbeke R, Lentacker I, Wayteck L, Breckpot K, Van Bockstal M, Descamps B, et al. (noviembre de 2017). "Coadministración de ARNm modificado con nucleósidos y agonistas de TLR para inmunoterapia contra el cáncer: restauración de la inmunogenicidad del ARNm inmunosilencioso". Journal of Controlled Release . 266 : 287–300. doi :10.1016/j.jconrel.2017.09.041. PMID  28987878. S2CID  20794075.

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