Varias características hacen que el AAV sea un candidato atractivo para crear vectores virales para terapia génica y para la creación de modelos isogénicos de enfermedades humanas . [3] Los vectores de terapia génica que utilizan AAV pueden infectar tanto células en división como células quiescentes y persistir en un estado extracromosómico sin integrarse en el genoma de la célula huésped. Sin embargo, en el virus nativo, sí se produce la integración de los genes transportados por el virus en el genoma del huésped. [4] La integración puede ser importante para ciertas aplicaciones, pero también puede tener consecuencias no deseadas. Los ensayos clínicos humanos recientes que utilizan AAV para terapia génica en la retina han demostrado ser prometedores. [5]
En marzo de 2023, una serie de artículos de Nature detectaron altos títulos de virus adenoasociado 2 (AAV2), junto con adenovirus y herpesvirus, en muestras de una ola de hepatitis infantil. [6] Un artículo sugirió que la coinfección con AAV2 puede contribuir a una enfermedad hepática más grave que la infección solo con adenovirus o herpesvirus y que el vínculo causal aún está por establecer. [7]
Historia
El virus adenoasociado (AAV), que anteriormente se consideraba un contaminante de las preparaciones de adenovirus, fue identificado por primera vez como un dependoparvovirus en la década de 1960 en los laboratorios de Bob Atchison en Pittsburgh y Wallace Rowe en el NIH . Estudios serológicos en humanos indicaron posteriormente que, a pesar de estar presente en personas infectadas por virus auxiliares como el adenovirus o el virus del herpes, el AAV en sí no causaba ninguna enfermedad. [8]
Uso en terapia génica
Ventajas y desventajas
El AAV de tipo salvaje ha atraído un interés considerable por parte de los investigadores de la terapia génica debido a una serie de características. La principal de ellas era la aparente falta de patogenicidad del virus. También puede infectar células que no se dividen y tiene la capacidad de integrarse de forma estable en el genoma de la célula huésped en un sitio específico (designado AAVS1) en el cromosoma humano 19. [ 9] [10] Esta característica lo hace algo más predecible que los retrovirus , que presentan la amenaza de una inserción aleatoria y de mutagénesis, que a veces es seguida por el desarrollo de un cáncer. El genoma del AAV se integra con mayor frecuencia en el sitio mencionado, mientras que las incorporaciones aleatorias en el genoma tienen lugar con una frecuencia insignificante. Sin embargo, el desarrollo de los AAV como vectores de terapia génica ha eliminado esta capacidad integradora mediante la eliminación de la rep y la cap del ADN del vector. El gen deseado junto con un promotor para impulsar la transcripción del gen se inserta entre las repeticiones terminales invertidas (ITR) que ayudan en la formación de concatémeros en el núcleo después de que el ADN del vector monocatenario se convierte por los complejos de ADN polimerasa de la célula huésped en ADN bicatenario. Los vectores de terapia génica basados en AAV forman concatémeros episomales en el núcleo de la célula huésped. En las células que no se dividen, estos concatémeros permanecen intactos durante la vida de la célula huésped. En las células que se dividen, el ADN de AAV se pierde a través de la división celular, ya que el ADN episomal no se replica junto con el ADN de la célula huésped. [11] La integración aleatoria del ADN de AAV en el genoma del huésped es detectable, pero ocurre con una frecuencia muy baja. [11] Los AAV también presentan una inmunogenicidad muy baja , aparentemente restringida a la generación de anticuerpos neutralizantes , mientras que no inducen una respuesta citotóxica claramente definida . [12] [13] [14] Esta característica, junto con la capacidad de infectar células quiescentes , presenta su dominio sobre los adenovirus como vectores para la terapia génica humana . [ cita requerida ]
El uso del virus presenta algunas desventajas. La capacidad de clonación del vector es relativamente limitada y la mayoría de los genes terapéuticos requieren la sustitución completa del genoma de 4,8 kilobases del virus. Por lo tanto, los genes grandes no son adecuados para su uso en un vector AAV estándar. Actualmente se están explorando opciones para superar la capacidad de codificación limitada. [15] Los ITR de AAV de dos genomas pueden hibridarse para formar concatémeros de cabeza a cola, lo que casi duplica la capacidad del vector. La inserción de sitios de empalme permite la eliminación de los ITR de la transcripción. [ cita requerida ]
Debido a las ventajas de la terapia génica especializada del AAV, los investigadores han creado una versión alterada del AAV denominada virus adenoasociado autocomplementario (scAAV) . Mientras que el AAV empaqueta una sola cadena de ADN y debe esperar a que se sintetice su segunda cadena, el scAAV empaqueta dos cadenas más cortas que son complementarias entre sí. Al evitar la síntesis de la segunda cadena, el scAAV puede expresarse más rápidamente, aunque como advertencia, el scAAV solo puede codificar la mitad de la capacidad ya limitada del AAV. [16] Informes recientes sugieren que los vectores scAAV son más inmunogénicos que los vectores de adenovirus monocatenarios, lo que induce una activación más fuerte de los linfocitos T citotóxicos . [17]
Se cree que la inmunidad humoral instigada por la infección con el tipo salvaje es común. La actividad neutralizante asociada limita la utilidad del serotipo AAV2 más comúnmente utilizado en ciertas aplicaciones. En consecuencia, la mayoría de los ensayos clínicos en curso implican la administración de AAV2 en el cerebro, un órgano inmunológicamente relativamente privilegiado. En el cerebro, el AAV2 es fuertemente específico de las neuronas. [ cita requerida ]
Dos partículas de adenovirus rodeadas de numerosos virus adenoasociados más pequeños (microscopía electrónica con tinción negativa, aumento de aproximadamente 200.000×)
Genómica, transcriptómica y proteómica
El genoma del AAV está formado por ácido desoxirribonucleico monocatenario (ss ADN ), de sentido positivo o negativo, que tiene una longitud de aproximadamente 4,7 kilobases. El genoma comprende ITR en ambos extremos de la cadena de ADN y dos marcos de lectura abiertos (ORF): rep y cap . El primero está compuesto por cuatro genes superpuestos que codifican las proteínas Rep necesarias para el ciclo de vida del AAV, y el segundo contiene secuencias de nucleótidos superpuestas de proteínas de la cápside : VP1, VP2 y VP3, que interactúan para formar una cápside con simetría icosaédrica. [28]
Secuencias ITR
Las secuencias de repetición terminal invertida (ITR) comprenden 145 bases cada una. Se denominaron así debido a su simetría, que se demostró que es necesaria para la multiplicación eficiente del genoma de AAV. [29] La característica de estas secuencias que les da esta propiedad es su capacidad para formar una horquilla , que contribuye al llamado autocebado que permite la síntesis independiente de primasa de la segunda cadena de ADN. También se demostró que las ITR son necesarias tanto para la integración del ADN de AAV en el genoma de la célula huésped (cromosoma 19 en humanos) como para el rescate de este, [30] [31] así como para la encapsidación eficiente del ADN de AAV combinada con la generación de partículas de AAV completamente ensambladas y resistentes a la desoxirribonucleasa . [32]
En lo que respecta a la terapia génica, las ITR parecen ser las únicas secuencias necesarias en cis junto al gen terapéutico: las proteínas estructurales ( cap ) y de empaquetamiento ( rep ) pueden administrarse en trans . Con esta suposición se establecieron muchos métodos para la producción eficiente de vectores AAV recombinantes (rAAV) que contienen un gen reportero o terapéutico. Sin embargo, también se publicó que las ITR no son los únicos elementos necesarios en cis para la replicación y encapsidación efectivas. Algunos grupos de investigación han identificado una secuencia denominada elemento dependiente de Rep que actúa en cis (CARE) dentro de la secuencia codificante del gen rep . Se demostró que CARE aumenta la replicación y la encapsidación cuando está presente en cis . [33] [34] [35] [36]
repsGen y proteínas Rep
En el "lado izquierdo" del genoma hay dos promotores llamados p5 y p19, a partir de los cuales se pueden producir dos ácidos ribonucleicos mensajeros ( ARNm ) superpuestos de diferente longitud. Cada uno de ellos contiene un intrón que puede ser eliminado o no. Dadas estas posibilidades, se pueden sintetizar cuatro ARNm diferentes y, en consecuencia, cuatro proteínas Rep diferentes con secuencia superpuesta. Sus nombres representan sus tamaños en kilodaltons (kDa): Rep78, Rep68, Rep52 y Rep40. [37] Rep78 y 68 pueden unirse específicamente a la horquilla formada por el ITR en el acto de autocebado y escindirse en una región específica, designada sitio de resolución terminal, dentro de la horquilla. También se demostró que son necesarios para la integración específica de AAVS1 del genoma de AAV. Se demostró que las cuatro proteínas Rep se unen al ATP y poseen actividad helicasa . También se demostró que regulan positivamente la transcripción del promotor p40 (mencionado a continuación), pero regulan negativamente los promotores p5 y p19. [31] [37] [38] [39] [40] [41]
tapaGen y proteínas VP
El lado derecho de un genoma de AAV con detección positiva codifica secuencias superpuestas de tres proteínas de la cápside, VP1, VP2 y VP3, y dos proteínas accesorias, MAAP y AAP, que comienzan a partir de un promotor, designado p40. Los pesos moleculares de estas proteínas son 87, 72 y 62 kiloDaltons, respectivamente. [42] La cápside de AAV está compuesta por una mezcla de VP1, VP2 y VP3 que suman 60 monómeros dispuestos en simetría icosaédrica en una proporción de 1:1:10, [43] con una masa vacía de aproximadamente 3,8 MDa . [44]
La estructura cristalina de la proteína VP3 fue determinada por Xie, Bue, et al. [45]
Cápside de AAV2, mostrada como un diagrama de cinta , con la mitad posterior oculta para mayor claridad. Se muestra un eje de simetría quíntuple en el centro.
El gen cap produce una proteína adicional no estructural llamada proteína activadora del ensamblaje (AAP). Esta proteína se produce a partir de ORF2 y es esencial para el proceso de ensamblaje de la cápside. [46] La función exacta de esta proteína en el proceso de ensamblaje y su estructura no se han resuelto hasta la fecha. [ cita requerida ]
Los tres VP se traducen a partir de un ARNm. Después de sintetizar este ARNm, se puede empalmar de dos maneras diferentes: se puede escindir un intrón más largo o más corto, lo que da como resultado la formación de dos grupos de ARNm: un grupo de ARNm de 2,3 kb y otro de 2,6 kb de longitud. Por lo general, especialmente en presencia de adenovirus, se prefiere el intrón más largo, por lo que el ARNm de 2,3 kb de longitud representa el llamado "empalme mayor". En esta forma, se corta el primer codón AUG , a partir del cual comienza la síntesis de la proteína VP1, lo que da como resultado un nivel general reducido de síntesis de la proteína VP1. El primer codón AUG que permanece en el empalme mayor es el codón de iniciación de la proteína VP3. Sin embargo, aguas arriba de ese codón en el mismo marco de lectura abierto se encuentra una secuencia ACG (que codifica treonina) que está rodeada por un contexto Kozak óptimo . Esto contribuye a un bajo nivel de síntesis de la proteína VP2, que en realidad es la proteína VP3 con residuos N terminales adicionales, al igual que VP1. [47] [48] [49] [50]
Dado que se prefiere el intrón más grande para ser empalmado, y dado que en el empalme mayor el codón ACG es una señal de inicio de la traducción mucho más débil, la proporción en la que las proteínas estructurales de AAV se sintetizan in vivo es de aproximadamente 1:1:20, que es la misma que en la partícula de virus madura. [51] Se ha demostrado que el fragmento único en el extremo N de la proteína VP1 posee la actividad de fosfolipasa A2 (PLA2), que probablemente se requiere para la liberación de partículas de AAV de los endosomas tardíos . [52] Muralidhar et al. informaron que VP2 y VP3 son cruciales para el ensamblaje correcto del virión. [49] Más recientemente, sin embargo, Warrington et al. demostraron que VP2 es innecesario para la formación completa de partículas de virus y una infectividad eficiente, y también presentaron que VP2 puede tolerar grandes inserciones en su extremo N, mientras que VP1 no puede, probablemente debido a la presencia del dominio PLA2. [53]
Modificaciones postraduccionales
Descubrimientos recientes realizados mediante el uso de enfoques 'ómicos de alto rendimiento incluyen el hecho de que las cápsides de AAV se modifican postraduccionalmente (PTM) durante la producción, como la acetilación, metilación, fosforilación, desamidación, O-glicanilación [54] y sumoilación en las proteínas de la cápside VP1, VP2 y VP3. Estas PTM difieren según la plataforma de producción de fabricación. Otro de estos descubrimientos es el hecho de que los genomas de AAV se metilan epigenéticamente durante la producción. Además del precio, estos hallazgos podrían afectar la cinética de expresión, la unión al receptor de rAAV, el tráfico, la inmunogenicidad del vector y la durabilidad de la expresión. [55] [56]
Clasificación, serotipos, receptores y tropismo nativo
En 2013, el Comité Internacional de Taxonomía de Virus reconoció dos especies de AAV : el dependoparvovirus adenoasociado A (anteriormente AAV-1, −2, −3 y −4) y el dependoparvovirus adenoasociado B (anteriormente AAV-5). [58]
Hasta la década de 1990, prácticamente toda la biología del AAV se estudiaba utilizando el serotipo 2 del AAV. Sin embargo, el AAV es muy prevalente en humanos y otros primates y se han aislado varios serotipos de varias muestras de tejido. Los serotipos 2, 3, 5 y 6 se descubrieron en células humanas, los serotipos 1, 4 y 7-11 del AAV en muestras de primates no humanos. [59] Hasta 2006 se han descrito 11 serotipos de AAV , el undécimo en 2004. [60] Las proteínas de la cápside del AAV contienen 12 regiones de superficie hipervariables, y la mayor parte de la variabilidad se produce en los picos proximales triples, pero el genoma del parvovirus en general presenta genes estructurales y de replicación altamente conservados en todos los serotipos. [59] Todos los serotipos conocidos pueden infectar células de múltiples tipos de tejidos diversos. La especificidad del tejido está determinada por el serotipo de la cápside y la pseudotipificación de los vectores AAV para alterar su rango de tropismo probablemente será importante para su uso en terapia.
Se han descrito tres receptores celulares para AAV2: el proteoglicano de heparán sulfato (HSPG), una integrina V β 5 y el receptor 1 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR-1). El primero funciona como un receptor primario, mientras que los dos últimos tienen una actividad de correceptor y permiten que AAV entre en la célula por endocitosis mediada por receptor . [70] [71] [72] Estos resultados del estudio han sido cuestionados por Qiu, Handa, et al. [73] HSPG funciona como el receptor primario, aunque su abundancia en la matriz extracelular puede eliminar partículas de AAV y perjudicar la eficiencia de la infección. [74]
Los estudios han demostrado que el serotipo 2 del virus (AAV-2) aparentemente mata las células cancerosas sin dañar las sanas. "Nuestros resultados sugieren que el virus adenoasociado tipo 2, que infecta a la mayoría de la población pero no tiene efectos nocivos conocidos, mata múltiples tipos de células cancerosas pero no tiene efecto sobre las células sanas", dijo Craig Meyers, [75] profesor de inmunología y microbiología en la Facultad de Medicina de Penn State en Pensilvania en 2005. [76] Esto podría conducir al desarrollo de un nuevo agente anticanceroso.
En marzo de 2023, una serie de artículos de Nature vincularon la infección del virus adenoasociado 2 (AAV2) con una ola de hepatitis infantil. [6]
Otros serotipos
Aunque el AAV2 es el serotipo más popular en diversas investigaciones basadas en AAV, se ha demostrado que otros serotipos pueden ser más eficaces como vectores de administración de genes. El AAV9 pasa la barrera hematoencefálica en humanos, el AAV6 parece ser mucho mejor en la infección de células epiteliales de las vías respiratorias, [77] [78] El AAV7 presenta una tasa de transducción muy alta de células musculares esqueléticas murinas (similar al AAV1 y AAV5), el AAV8 transduce hepatocitos [79] [80] [81] y se ha demostrado que el AAV1 y el 5 son muy eficientes en la administración de genes a las células endoteliales vasculares. [82] En el cerebro, la mayoría de los serotipos de AAV muestran tropismo neuronal, mientras que el AAV5 también transduce astrocitos. [83] El AAV6, un híbrido de AAV1 y AAV2, [81] también muestra una inmunogenicidad menor que el AAV2. [80]
Los serotipos pueden diferir en cuanto a los receptores a los que se unen. Por ejemplo, la transducción de AAV4 y AAV5 puede ser inhibida por ácidos siálicos solubles (de forma diferente para cada uno de estos serotipos), [84] y se ha demostrado que AAV5 ingresa a las células a través del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas . [85]
Serotipos sintéticos
Se han hecho muchos esfuerzos para diseñar y mejorar nuevas variantes de AAV tanto para fines clínicos como de investigación. Dichas modificaciones incluyen nuevos tropismos para dirigirse a tejidos específicos y residuos superficiales modificados para evadir la detección por parte del sistema inmunológico. Además de optar por cepas particulares de AAV recombinante (rAAV) para dirigirse a células particulares, los investigadores también han explorado la pseudotipificación de AAV, la práctica de crear híbridos de ciertas cepas de AAV para acercarse a un objetivo aún más refinado. El híbrido se crea tomando una cápside de una cepa y el genoma de otra cepa. Por ejemplo, la investigación con AAV2/5, un híbrido con el genoma de AAV2 y la cápside de AAV5, pudo lograr más precisión y rango en las células cerebrales de lo que AAV2 podría lograr sin hibridar. Los investigadores han seguido experimentando con la pseudotipificación mediante la creación de cepas con cápsides híbridas. AAV-DJ tiene una cápside híbrida de ocho cepas diferentes de AAV; Como tal, puede infectar diferentes células en muchas áreas del cuerpo, una propiedad que una sola cepa de AAV con un tropismo limitado no tendría. [86] Otros esfuerzos para diseñar y mejorar nuevas variantes de AAV han involucrado la reconstrucción ancestral de variantes del virus para generar nuevos vectores con propiedades mejoradas para aplicaciones clínicas y el estudio de la biología de AAV. [87]
Inmunología
El AAV es de particular interés para los terapeutas genéticos debido a su aparente capacidad limitada para inducir respuestas inmunes en humanos, un factor que debería influir positivamente en la eficiencia de la transducción del vector al tiempo que reduce el riesgo de cualquier patología asociada al sistema inmunológico .
No se considera que el AAV tenga ningún papel conocido en la enfermedad. [88] Sin embargo, la respuesta del sistema inmunitario del huésped y la tolerancia inmunitaria reducen la eficacia de la terapia génica mediada por AAV. Se ha demostrado que la respuesta inmunitaria del huésped responde a los vectores AAV, las células transducidas y las proteínas transducidas. [89] La respuesta inmunitaria se puede subdividir en dos categorías: innata y adaptativa, la última de las cuales se divide en humoral y mediada por células. [90] [91]
Innato
La respuesta inmunitaria innata a los vectores AAV se ha caracterizado en modelos animales. La administración intravenosa en ratones provoca la producción transitoria de citocinas proinflamatorias y cierta infiltración de neutrófilos y otros leucocitos en el hígado, lo que parece secuestrar un gran porcentaje de las partículas virales inyectadas. Tanto los niveles de factor soluble como la infiltración celular parecen volver a los valores basales en seis horas. Por el contrario, los virus más agresivos producen respuestas innatas que duran 24 horas o más. [92]
Los estudios in vivo indican que los vectores AAV interactúan con las vías del receptor tipo Toll (TLR)9 y TLR2-MyD88 para desencadenar la respuesta inmunitaria innata estimulando la producción de interferones. [93] Se ha demostrado que los ratones deficientes en TLR9 son más receptivos al tratamiento con AAV y demuestran niveles más altos de expresión transgénica [94].
Humorístico
Debido a una infección natural previa, muchas personas tienen anticuerpos neutralizantes (NAb) preexistentes contra los AAV, lo que puede dificultar significativamente su aplicación en la terapia génica. [95] Aunque los AAV son muy variables entre las variantes de tipo salvaje y sintéticas, los sitios de reconocimiento de anticuerpos pueden estar conservados evolutivamente. [96]
Se sabe que el virus genera una inmunidad humoral robusta en modelos animales y en la población humana, donde se cree que hasta el 80% de los individuos son seropositivos para AAV2. Se sabe que los anticuerpos son neutralizantes y, para aplicaciones de terapia génica, estos afectan la eficiencia de la transducción del vector a través de algunas vías de administración. Además de los niveles persistentes de anticuerpos específicos de AAV, parece que, tanto en estudios de sensibilización y refuerzo en animales como en ensayos clínicos, la memoria de las células B también es fuerte. [97] En humanos seropositivos, los anticuerpos IgG circulantes para AAV2 parecen estar compuestos principalmente por las subclases IgG1 e IgG2, con poca o ninguna presencia de IgG3 o IgG4. [98]
Mediada por células
La respuesta mediada por células al virus y a los vectores está poco caracterizada y ha sido ampliamente ignorada en la literatura hasta 2005. [97] Los ensayos clínicos que utilizan un vector basado en AAV2 para tratar la hemofilia B parecen indicar que puede estar ocurriendo una destrucción dirigida de las células transducidas. [99] Combinado con datos que muestran que las células T CD8+ pueden reconocer elementos de la cápside de AAV in vitro , [100] parece que puede haber una respuesta de linfocitos T citotóxicos a los vectores de AAV. Las respuestas citotóxicas implicarían la participación de las células T auxiliares CD4+ en la respuesta a AAV y los datos in vitro de estudios humanos sugieren que el virus puede de hecho inducir tales respuestas, incluidas las respuestas de memoria Th1 y Th2. [98] Se han identificado varios epítopos candidatos estimulantes de células T dentro de la proteína VP1 de la cápside de AAV, que pueden ser objetivos atractivos para la modificación de la cápside si el virus se va a utilizar como vector para terapia génica. [98] [99]
Ciclo de infección
Hay varios pasos en el ciclo de infección del AAV, desde la infección de una célula hasta la producción de nuevas partículas infecciosas: [ cita requerida ]
Algunos de estos pasos pueden ser diferentes en distintos tipos de células, lo que, en parte, contribuye al tropismo nativo definido y bastante limitado del AAV. La replicación del virus también puede variar en un tipo de célula, dependiendo de la fase actual del ciclo celular de la célula . [101]
La característica característica del virus adenoasociado es una deficiencia en la replicación y, por lo tanto, su incapacidad para multiplicarse en células no afectadas. El virus adenoasociado se propaga mediante la coinfección de una célula con un virus auxiliar. El primer virus auxiliar que se describió como generador de nuevas partículas de AAV fue el adenovirus, del que se originó el nombre AAV. Luego se demostró que la replicación de AAV puede ser facilitada por proteínas seleccionadas derivadas del genoma del adenovirus, [102] [103] por otros virus como HSV [104] o vaccinia, o por agentes genotóxicos, como la irradiación UV o la hidroxiurea . [105] [106] [107] Dependiendo de la presencia o ausencia de un virus auxiliar, el ciclo de vida del AAV sigue una vía lítica o lisogénica, respectivamente. [108] Si hay un virus auxiliar, la expresión génica del AAV se activa, lo que permite que el virus se replique utilizando la polimerasa de la célula huésped. Cuando el virus auxiliar mata a la célula huésped, se liberan los nuevos viriones del AAV. Si no hay un virus auxiliar presente, el AAV exhibe un comportamiento lisogénico. Cuando el AAV infecta una célula solo, su expresión genética se reprime (el AAV no se replica) y su genoma se incorpora al genoma del huésped (en el cromosoma humano 19). En casos raros, la lisis puede ocurrir sin un virus auxiliar, pero por lo general el AAV no puede replicarse y matar una célula por sí solo. [109]
Matsushita, Ellinger et al. descubrieron el conjunto mínimo de genes adenovirales necesarios para la generación eficiente de partículas de AAV progenie. [102] Este descubrimiento permitió nuevos métodos de producción de AAV recombinantes, que no requieren coinfección adenoviral de las células productoras de AAV. En ausencia de virus auxiliares o factores genotóxicos, el ADN de AAV puede integrarse en el genoma del huésped o persistir en forma episomal . En el primer caso, la integración está mediada por las proteínas Rep78 y Rep68 y requiere la presencia de ITR que flanqueen la región que se está integrando. En ratones, se ha observado que el genoma de AAV persiste durante largos períodos de tiempo en tejidos inactivos, como los músculos esqueléticos, en forma episomal (una conformación circular de cabeza a cola). [110]
^ Naso MF, Tomkowicz B, Perry WL, Strohl WR (agosto de 2017). "Virus adenoasociado (AAV) como vector para terapia génica". BioDrugs . 31 (4): 317–334. doi :10.1007/s40259-017-0234-5. PMC 5548848 . PMID 28669112.
^ Wu Z, Yang H, Colosi P (enero de 2010). "Efecto del tamaño del genoma en el empaquetamiento del vector AAV". Molecular Therapy . 18 (1): 80–86. doi :10.1038/mt.2009.255. PMC 2839202 . PMID 19904234.
^ Grieger JC, Samulski RJ (2005). "Virus adenoasociado como vector de terapia génica: desarrollo de vectores, producción y aplicaciones clínicas". Virus adenoasociado como vector de terapia génica: desarrollo de vectores, producción y aplicaciones clínicas . Avances en ingeniería bioquímica/biotecnología. Vol. 99. págs. 119–45. doi :10.1007/10_005. ISBN978-3-540-28404-8. Número de identificación personal 16568890.
^ Deyle DR, Russell DW (agosto de 2009). "Integración de vectores virales adenoasociados". Current Opinion in Molecular Therapeutics . 11 (4): 442–7. PMC 2929125 . PMID 19649989.
^ ab Maguire AM, Simonelli F, Pierce EA, Pugh EN, Mingozzi F, Bennicelli J, et al. (mayo de 2008). "Seguridad y eficacia de la transferencia de genes para la amaurosis congénita de Leber". La Revista de Medicina de Nueva Inglaterra . 358 (21): 2240–8. doi :10.1056/NEJMoa0802315. PMC 2829748 . PMID 18441370.
^ ab Tacke F (mayo de 2023). "Brote de hepatitis grave en niños relacionado con el virus AAV2". Nature . 617 (7961): 471–472. Bibcode :2023Natur.617..471T. doi :10.1038/d41586-023-00570-8. PMID 36997704.
^ Servellita V, Sotomayor Gonzalez A, Lamson DM, Foresythe A, Huh HJ, Bazinet AL, et al. (mayo de 2023). "Virus adenoasociado tipo 2 en niños estadounidenses con hepatitis aguda grave". Nature . 617 (7961): 574–580. Bibcode :2023Natur.617..574S. doi :10.1038/s41586-023-05949-1. PMC 10170441 . PMID 36996871.
^ Carter BJ (diciembre de 2004). "Virus adenoasociados y desarrollo de vectores virales adenoasociados: una perspectiva histórica". Terapia molecular . 10 (6): 981–9. doi : 10.1016/j.ymthe.2004.09.011 . PMID 15564130.
^ Kotin RM, Siniscalco M, Samulski RJ, Zhu XD, Hunter L, Laughlin CA, et al. (marzo de 1990). "Integración específica de sitio por virus adenoasociados". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 87 (6): 2211–5. Bibcode :1990PNAS...87.2211K. doi : 10.1073/pnas.87.6.2211 . PMC 53656 . PMID 2156265.
^ Surosky RT, Urabe M, Godwin SG, McQuiston SA, Kurtzman GJ, Ozawa K, et al. (octubre de 1997). "Las proteínas Rep del virus adenoasociado dirigen secuencias de ADN a un locus único en el genoma humano". Revista de Virología . 71 (10): 7951–9. doi :10.1128/JVI.71.10.7951-7959.1997. PMC 192153 . PMID 9311886.
^ ab Daya S, Berns KI (octubre de 2008). "Terapia génica utilizando vectores virales adenoasociados". Clinical Microbiology Reviews . 21 (4): 583–93. doi :10.1128/CMR.00008-08. PMC 2570152 . PMID 18854481.
^ Chirmule N, Propert K, Magosin S, Qian Y, Qian R, Wilson J (septiembre de 1999). "Respuestas inmunes a adenovirus y virus adenoasociados en humanos". Terapia genética . 6 (9): 1574–83. doi : 10.1038/sj.gt.3300994 . PMID 10490767.
^ Hernandez YJ, Wang J, Kearns WG, Loiler S, Poirier A, Flotte TR (octubre de 1999). "La infección latente por virus adenoasociados provoca respuestas inmunitarias humorales pero no celulares en un modelo de primate no humano". Journal of Virology . 73 (10): 8549–58. doi :10.1128/JVI.73.10.8549-8558.1999. PMC 112875 . PMID 10482608.
^ Ponnazhagan S, Mukherjee P, Yoder MC, Wang XS, Zhou SZ, Kaplan J, et al. (abril de 1997). "Transferencia génica mediada por el virus adenoasociado 2 in vivo: tropismo orgánico y expresión de secuencias transducidas en ratones". Gene . 190 (1): 203–10. doi :10.1016/S0378-1119(96)00576-8. PMID 9185868.
^ Bak RO, Porteus MH (julio de 2017). "Integración de casetes de genes grandes mediada por CRISPR utilizando vectores donantes AAV". Cell Reports . 20 (3): 750–756. doi :10.1016/j.celrep.2017.06.064. PMC 5568673 . PMID 28723575.
^ McCarty DM, Monahan PE, Samulski RJ (agosto de 2001). "Los vectores virales adenoasociados recombinantes autocomplementarios (scAAV) promueven una transducción eficiente independientemente de la síntesis de ADN". Terapia génica . 8 (16): 1248–54. doi : 10.1038/sj.gt.3301514 . PMID 11509958.
^ Rogers GL, Martino AT, Zolotukhin I, Ertl HC, Herzog RW (enero de 2014). "Papel del genoma del vector y mutación subyacente del factor IX en las respuestas inmunes a la terapia génica AAV para la hemofilia B". Revista de medicina traslacional . 12 : 25. doi : 10.1186/1479-5876-12-25 . PMC 3904690 . PMID 24460861.
^ "Vectores utilizados en ensayos clínicos de terapia génica". Journal of Gene Medicine . Wiley. Diciembre de 2018. Archivado desde el original el 21 de octubre de 2019 . Consultado el 4 de enero de 2012 .
^ Bainbridge JW, Smith AJ, Barker SS, Robbie S, Henderson R, Balaggan K, et al. (mayo de 2008). "Efecto de la terapia génica en la función visual en la amaurosis congénita de Leber". The New England Journal of Medicine . 358 (21): 2231–9. CiteSeerX 10.1.1.574.4003 . doi :10.1056/NEJMoa0802268. PMID 18441371.
^ Hauswirth WW, Aleman TS, Kaushal S, Cideciyan AV, Schwartz SB, Wang L, et al. (octubre de 2008). "Tratamiento de la amaurosis congénita de Leber debida a mutaciones RPE65 mediante inyección subretinal ocular del vector genético del virus adenoasociado: resultados a corto plazo de un ensayo de fase I". Terapia génica humana . 19 (10): 979–90. doi :10.1089/hum.2008.107. PMC 2940541. PMID 18774912 .
^ Nathwani AC, Tuddenham EG, Rangarajan S, Rosales C, McIntosh J, Linch DC, et al. (Diciembre de 2011). "Transferencia de genes mediada por vectores de virus asociados a adenovirus en la hemofilia B". La Revista de Medicina de Nueva Inglaterra . 365 (25): 2357–65. doi :10.1056/NEJMoa1108046. PMC 3265081 . PMID 22149959.
^ Jessup M, Greenberg B, Mancini D, Cappola T, Pauly DF, Jaski B, et al. (julio de 2011). "Regulación positiva del calcio mediante la administración percutánea de terapia génica en enfermedades cardíacas (CUPID): un ensayo de fase 2 de terapia génica intracoronaria de la Ca2+-ATPasa del retículo sarcoplásmico en pacientes con insuficiencia cardíaca avanzada". Circulation . 124 (3): 304–13. doi :10.1161/CIRCULATIONAHA.111.022889. PMC 5843948 . PMID 21709064.
^ "AveXis informa datos del ensayo de fase 1 en curso de AVXS-101 en la atrofia muscular espinal tipo 1". Avexis . 6 de mayo de 2016. Archivado desde el original el 11 de junio de 2017 . Consultado el 8 de mayo de 2016 .
^ Gaudet D, Méthot J, Déry S, Brisson D, Essiembre C, Tremblay G, et al. (abril de 2013). "Eficacia y seguridad a largo plazo de la terapia génica con alipogene tiparvovec (AAV1-LPLS447X) para la deficiencia de lipoproteína lipasa: un ensayo abierto". Gene Ther . 20 (4): 361–9. doi :10.1038/gt.2012.43. PMC 4956470 . PMID 22717743.
^ LeWitt PA, Rezai AR, Leehey MA, Ojemann SG, Flaherty AW, Eskandar EN, et al. (abril de 2011). "Terapia génica AAV2-GAD para la enfermedad de Parkinson avanzada: un ensayo aleatorizado, controlado con cirugía simulada y doble ciego". The Lancet. Neurología . 10 (4): 309–19. doi :10.1016/S1474-4422(11)70039-4. PMID 21419704. S2CID 37154043.
^ Carter BJ (mayo de 2005). "Vectores virales adenoasociados en ensayos clínicos". Terapia génica humana . 16 (5): 541–50. doi :10.1089/hum.2005.16.541. PMID 15916479.
^ Kaplitt MG, Feigin A, Tang C, Fitzsimons HL, Mattis P, Lawlor PA, et al. (junio de 2007). "Seguridad y tolerabilidad de la terapia génica con un gen GAD transmitido por un virus adenoasociado (AAV) para la enfermedad de Parkinson: un ensayo de fase I de etiqueta abierta". Lancet . 369 (9579): 2097–105. doi :10.1016/S0140-6736(07)60982-9. PMID 17586305. S2CID 24491886.
^ Carter BJ (2000). "Virus adenoasociados y vectores de virus adenoasociados para la administración de genes". En Lassic DD, Templeton NS (eds.). Terapia génica: mecanismos y estrategias terapéuticas . Ciudad de Nueva York: Marcel Dekker, Inc., págs. 41–59. ISBN978-0-585-39515-9.
^ Bohenzky RA, LeFebvre RB, Berns KI (octubre de 1988). "Requisitos de secuencia y simetría dentro de las secuencias palindrómicas internas de la repetición terminal del virus adenoasociado". Virología . 166 (2): 316–27. doi :10.1016/0042-6822(88)90502-8. PMID 2845646.
^ Wang XS, Ponnazhagan S, Srivastava A (julio de 1995). "Señales de rescate y replicación del genoma del virus adenoasociado 2". Journal of Molecular Biology . 250 (5): 573–80. doi :10.1006/jmbi.1995.0398. PMID 7623375.
^ ab Weitzman MD, Kyöstiö SR, Kotin RM, Owens RA (junio de 1994). "Las proteínas Rep del virus adenoasociado (AAV) median la formación de complejos entre el ADN del AAV y su sitio de integración en el ADN humano". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 91 (13): 5808–12. Bibcode :1994PNAS...91.5808W. doi : 10.1073/pnas.91.13.5808 . PMC 44086 . PMID 8016070.
^ Zhou X, Muzyczka N (abril de 1998). "Embalaje in vitro de ADN de virus adenoasociados". Revista de Virología . 72 (4): 3241–7. doi :10.1128/JVI.72.4.3241-3247.1998. PMC 109794 . PMID 9525651.
^ Nony P, Tessier J, Chadeuf G, Ward P, Giraud A, Dugast M, et al. (octubre de 2001). "Un nuevo elemento de replicación que actúa en cis en el genoma del virus adenoasociado tipo 2 está involucrado en la amplificación de secuencias rep-cap integradas". Journal of Virology . 75 (20): 9991–4. doi :10.1128/JVI.75.20.9991-9994.2001. PMC 114572 . PMID 11559833.
^ Nony P, Chadeuf G, Tessier J, Moullier P, Salvetti A (enero de 2003). "Evidencia de empaquetamiento de secuencias rep-cap en cápsides de virus adenoasociados (AAV) tipo 2 en ausencia de repeticiones terminales invertidas: un modelo para la generación de partículas AAV rep-positivas". Journal of Virology . 77 (1): 776–81. doi :10.1128/JVI.77.1.776-781.2003. PMC 140600 . PMID 12477885.
^ Philpott NJ, Giraud-Wali C, Dupuis C, Gomos J, Hamilton H, Berns KI, et al. (junio de 2002). "La integración eficiente de vectores de ADN de virus adenoasociados recombinantes requiere una secuencia p5-rep en cis". Journal of Virology . 76 (11): 5411–21. doi :10.1128/JVI.76.11.5411-5421.2002. PMC 137060 . PMID 11991970.
^ Tullis GE, Shenk T (diciembre de 2000). "Replicación eficiente de vectores de virus adenoasociados tipo 2: un elemento que actúa en cis fuera de las repeticiones terminales y un tamaño mínimo". Journal of Virology . 74 (24): 11511–21. doi :10.1128/JVI.74.24.11511-11521.2000. PMC 112431 . PMID 11090148.
^ ab Kyöstiö SR, Owens RA, Weitzman MD, Antoni BA, Chejanovsky N, Carter BJ (mayo de 1994). "Análisis de las proteínas Rep de tipo salvaje y mutantes del virus adenoasociado (AAV) para determinar su capacidad de regular negativamente los niveles de ARNm p5 y p19 del AAV". Journal of Virology . 68 (5): 2947–57. doi :10.1128/JVI.68.5.2947-2957.1994. PMC 236783 . PMID 8151765.
^ Im DS, Muzyczka N (mayo de 1990). "La proteína de unión al origen de AAV Rep68 es una endonucleasa específica del sitio dependiente de ATP con actividad de helicasa de ADN". Cell . 61 (3): 447–57. doi :10.1016/0092-8674(90)90526-K. PMID 2159383. S2CID 27997617.
^ Im DS, Muzyczka N (febrero de 1992). "Purificación parcial de los virus adenoasociados Rep78, Rep52 y Rep40 y su caracterización bioquímica". Journal of Virology . 66 (2): 1119–28. doi :10.1128/JVI.66.2.1119-1128.1992. PMC 240816 . PMID 1309894.
^ Samulski RJ (2003). "Vectores AAV, el futuro caballo de batalla de la terapia génica humana". Taller de la Fundación de Investigación Ernst Schering . Terapia génica humana: oportunidades actuales y tendencias futuras. pp. 25–40. doi :10.1007/978-3-662-05352-2_3. ISBN978-3-662-05354-6. Número de identificación personal 12894449.
^ Trempe JP, Carter BJ (enero de 1988). "Regulación de la expresión génica del virus adenoasociado en células 293: control de la abundancia y traducción del ARNm". Journal of Virology . 62 (1): 68–74. doi :10.1128/JVI.62.1.68-74.1988. PMC 250502 . PMID 2824856.
^ Jay FT, Laughlin CA, Carter BJ (mayo de 1981). "Control de la traducción eucariota: la síntesis de proteínas del virus adenoasociado se ve afectada por una mutación en la proteína de unión al ADN del adenovirus". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 78 (5): 2927–31. Bibcode :1981PNAS...78.2927J. doi : 10.1073/pnas.78.5.2927 . PMC 319472 . PMID 6265925.
^ Sonntag F, Schmidt K, Kleinschmidt JA (junio de 2010). "Un factor de ensamblaje viral promueve la formación de la cápside de AAV2 en el nucléolo". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 107 (22): 10220–5. Bibcode :2010PNAS..10710220S. doi : 10.1073/pnas.1001673107 . PMC 2890453 . PMID 20479244.
^ Pierson EE, Keifer DZ, Asokan A, Jarrold MF (julio de 2016). "Resolución de la diversidad de partículas virales adenoasociadas con espectrometría de masas de detección de carga". Química analítica . 88 (13). Sociedad Química Estadounidense (ACS): 6718–6725. doi :10.1021/acs.analchem.6b00883. PMC 6537880 . PMID 27310298.
^ Xie Q, Bu W, Bhatia S, Hare J, Somasundaram T, Azzi A, et al. (agosto de 2002). "La estructura atómica del virus adenoasociado (AAV-2), un vector para la terapia génica humana". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 99 (16): 10405–10. Bibcode :2002PNAS...9910405X. doi : 10.1073/pnas.162250899 . PMC 124927 . PMID 12136130.
^ Sonntag F, Köther K, Schmidt K, Weghofer M, Raupp C, Nieto K, et al. (diciembre de 2011). "La proteína activadora del ensamblaje promueve el ensamblaje de la cápside de diferentes serotipos de virus adenoasociados". Journal of Virology . 85 (23): 12686–97. doi :10.1128/JVI.05359-11. PMC 3209379 . PMID 21917944.
^ Becerra SP, Rose JA, Hardy M, Baroudy BM, Anderson CW (diciembre de 1985). "Mapeo directo de las proteínas B y C de la cápside del virus adenoasociado: un posible codón de iniciación ACG". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 82 (23): 7919–23. Bibcode :1985PNAS...82.7919B. doi : 10.1073/pnas.82.23.7919 . PMC 390881 . PMID 2999784.
^ Cassinotti P, Weitz M, Tratschin JD (noviembre de 1988). "Organización del gen de la cápside del virus adenoasociado (AAV): mapeo de un ARNm empalmado menor que codifica la proteína 1 de la cápside del virus". Virology . 167 (1): 176–84. doi :10.1016/0042-6822(88)90067-0. PMID 2847413.
^ ab Muralidhar S, Becerra SP, Rose JA (enero de 1994). "Mutagénesis dirigida al sitio de los codones de iniciación de la proteína estructural del virus adenoasociado tipo 2: efectos sobre la regulación de la síntesis y la actividad biológica". Journal of Virology . 68 (1): 170–6. doi :10.1128/JVI.68.1.170-176.1994. PMC 236275 . PMID 8254726.
^ Trempe JP, Carter BJ (septiembre de 1988). "Se requiere un empalme alternativo de ARNm para la síntesis de la proteína de la cápside VP1 del virus adenoasociado". Journal of Virology . 62 (9): 3356–63. doi :10.1128/JVI.62.9.3356-3363.1988. PMC 253458 . PMID 2841488.
^ Rabinowitz JE, Samulski RJ (diciembre de 2000). "Construcción de un mejor vector: la manipulación de viriones AAV". Virology . 278 (2): 301–8. doi : 10.1006/viro.2000.0707 . PMID 11118354.
^ Girod A, Wobus CE, Zádori Z, Ried M, Leike K, Tijssen P, et al. (mayo de 2002). "La proteína de la cápside VP1 del virus adenoasociado tipo 2 lleva un dominio de fosfolipasa A2 necesario para la infectividad del virus". The Journal of General Virology . 83 (Pt 5): 973–8. doi : 10.1099/0022-1317-83-5-973 . PMID 11961250.
^ Warrington KH, Gorbatyuk OS, Harrison JK, Opie SR, Zolotukhin S, Muzyczka N (junio de 2004). "La proteína de la cápside VP2 del virus adenoasociado tipo 2 no es esencial y puede tolerar grandes inserciones de péptidos en su extremo N". Journal of Virology . 78 (12): 6595–609. doi :10.1128/JVI.78.12.6595-6609.2004. PMC 416546 . PMID 15163751.
^ Rumachik NG, Malaker SA, Poweleit N, Maynard LH, Adams CM, Leib RD, et al. (mayo de 2020). "Los métodos importan: las plataformas de producción estándar para AAV recombinantes producen vectores química y funcionalmente distintos". Terapia molecular: métodos y desarrollo clínico . 18 : 98–118. doi :10.1016/j.omtm.2020.05.018. PMC 7488757. PMID 32995354 .
^ Chen Q, Njenga R, Leuchs B, Chiocca S, Kleinschmidt J, Muller M (septiembre de 2020). "La sumoilación se dirige a las cápsides virales adenoasociadas, pero restringe principalmente la transducción por mecanismos celulares". Journal of Virology . 94 (19): e00871-20. doi :10.1128/JVI.00871-20. PMC 7495375 . PMID 32669341.
^ Giles AR, Sims JJ, Turner KB, Govindasamy L, Alvira MR, Lock M, et al. (diciembre de 2018). "La desamidación de aminoácidos en la superficie de las cápsides virales adenoasociadas conduce a la heterogeneidad de la carga y a la alteración de la función del vector". Molecular Therapy . 26 (12): 2848–2862. doi :10.1016/j.ymthe.2018.09.013. PMC 6277538 . PMID 30343890.
^ "Tropismos AAV". VectorBuilder .
^ "Subfamilia: Parvovirinae, Género: Dependoparvovirus". Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) . Consultado el 31 de enero de 2020 .
^ ab Weitzman MD, Linden RM (2011). "Biología de virus adenoasociados". En Snyder RO, Moullier P (eds.). Métodos y protocolos de virus adenoasociados . Totowa, NJ: Humana Press. ISBN978-1-61779-370-7.
^ Mori S, Wang L, Takeuchi T, Kanda T (diciembre de 2004). "Dos nuevos virus adenoasociados del mono cynomolgus: caracterización pseudotipificada de la proteína de la cápside". Virology . 330 (2): 375–83. doi : 10.1016/j.virol.2004.10.012 . PMID 15567432.
^ ab Bartlett JS, Samulski RJ, McCown TJ (mayo de 1998). "Captación selectiva y rápida del virus adenoasociado tipo 2 en el cerebro". Terapia génica humana . 9 (8): 1181–6. doi :10.1089/hum.1998.9.8-1181. PMID 9625257.
^ Fischer AC, Beck SE, Smith CI, Laube BL, Askin FB, Guggino SE, et al. (diciembre de 2003). "Expresión transgénica exitosa con dosis seriadas de vectores rAAV2 aerosolizados en macacos rhesus". Molecular Therapy . 8 (6): 918–26. doi : 10.1016/j.ymthe.2003.08.015 . PMID 14664794.
^ Nicklin SA, Buening H, Dishart KL, de Alwis M, Girod A, Hacker U, et al. (septiembre de 2001). "Transferencia génica mediada por AAV2 eficiente y selectiva dirigida a células endoteliales vasculares humanas". Molecular Therapy . 4 (3): 174–81. doi : 10.1006/mthe.2001.0424 . PMID 11545607.
^ Rabinowitz JE, Xiao W, Samulski RJ (diciembre de 1999). "Mutagénesis por inserción de la cápside de AAV2 y producción de virus recombinante". Virología . 265 (2): 274–85. doi : 10.1006/viro.1999.0045 . PMID 10600599.
^ Shi W, Bartlett JS (abril de 2003). "La inclusión de RGD en VP3 proporciona vectores basados en virus adenoasociados tipo 2 (AAV2) con un mecanismo de entrada celular independiente del heparán sulfato". Molecular Therapy . 7 (4): 515–25. doi : 10.1016/S1525-0016(03)00042-X . PMID 12727115.
^ Wu P, Xiao W, Conlon T, Hughes J, Agbandje-McKenna M, Ferkol T, et al. (septiembre de 2000). "Análisis mutacional del gen de la cápside del virus adenoasociado tipo 2 (AAV2) y construcción de vectores AAV2 con tropismo alterado". Journal of Virology . 74 (18): 8635–47. doi :10.1128/JVI.74.18.8635-8647.2000. PMC 102071 . PMID 10954565.
^ Manno CS, Chew AJ, Hutchison S, Larson PJ, Herzog RW, Arruda VR, et al. (abril de 2003). "Transferencia del gen del factor IX mediada por AAV al músculo esquelético en pacientes con hemofilia B grave". Blood . 101 (8): 2963–72. doi : 10.1182/blood-2002-10-3296 . PMID 12515715.
^ Richter M, Iwata A, Nyhuis J, Nitta Y, Miller AD, Halbert CL y col. (Abril de 2000). "Transducción de vectores de virus adenoasociados de células del músculo liso vascular in vivo". Genómica fisiológica . 2 (3): 117–27. doi :10.1152/fisiolgenomics.2000.2.3.117. PMID 11015590. S2CID 14150468.
^ Koeberl DD, Alexander IE, Halbert CL, Russell DW, Miller AD (febrero de 1997). "Expresión persistente del factor IX de coagulación humano en el hígado de ratón tras la inyección intravenosa de vectores virales adenoasociados". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 94 (4): 1426–31. Bibcode :1997PNAS...94.1426K. doi : 10.1073/pnas.94.4.1426 . PMC 19807 . PMID 9037069.
^ Qing K, Mah C, Hansen J, Zhou S, Dwarki V, Srivastava A (enero de 1999). "El receptor 1 del factor de crecimiento de fibroblastos humanos es un correceptor de la infección por el virus adenoasociado 2". Nature Medicine . 5 (1): 71–7. doi :10.1038/4758. PMID 9883842. S2CID 31602526.
^ Summerford C, Samulski RJ (febrero de 1998). "El proteoglicano de heparán sulfato asociado a membrana es un receptor para los viriones del virus adenoasociado tipo 2". Journal of Virology . 72 (2): 1438–45. doi :10.1128/JVI.72.2.1438-1445.1998. PMC 124624 . PMID 9445046.
^ Summerford C, Bartlett JS, Samulski RJ (enero de 1999). "Integrina AlphaVbeta5: un correceptor para la infección por virus adenoasociado tipo 2". Nature Medicine . 5 (1): 78–82. doi :10.1038/4768. PMID 9883843. S2CID 23326070.
^ Qiu J, Handa A, Kirby M, Brown KE (marzo de 2000). "La interacción del sulfato de heparina y el virus adenoasociado 2". Virología . 269 (1): 137–47. doi : 10.1006/viro.2000.0205 . PMID 10725206.
^ Pajusola K, Gruchala M, Joch H, Lüscher TF, Ylä-Herttuala S, Büeler H (noviembre de 2002). "Las características específicas del tipo celular modulan la eficiencia de transducción del virus adenoasociado tipo 2 y restringen la infección de las células endoteliales". Journal of Virology . 76 (22): 11530–40. doi :10.1128/JVI.76.22.11530-11540.2002. PMC 136795 . PMID 12388714.
^ "Un virus común 'mata el cáncer'". CNN . 22 de junio de 2005 . Consultado el 5 de agosto de 2009 .
^ Penn State (23 de junio de 2005). "Un virus inofensivo mata algunos tipos de cáncer". Science Daily.
^ Limberis MP, Vandenberghe LH, Zhang L, Pickles RJ, Wilson JM (febrero de 2009). "Eficiencias de transducción de nuevos vectores AAV en el epitelio de las vías respiratorias de ratones in vivo y en el epitelio ciliado de las vías respiratorias humanas in vitro". Molecular Therapy . 17 (2): 294–301. doi :10.1038/mt.2008.261. PMC 2835069 . PMID 19066597.
^ Strobel B, Duechs MJ, Schmid R, Stierstorfer BE, Bucher H, Quast K, et al. (septiembre de 2015). "Modelado de vías de enfermedades pulmonares mediante el virus adenoasociado recombinante 6.2". American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology . 53 (3): 291–302. doi :10.1165/rcmb.2014-0338MA. PMID 25845025.
^ Gao GP, Alvira MR, Wang L, Calcedo R, Johnston J, Wilson JM (septiembre de 2002). "Nuevos virus adenoasociados de monos rhesus como vectores para la terapia génica humana". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 99 (18): 11854–9. Bibcode :2002PNAS...9911854G. doi : 10.1073/pnas.182412299 . PMC 129358 . PMID 12192090.
^ ab Halbert CL, Allen JM, Miller AD (julio de 2001). "Los vectores del virus adenoasociado tipo 6 (AAV6) median la transducción eficiente de las células epiteliales de las vías respiratorias en los pulmones de ratones en comparación con los vectores AAV2". Journal of Virology . 75 (14): 6615–24. doi :10.1128/JVI.75.14.6615-6624.2001. PMC 114385 . PMID 11413329.
^ ab Rabinowitz JE, Bowles DE, Faust SM, Ledford JG, Cunningham SE, Samulski RJ (mayo de 2004). "Travestismo del virión: la transcapsidación de serotipos de virus adenoasociados define funcionalmente los subgrupos". Journal of Virology . 78 (9): 4421–32. doi :10.1128/JVI.78.9.4421-4432.2004. PMC 387689 . PMID 15078923.
^ Chen S, Kapturczak M, Loiler SA, Zolotukhin S, Glushakova OY, Madsen KM, et al. (febrero de 2005). "Transducción eficiente de células endoteliales vasculares con vectores recombinantes del virus adenoasociado de serotipo 1 y 5". Terapia génica humana . 16 (2): 235–47. doi :10.1089/hum.2005.16.235. PMC 1364465. PMID 15761263 .
^ Ortinski PI, Dong J, Mungenast A, Yue C, Takano H, Watson DJ, et al. (mayo de 2010). "La inducción selectiva de la gliosis astrocítica genera déficits en la inhibición neuronal". Nature Neuroscience . 13 (5): 584–91. doi :10.1038/nn.2535. PMC 3225960 . PMID 20418874.
^ Kaludov N, Brown KE, Walters RW, Zabner J, Chiorini JA (agosto de 2001). "Los virus adenoasociados de serotipo 4 (AAV4) y AAV5 requieren la unión del ácido siálico para la hemaglutinación y la transducción eficiente, pero difieren en la especificidad del enlace del ácido siálico". Revista de Virología . 75 (15): 6884–93. doi :10.1128/JVI.75.15.6884-6893.2001. PMC 114416 . PMID 11435568.
^ Di Pasquale G, Davidson BL, Stein CS, Martins I, Scudiero D, Monks A, et al. (octubre de 2003). "Identificación de PDGFR como receptor para la transducción de AAV-5". Nature Medicine . 9 (10): 1306–12. doi :10.1038/nm929. PMID 14502277. S2CID 32547188.
^ "Guía del virus adenoasociado (AAV)". Addgene . Watertown, MA.
^ Zinn E, Pacouret S, Khaychuk V, Turunen HT, Carvalho LS, Andres-Mateos E, et al. (agosto de 2015). "La reconstrucción in silico del linaje evolutivo viral produce un potente vector de terapia génica". Cell Reports . 12 (6): 1056–68. doi :10.1016/j.celrep.2015.07.019. PMC 4536165 . PMID 26235624.
^ Flotte TR, Berns KI (abril de 2005). "Virus adenoasociado: un comensal ubicuo de los mamíferos". Terapia génica humana . 16 (4): 401–407. doi :10.1089/hum.2005.16.401. PMID 15871671.
^ Ronzitti G, Gross DA, Mingozzi F (2020). "Respuestas inmunitarias humanas a vectores virales adenoasociados (AAV)". Frontiers in Immunology . 11 : 670. doi : 10.3389/fimmu.2020.00670 . PMC 7181373 . PMID 32362898.
^ Vandamme C, Adjali O, Mingozzi F (noviembre de 2017). "Descifrando la compleja historia de las respuestas inmunitarias a los vectores AAV, ensayo tras ensayo". Terapia génica humana . 28 (11): 1061–1074. doi :10.1089/hum.2017.150. PMC 5649404 . PMID 28835127.
^ Barnes C, Scheideler O, Schaffer D (diciembre de 2019). "Ingeniería de la cápside del AAV para evadir las respuestas inmunitarias". Current Opinion in Biotechnology . 60 : 99–103. doi :10.1016/j.copbio.2019.01.002. PMC 7117822 . PMID 30807882.
^ Zaiss AK, Liu Q, Bowen GP, Wong NC, Bartlett JS, Muruve DA (mayo de 2002). "Activación diferencial de respuestas inmunes innatas por vectores de adenovirus y virus adenoasociados". Revista de Virología . 76 (9): 4580–90. doi :10.1128/JVI.76.9.4580-4590.2002. PMC 155101 . PMID 11932423.
^ Zhu J, Huang X, Yang Y (agosto de 2009). "La vía TLR9-MyD88 es fundamental para las respuestas inmunitarias adaptativas a los vectores de terapia génica de virus adenoasociados en ratones". The Journal of Clinical Investigation . 119 (8): 2388–2398. doi :10.1172/JCI37607. PMC 2719948 . PMID 19587448.
^ Martino AT, Suzuki M, Markusic DM, Zolotukhin I, Ryals RC, Moghimi B, et al. (junio de 2011). "El genoma de los vectores virales adenoasociados autocomplementarios aumenta las respuestas inmunitarias innatas dependientes del receptor tipo Toll 9 en el hígado". Blood . 117 (24): 6459–6468. doi :10.1182/blood-2010-10-314518. PMC 3123017 . PMID 21474674.
^ Calcedo R, Morizono H, Wang L, McCarter R, He J, Jones D, et al. (septiembre de 2011). "Perfiles de anticuerpos contra virus adenoasociados en recién nacidos, niños y adolescentes". Inmunología clínica y de vacunas . 18 (9): 1586–1588. doi :10.1128/CVI.05107-11. PMC 3165215 . PMID 21775517.
^ Tse LV, Klinc KA, Madigan VJ, Castellanos Rivera RM, Wells LF, Havlik LP, et al. (junio de 2017). "Evolución guiada por la estructura de variantes de virus adenoasociados antigénicamente distintas para la evasión inmunitaria". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 114 (24): E4812–E4821. Bibcode :2017PNAS..114E4812T. doi : 10.1073/pnas.1704766114 . PMC 5474820 . PMID 28559317.
^ ab Zaiss AK, Muruve DA (junio de 2005). "Respuestas inmunitarias a vectores virales adenoasociados". Current Gene Therapy . 5 (3): 323–31. doi :10.2174/1566523054065039. PMID 15975009.
^ abc Madsen D, Cantwell ER, O'Brien T, Johnson PA, Mahon BP (noviembre de 2009). "El virus adenoasociado de serotipo 2 induce respuestas inmunitarias mediadas por células dirigidas contra múltiples epítopos de la proteína de la cápside VP1". The Journal of General Virology . 90 (Pt 11): 2622–33. doi :10.1099/vir.0.014175-0. PMC 2885037 . PMID 19641045.
^ ab Manno CS, Pierce GF, Arruda VR, Glader B, Ragni M, Rasko JJ, et al. (Marzo de 2006). "Transducción exitosa del hígado en hemofilia por AAV-Factor IX y limitaciones impuestas por la respuesta inmune del huésped". Medicina de la Naturaleza . 12 (3): 342–7. doi :10.1038/nm1358. PMID 16474400. S2CID 14664182.
^ Sabatino DE, Mingozzi F, Hui DJ, Chen H, Colosi P, Ertl HC, et al. (Diciembre de 2005). "Identificación de epítopos de células T CD8 + específicos de la cápside de AAV de ratón". Terapia Molecular . 12 (6): 1023–33. doi : 10.1016/j.ymthe.2005.09.009 . PMID 16263332.
^ Rohr UP, Kronenwett R, Grimm D, Kleinschmidt J, Haas R (septiembre de 2002). "Las células humanas primarias difieren en su susceptibilidad a la transferencia génica mediada por rAAV-2 y la duración de la expresión del gen reportero". Journal of Virological Methods . 105 (2): 265–75. doi :10.1016/S0166-0934(02)00117-9. PMID 12270659.
^ ab Matsushita T, Elliger S, Elliger C, Podsakoff G, Villarreal L, Kurtzman GJ, et al. (julio de 1998). "Los vectores virales adenoasociados pueden producirse de manera eficiente sin virus auxiliares". Terapia génica . 5 (7): 938–45. doi : 10.1038/sj.gt.3300680 . PMID 9813665.
^ Myers MW, Laughlin CA, Jay FT, Carter BJ (julio de 1980). "Función auxiliar de los adenovirus para el crecimiento de virus adenoasociados: efecto de mutaciones sensibles a la temperatura en la región 2 del gen temprano de los adenovirus". Journal of Virology . 35 (1): 65–75. doi :10.1128/JVI.35.1.65-75.1980. PMC 288783 . PMID 6251278.
^ Handa H, Carter BJ (julio de 1979). "Complejos de replicación de ADN del virus adenoasociado en células infectadas por el virus del herpes simple o adenovirus". The Journal of Biological Chemistry . 254 (14): 6603–10. doi : 10.1016/S0021-9258(18)50411-7 . PMID 221504.
^ Yalkinoglu AO, Heilbronn R, Bürkle A, Schlehofer JR, zur Hausen H (junio de 1988). "Amplificación del ADN del virus adenoasociado como respuesta al estrés genotóxico celular". Cancer Research . 48 (11): 3123–9. PMID 2835153.
^ Yakobson B, Koch T, Winocour E (abril de 1987). "Replicación de virus adenoasociados en células sincronizadas sin la adición de un virus auxiliar". Journal of Virology . 61 (4): 972–81. doi :10.1128/JVI.61.4.972-981.1987. PMC 254052 . PMID 3029431.
^ Yakobson B, Hrynko TA, Peak MJ, Winocour E (marzo de 1989). "Replicación del virus adenoasociado en células irradiadas con luz ultravioleta a 254 nm". Journal of Virology . 63 (3): 1023–30. doi :10.1128/JVI.63.3.1023-1030.1989. PMC 247794 . PMID 2536816.
^ "Introducción a los virus adenoasociados (AAV)". Vector Biolabs . Malvern, PA.
^ "Virus adenoasociados y vectores virales adenoasociados". Salud y seguridad ambiental . Universidad de Iowa. Archivado desde el original el 20 de septiembre de 2018. Consultado el 19 de septiembre de 2018 .
^ Duan D, Sharma P, Yang J, Yue Y, Dudus L, Zhang Y, et al. (noviembre de 1998). "Los intermediarios circulares del virus adenoasociado recombinante tienen características estructurales definidas responsables de la persistencia episomal a largo plazo en el tejido muscular". Journal of Virology . 72 (11): 8568–77. doi :10.1128/JVI.72.11.8568-8577.1998. PMC 110267 . PMID 9765395.
Enlaces externos
Kimball JW (17 de mayo de 2015). "Terapia génica II". Páginas de biología de Kimball . Archivado desde el original el 18 de marzo de 2005. Consultado el 13 de mayo de 2005 .
"Virus adenoasociado". Navegador de taxonomía del NCBI . 272636.
