Para optimizar la difícil síntesis con fosgeno, Kern colaboró con el químico alemán Heinrich Caro en BASF.
[4] Esta tinción resultó ser popular y fue utilizada en 1884 por Hans Christian Gram para teñir bacterias.
La tinción selectiva de microorganismos en un organismo huésped con diferentes colorantes llevó a Paul Ehrlich a la suposición de que sería posible matar microorganismos sin dañar al organismo huésped.
El descubrimiento de las propiedades antisépticas del cristal violeta se atribuye al oftalmólogo alemán Jakob Stilling.
En 1902, Wilhelm von Drigalski y Heinrich Conradi observaron que el cristal violeta inhibe el crecimiento de muchas bacterias, pero tiene solo un efecto leve sobre Bacillus coli (Escherichia coli) y Bacillus typhi (Salmonella typhi), ambos bacterias gramnegativas.
[7] Un estudio mucho más detallado sobre el efecto del cristal violeta de Grübler en diversas cepas bacterianas fue publicado en 1912 por John Churchman.