[3] El método no implica la aplicación de un tinte, sino que produce el pigmento azul de Prusia directamente en el interior del tejido.
[5] Este método tiñe principalmente hierro en estado férrico, como el que se encuentra en la ferritina y hemosiderina, y no al hierro en estado ferroso.
[6] El método de Perls se utiliza para demostrar hierro "no hemo " en diferentes tejidos, tales como el que se encuentra en la ferritina y la hemosiderina,[6] ya que el procedimiento no tiñe el hierro que se une a la porfirina formando el grupo hemo como el que se encuentra en la hemoglobina y la mioglobina.
Estos depósitos se pueden visualizar microscópicamente como precipitados azules o morados.
[3] La reacción química para la conversión de hierro en azul de Prusia se proporciona a continuación en Drury y Wallington (1980):[5] 4FeCl3 + 3K4Fe(CN)6 → Fe4[Fe(CN)6]3 + 12KCl