En los seres humanos es producido a partir del ácido dihidrofólico por la enzima dihidrofolato reductasa.En un paso posterior se convierte en 5,10-metilentetrahidrofolato por la enzima serina hidroximetiltransferasa.Esto la convierte en una diana terapéutica muy interesante, los antibióticos tipo sulfonamida compiten con el precursor de esta vía, el PABA.Es cofactor en muchas reacciones biológicas, especialmente en el metabolismo de los aminoácidos y ácidos nucleicos.Obtiene este átomo de carbono secuestrando el formaldehído que se produce en otros procesos metabólicos.
Ruta de síntesis del tetrahidrofolato y sus antimetabolitos
