Una tira reactiva o tira reactiva de orina es una herramienta de diagnóstico básica que se utiliza para determinar cambios patológicos en la orina de un paciente en un análisis de orina estándar . [1]
Una tira reactiva de orina estándar puede comprender hasta 10 almohadillas o reactivos químicos diferentes que reaccionan (cambian de color) cuando se sumergen en una muestra de orina y luego se retiran de ella . La prueba a menudo se puede leer en tan solo 60 a 120 segundos después de la inmersión, aunque ciertas pruebas requieren más tiempo. Las pruebas rutinarias de orina con tiras multiparamétricas son el primer paso en el diagnóstico de una amplia gama de enfermedades. El análisis incluye pruebas de presencia de proteínas , glucosa , cetonas , hemoglobina , bilirrubina , urobilinógeno , acetona , nitrito y leucocitos , así como pruebas de pH y gravedad específica o pruebas de infección por diferentes patógenos. [2]
Las tiras reactivas constan de una cinta de plástico o papel de unos 5 milímetros de ancho. Las tiras de plástico tienen almohadillas impregnadas de químicos que reaccionan con los compuestos presentes en la orina produciendo un color característico. En el caso de las tiras de papel, los reactivos se absorben directamente sobre el papel. Las tiras de papel suelen ser específicas para una única reacción (por ejemplo, medición del pH), mientras que las tiras con almohadillas permiten varias determinaciones simultáneamente. [2]
Hay tiras que sirven para diferentes propósitos, como las cualitativas que solo determinan si la muestra es positiva o negativa, o las semicuantitativas que además de proporcionar una reacción positiva o negativa también proporcionan una estimación de un resultado cuantitativo, en En este último caso, las reacciones de color son aproximadamente proporcionales a la concentración de la sustancia que se analiza en la muestra. [2] La lectura de los resultados se realiza comparando los colores de las almohadillas con una escala de colores proporcionada por el fabricante, no se necesita equipo adicional. [3]
Este tipo de análisis es muy común en el control y seguimiento de los pacientes diabéticos. [2] El tiempo necesario para que aparezcan los resultados de la prueba en la tira puede variar desde unos minutos después de la prueba hasta 30 minutos después de la inmersión de la tira en la orina (dependiendo de la marca del producto que se utilice).
Los valores semicuantitativos generalmente se informan como: traza, 1+, 2+, 3+ y 4+; aunque las pruebas también se pueden estimar en miligramos por decilitro. Los lectores automatizados de tiras reactivas también proporcionan resultados utilizando unidades del Sistema Internacional de Unidades . [2]
El método de prueba consiste en sumergir completamente la tira reactiva en una muestra de orina bien mezclada durante un corto período de tiempo, luego extraerla del recipiente y apoyar el borde de la tira sobre la boca del recipiente para eliminar el exceso de orina. Luego se deja reposar la tira durante el tiempo necesario para que se produzcan las reacciones (normalmente de 1 a 2 minutos), y finalmente se comparan los colores que aparecen con la escala cromática proporcionada por el fabricante.
Una técnica inadecuada puede producir resultados falsos, por ejemplo, los leucocitos y eritrocitos se precipitan en el fondo del recipiente y pueden no ser detectados si la muestra no está bien mezclada, y de la misma manera, si queda un exceso de orina en la tira después de se ha eliminado de la muestra de prueba, puede provocar que los reactivos se filtren de las almohadillas a las almohadillas adyacentes, lo que provocará una mezcla y distorsión de los colores. Para que esto no ocurra se recomienda secar los bordes de la tira sobre papel absorbente. [2]
Los pulmones y los riñones son los principales reguladores del equilibrio ácido/álcali del organismo. El equilibrio se mantiene mediante la excreción controlada de hidrógenos ácidos en forma de iones de amoníaco , fosfato monohidrogenado , ácidos orgánicos débiles y mediante la reabsorción de bicarbonato mediante filtración glomerular en los túbulos contorneados de la nefrona. El pH de la orina normalmente varía entre 4,5 y 8, siendo la primera orina producida por la mañana generalmente más ácida y la orina producida después de las comidas generalmente más alcalina. [4] No se proporcionan valores de referencia normales para el pH de la orina porque la variación es demasiado amplia y los resultados deben considerarse en el contexto de otros parámetros cuantificables. [4]
La determinación del pH urinario tiene dos objetivos principales, uno es diagnóstico y el otro terapéutico. Por un lado, proporciona información sobre el equilibrio entre ácido y álcali en un paciente y permite identificar las sustancias que están presentes en la orina en forma cristalina. Por otro lado, determinadas enfermedades requieren que el paciente mantenga el pH de su orina dentro de unos márgenes estrechos, ya sea para favorecer la eliminación de agentes quimioterapéuticos, evitar la precipitación de sales que favorecen la formación de cálculos renales o para facilitar la Control de una infección urinaria. Regular la dieta controla principalmente el pH urinario, aunque el uso de medicamentos también puede controlarlo. Las dietas ricas en proteínas animales tienden a producir orina ácida, mientras que las dietas compuestas principalmente de vegetales tienden a producir orina alcalina. [4]
Las marcas comerciales miden el pH en incrementos de 0,5 o 1 unidad de pH entre pH 5 y 9. Para diferenciar el pH en este amplio rango es común utilizar un sistema indicador doble que comprende rojo de metilo y azul de bromotimol . [5] El rojo de metilo produce un cambio de color de rojo a amarillo en el rango de pH 4 a 6 y el azul de bromotimol cambia de amarillo a azul entre pH 6 y 9. En el rango de 5 a 9 las tiras muestran colores que cambian del naranja. a pH 5, pasando de amarillo y verde a azul oscuro a pH 9. [6]
Una de las funciones importantes de los riñones es reabsorber agua después de la filtración glomerular. El complejo proceso de reabsorción suele ser una de las primeras funciones renales que se ve afectada por la enfermedad. La gravedad específica de la orina es una medida de su densidad en comparación con el H 2 O y depende de la cantidad y densidad de los solutos (las moléculas con más masa por volumen aumentan la medida de la gravedad específica). No se debe confundir la medida de la gravedad específica con la medida de la concentración osmótica , que está más relacionada con el número de partículas que con su masa. [7]
La prueba de gravedad específica con tira reactiva en orina se basa en el cambio en la constante de disociación (pK a ) de un polielectrolito aniónico (poli-(metil vinil éter/anhídrido maleico)) en un medio alcalino que se ioniza y libera iones de hidrógeno en proporción a el número de cationes presentes en la solución. [6] Cuanto mayor es la concentración de cationes en la orina, más iones de hidrógeno se liberan, lo que reduce el pH. La almohadilla también incluye azul de bromotimol, que mide este cambio de pH. [6] [8] Cabe recordar que la tira reactiva solo mide la concentración de cationes, por lo que es posible que la orina con una alta concentración de solutos no iónicos (como la glucosa o la urea) o con compuestos de alto peso molecular (como los medios utilizados para proporcionar contraste radiográfico) producirán un resultado que será erróneamente inferior al medido por densitometría. Los colores varían desde el azul oscuro con una lectura de 1.000 hasta el amarillo con una lectura de 1.030. [8] [9]
Las concentraciones elevadas de proteína producen resultados de densidad específica ligeramente elevados como consecuencia del error de proteína del indicador; Además, las muestras con un pH superior a 6,5 dan lecturas más bajas como resultado del sesgo del indicador. Por esta razón, los fabricantes recomiendan agregar 5 unidades a la lectura de gravedad específica cuando el pH es superior a 6,5. [8]
La sangre puede estar presente en la orina en forma de glóbulos rojos intactos (hematuria) o como producto de la destrucción de los glóbulos rojos, hemoglobinuria (hemoglobinuria). La sangre presente en grandes cantidades se puede detectar visualmente. La hematuria produce orina roja turbia y la hemoglobinuria aparece como una muestra de color rojo claro. Cualquier cantidad de sangre superior a cinco células por microlitro de orina se considera clínicamente significativa; No se puede confiar en el examen visual para detectar la presencia de sangre. El examen microscópico del sedimento urinario muestra glóbulos rojos intactos, pero no se detecta hemoglobina libre producida por trastornos hemolíticos o lisis de glóbulos rojos. Por lo tanto, las pruebas químicas de hemoglobina proporcionan el medio más preciso para determinar la presencia de sangre. Una vez detectada la sangre, el examen microscópico puede utilizarse para diferenciar entre hematuria y hemoglobinuria.
Los análisis químicos de sangre utilizan la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina para catalizar una reacción entre el componente hemo de la hemoglobina y la mioglobina y el cromógeno (una sustancia que adquiere color después de una reacción química) tetrametilbencidina para producir un cromógeno oxidado, que tiene un color verde azulado. color. Los fabricantes de tiras reactivas incorporan peróxido y tetrametilbencidina en el área de análisis de sangre. Se proporcionan dos tablas de colores que corresponden a las reacciones que ocurren con hemoglobinuria, mioglobinuria y hematuria (RBC). En presencia de hemoglobina/mioglobina libre, aparece en la almohadilla un color uniforme que va desde un amarillo negativo hasta un verde azulado fuertemente positivo. Por el contrario, los glóbulos rojos intactos se lisan cuando entran en contacto con la almohadilla y la hemoglobina liberada produce una reacción aislada que da como resultado un patrón moteado en la almohadilla. Las pruebas con tiras reactivas pueden detectar concentraciones tan bajas como cinco glóbulos rojos por microlitro; sin embargo, se debe tener cuidado al comparar estas cifras con los valores microscópicos reales, porque la naturaleza absorbente de la compresa atrae parte de la orina. Los términos rastreo, pequeño, moderado y grande (o rastreo, 1+, 2+ y 3+) se utilizan para generar informes.
Se pueden observar reacciones falsas positivas debido a la contaminación menstrual. También se producen si en el recipiente de la muestra hay detergentes oxidantes fuertes. La peroxidasa vegetal y las enzimas bacterianas, incluida la peroxidasa de Escherichia coli , también pueden provocar reacciones falsas positivas. Por lo tanto, los sedimentos que contienen bacterias deben controlarse minuciosamente para detectar la presencia de glóbulos rojos. Tradicionalmente, el ácido ascórbico (vitamina C) se ha asociado con reacciones falsas negativas en las tiras reactivas para sangre. Tanto Multistix como Chemstrip han modificado sus tiras reactivas para reducir esta interferencia a niveles muy altos de ácido ascórbico, y Chemstrip recubre la almohadilla reactiva con una malla impregnada de yodato que oxida el ácido ascórbico antes de que llegue a la almohadilla de reacción. Pueden producirse reacciones falsas negativas cuando la orina con una gravedad específica alta contiene glóbulos rojos crenados que no se lisan cuando entran en contacto con la almohadilla reactiva. También se puede observar una reactividad disminuida cuando se usa formalina como conservante o cuando están presentes el medicamento para la hipertensión captopril o una alta concentración de nitrito. Los glóbulos rojos se depositan en el fondo del recipiente de la muestra y si no se mezcla la muestra antes de la prueba se produce una lectura falsamente disminuida. [10]
Con la ayuda de exámenes de rutina se pueden identificar los primeros síntomas de los cuatro grupos siguientes:
Screening parameters: Many renal and urinary tract diseases may be asymptomatic for a long period of time. Routine urinalysis is recommended as a basic yet fundamental step in identifying renal damage and/or urinary tract disease at an early stage, especially in high-risk populations such as diabetics, the hypertensive, African Americans, Polynesians, and those with a family history.[11]
Specific kidney and urinary tract diseases that can be identified include: chronic kidney disease, glomerulonephritis, proteinuria and haematuria.
Of the routine chemical tests performed on urine, the most indicative of renal disease is the protein determination. Proteinuria is often associated with early renal disease, making the urinary protein test an important part of any physical examination. Normal urine contains very little protein, usually less than 100–300 mg/L or 100 mg per 24 hours is excreted. This protein consists primarily of low-molecular-weight serum proteins that have been filtered by the glomerulus and proteins produced in the genitourinary tract. Due to its low molecular weight, albumin is the major serum protein found in the plasma, the normal urinary albumin content is low because the majority of albumin presented in the glomerulus is not filtered, and much of the filtered albumin is reabsorbed by the tubules. Other proteins include small amounts of serum and tubular microglobulins. Uromodulin produced by the renal tubular epithelial cells and proteins from prostatic, seminal, and vaginal secretions. Uromodulin is routinely produced in the distal convoluted tube, and forms the matrix of casts.
Las pruebas tradicionales con tiras reactivas para proteínas utilizan el principio del error proteico de los indicadores para producir una reacción colorimétrica visible. Contrariamente a la creencia general de que los indicadores producen colores específicos en respuesta a niveles de pH particulares, ciertos indicadores cambian de color en presencia de proteínas aunque el pH del medio permanezca constante. Esto es así porque la proteína acepta iones de hidrógeno del indicador. La prueba es más sensible a la albúmina porque la albúmina contiene más grupos amino para aceptar los iones de hidrógeno que otras proteínas. Dependiendo del fabricante, la zona proteica de la tira contiene diferentes productos químicos. Multistix contiene azul de tetrabromofenol y Chemstrip contiene 3',3”,5',5”-tetraclorofenol, 3,4,5,6-tetrabromosulfonftaleína. Ambos contienen un tampón ácido para mantener el pH a un nivel constante. A un nivel de pH de 3, ambos indicadores aparecen de color amarillo en ausencia de proteínas. Sin embargo, a medida que aumenta la concentración de proteínas, el color avanza a través de varios tonos de verde y finalmente al azul. Las lecturas se informan en términos de valores negativos, trazas, 1+, 2+, 3+ y 4+ o los valores semicuantitativos de 30, 100, 300 o 2000 mg/dL correspondientes a cada cambio de color. Se considera que los valores de traza son inferiores a 30 mg/dL. La interpretación de las lecturas de trazas puede resultar difícil. [12]
La principal fuente de error con las tiras reactivas se produce con orina alcalina altamente tamponada que anula el sistema tampón ácido, produciendo un aumento del pH y un cambio de color no relacionado con la concentración de proteínas. Asimismo, un error técnico al permitir que la almohadilla reactiva permanezca en contacto con la orina durante un período prolongado puede eliminar el tampón. Se obtienen lecturas falsas positivas cuando la reacción no tiene lugar en condiciones ácidas. La orina muy pigmentada y la contaminación del recipiente con compuestos de amonio cuaternario, detergentes y antisépticos también provocan lecturas falsas positivas. Puede producirse una lectura de traza falsa positiva en muestras con una gravedad específica alta.
La presencia de sangre en la orina es, de todos los parámetros normalmente analizados, el que más se relaciona con daño traumático en los riñones o en el tracto genitourinario. Las causas más comunes de hematuria son: nefrolitiasis , enfermedad glomerular , tumores , pielonefritis , exposición a nefrotoxinas y tratamiento con anticoagulantes . Se puede observar hematuria no patológica después de un ejercicio intenso y durante la menstruación . El número normal de glóbulos rojos en la orina no suele exceder de 3 por campo de alto aumento. [13]
Una tira reactiva de orina que dé positivo en sangre también puede indicar hemoglobinuria , que no es detectable con un microscopio debido a la lisis de los glóbulos rojos en el tracto urinario (particularmente en orina alcalina o diluida), o hemólisis intravascular . En condiciones normales la formación de complejos haptoglobina -hemoglobina impide la filtración glomerular, pero si la hemólisis es extensa se excede la capacidad de captación de haptoglobina y puede aparecer hemoglobina en la orina. La hemoglobinuria puede ser causada por anemia hemolítica, transfusiones de sangre, quemaduras extensas , picadura de araña reclusa (Loxosceles), infecciones y ejercicio extenuante.
La prueba con tira reactiva de orina para sangre se basa en la actividad pseudoperoxidasa de la hemoglobina al catalizar una reacción entre el peróxido de hidrógeno y el cromógeno tetrametilbencidina para producir un producto de oxidación de color azul oscuro. [6] [13] el color resultante puede variar entre verde y azul oscuro dependiendo de la cantidad de hemoglobina. [13]
La presencia de mioglobina en la orina da una reacción positiva en el análisis de sangre de la tira reactiva, pero la orina aparece clara con una coloración de rojo a marrón. La presencia de mioglobina en lugar de hemoglobina puede ser causada por patologías asociadas con daño muscular ( rabdomiolisis ), como traumatismos , síndrome de aplastamiento , coma prolongado, convulsiones , atrofia muscular progresiva , alcoholismo , abuso de heroína y actividad física extenuante.
La fracción hemo de estas proteínas es tóxica para los túbulos renales y concentraciones elevadas pueden provocar lesión renal aguda .
Es posible utilizar una prueba de precipitación de sulfato de amoníaco para distinguir entre hemoglobinuria y mioglobinuria. Consiste en añadir 2,8gr de sulfato amónico a 5 mL de orina centrifugada, mezclar bien y al cabo de 5 minutos filtrar la muestra y centrifugar nuevamente. La hemoglobina precipita con el sulfato de amoníaco pero no con la mioglobina. El análisis del sobrenadante en busca de sangre con una tira reactiva dará un resultado positivo si hay mioglobina presente y un negativo si hay hemoglobina presente.
La prueba puede dar falsos positivos si hay residuos de oxidantes fuertes o peróxidos en el material de laboratorio utilizado para el análisis. [13]
Alrededor del 30-40 % de los diabéticos de tipo I y alrededor del 20 % de los diabéticos de tipo II padecen con el tiempo una nefropatía, por lo que el reconocimiento temprano de la diabetes es de gran importancia para el futuro estado de salud de estos pacientes.
Los trastornos específicos del metabolismo de los carbohidratos que pueden identificarse incluyen diabetes mellitus , glucosuria y cetonuria .
En condiciones normales, casi toda la glucosa eliminada en el glomérulo se reabsorbe en el túbulo contorneado proximal. Si el nivel de glucosa en sangre aumenta, como ocurre en la diabetes mellitus, se supera la capacidad del túbulo contorneado para reabsorber glucosa (efecto conocido como umbral de reabsorción renal ). Para la glucosa, este umbral está entre 160 y 180 mg/dL. Las concentraciones de glucosa varían en un individuo, y una persona sana puede presentar glucosuria transitoria después de una comida rica en azúcares; por lo que los resultados más representativos provienen de muestras obtenidas al menos dos horas después de ingerir los alimentos.
La detección de glucosa mediante tiras reactivas se basa en la reacción enzimática de la glucosa oxidasa . Esta enzima cataliza la oxidación de la glucosa por el oxígeno atmosférico para formar ácido glucónico y peróxido de hidrógeno . Una segunda reacción ligada, mediada por una peroxidasa , cataliza la reacción entre el peróxido y un cromógeno (sustancia que adquiere color después de una reacción química) para formar un compuesto coloreado que indica la concentración de glucosa. [6]
La reacción es específica para la glucosa, como ocurre en todas las reacciones enzimáticas, pero puede proporcionar algunos resultados falsos positivos debido a la presencia de trazas de agentes oxidantes fuertes o peróxido de los desinfectantes utilizados en los instrumentos de laboratorio. [6]
El término cetonas o cuerpos cetónicos en realidad hace referencia a tres productos intermedios en el metabolismo de los ácidos grasos ; acetona , ácido acetoacético y ácido beta-hidroxibutírico . Generalmente no se encuentran concentraciones elevadas de cetonas en la orina, ya que todas estas sustancias se metabolizan completamente, produciendo energía, dióxido de carbono y agua. Sin embargo, la alteración del metabolismo de los carbohidratos puede provocar desequilibrios metabólicos y la aparición de cetonas como subproducto del metabolismo de las reservas de grasa del organismo.
Un aumento del metabolismo de las grasas puede ser consecuencia de inanición o malabsorción , de la incapacidad para metabolizar los hidratos de carbono (como ocurre, por ejemplo, en la diabetes) o de pérdidas por vómitos frecuentes.
El control de las cetonas urinarias es particularmente útil en el manejo y seguimiento de la diabetes mellitus tipo 1 . La cetonuria indica una deficiencia de insulina que indica la necesidad de regular su dosis. Un aumento de la concentración sanguínea de cetonas produce un desequilibrio hidroelectrolítico , deshidratación y si no se corrige, acidosis y al final coma diabético .
Los tres compuestos cetónicos aparecen en diferentes proporciones en la orina, aunque estas proporciones son relativamente constantes en diferentes muestras, ya que tanto la acetona como el ácido beta-hidroxibutírico se producen a partir del ácido acetoacético. Las proporciones son 78% de ácido beta-hidroxibutírico, 20% de ácido acetoacético y 2% de acetona.
La prueba utilizada en las tiras reactivas de orina se basa en la reacción del nitroprusiato de sodio (nitroferricianuro). En esta reacción, el ácido acetoacético en un medio alcalino reacciona con el nitroprusiato de sodio produciendo un complejo de color magenta: [6] [14]
La prueba no mide el ácido beta-hidroxibutírico y sólo es débilmente sensible a la acetona cuando se añade glicina a la reacción. Sin embargo, como estos compuestos derivan del ácido acetoacético, se puede suponer su existencia y, por lo tanto, no es necesaria una prueba separada. Aquellos medicamentos que contienen grupos sulfhidrilo, como el mercaptoetanosulfonato Na ( Mesna ) y el captopril y la L-DOPA, pueden producir coloraciones atípicas. Puede producirse un falso negativo en muestras que no se han almacenado adecuadamente debido a la volatilización y la degradación bacteriana.
En muchas enfermedades hepáticas, los pacientes suelen mostrar signos de patología sólo en una fase tardía. El diagnóstico precoz permite implementar a tiempo medidas terapéuticas adecuadas, evitando daños consiguientes y nuevas infecciones.
Las enfermedades hepáticas específicas y los trastornos hemolíticos que se pueden identificar incluyen enfermedad hepática (acompañada de ictericia ), cirrosis , urobilinogenuria y bilirrubinuria .
La bilirrubina es un compuesto altamente pigmentado que es un subproducto de la degradación de la hemoglobina. La hemoglobina que se libera después de que el sistema fagocitario mononuclear (ubicado en el hígado y el bazo ) retira de la circulación los glóbulos rojos viejos se degrada en sus componentes; hierro , protoporfirina y proteínas . Las células del sistema convierten la protoporfirina en bilirrubina no conjugada que pasa por el sistema circulatorio unida a proteínas, particularmente a la albúmina. El riñón no puede filtrar esta bilirrubina porque está unida a proteínas; sin embargo, se conjuga con ácido glucurónico en el hígado para formar bilirrubina conjugada soluble en agua. Esta bilirrubina conjugada normalmente no aparece en la orina ya que se excreta directamente del intestino a través de la bilis . Las bacterias intestinales reducen la bilirrubina a urobilinógeno , que luego se oxida y se excreta con las heces como estercobilina o en la orina como urobilina .
La bilirrubina conjugada aparece en la orina cuando se altera el ciclo normal de degradación debido a la obstrucción de las vías biliares o cuando se daña la integridad funcional del riñón. Esto permite el escape de la bilirrubina conjugada a la circulación como ocurre en la hepatitis y la cirrosis hepática ).
La detección de bilirrubina urinaria es una indicación temprana de enfermedad hepática y su presencia o ausencia puede usarse para determinar las causas de la ictericia clínica .
La ictericia producida por la destrucción acelerada de los glóbulos rojos no produce bilirrubinuria, ya que la bilirrubina sérica elevada se encuentra en forma no conjugada y los riñones son incapaces de excretarla.
Las tiras reactivas utilizan una reacción de diazotización para detectar la bilirrubina. La bilirrubina se combina con una sal de diazonio (2,4-dicloroanilina o 2,6-diclorobenceno-diazonio-tetrafluoroborato) en un medio ácido para producir un colorante azoico con una coloración que varía del rosa al violeta: [6]
Las reacciones falsas positivas pueden deberse a pigmentos inusuales en la orina (por ejemplo, metabolitos de fenazopiridina de color naranja amarillento , indican y los metabolitos del medicamento Lodine ( Etodolac )). Las muestras mal almacenadas también pueden dar falsos negativos, ya que la bilirrubina es fotosensible y sufre fotooxidación a biliverdina cuando se expone a la luz, o puede ocurrir hidrólisis del glucurónido produciendo bilirrubina libre que es menos reactiva. [6]
Las bacterias intestinales convierten la bilirrubina conjugada que se excreta por el conducto biliar hacia el intestino en urobilinógeno y estercobilinógeno . Parte del urobilinógeno se reabsorbe en el intestino y luego circula por la sangre hasta el hígado, donde se excreta. Una pequeña parte de este urobilinógeno recirculado se filtra por los riñones y aparece en la orina (menos de 1 mg/dL de orina). El estercobilinógeno no puede reabsorberse y permanece en el intestino. [15] [16]
Cualquier deterioro de la función hepática reduce su capacidad para procesar el urobilinógeno recirculado. [15] El exceso que queda en la sangre es filtrado por los riñones y aparece en la orina. Cuando se producen trastornos hemolíticos, la cantidad de bilirrubina no conjugada que está presente en la sangre aumenta, provocando un aumento en la excreción hepática de bilirrubina conjugada, lo que resulta en un aumento de las cantidades de urobilinógeno que a su vez provoca un aumento en la reabsorción, recirculación y excreción renal. [15] [16]
Las reacciones que tienen lugar en la tira reactiva varían según el fabricante, pero en realidad hay dos reacciones que se utilizan con mayor frecuencia. Algunos fabricantes utilizan la reacción de Ehrlich (1), en la que el urobilinógeno reacciona con p-dimetilaminobenzaldehído ( reactivo de Ehrlich ) para producir colores que varían del rosa claro al rosa oscuro. Otros fabricantes utilizan una reacción de acoplamiento diazo (2) que utiliza tetrafluoroborato de 4-metoxibenceno-diazonio para producir colores que varían del blanco al rosa. La última reacción es más específica. [17]
Varias sustancias interfieren con la reacción de Ehrlich en la tira Multistix: porfobilinógeno, indican, ácido p-amino salicílico, sulfonamida, metildopa, procaína y clorpromazina. La prueba debe realizarse a temperatura ambiente ya que la sensibilidad de la reacción aumenta con la temperatura. Las muestras mal almacenadas pueden producir resultados falsos negativos ya que el urobilinógeno sufre fotooxidación a urobilina que no reacciona. El formaldehído utilizado como conservante produce falsos negativos en ambas reacciones. [dieciséis]
Se pueden identificar infecciones urinarias que incluyen bacteriuria y piuria .
La prueba de nitritos es un método rápido de detección de posibles infecciones asintomáticas causadas por bacterias reductoras de nitratos. Algunas de las especies de bacterias gram negativas que más comúnmente causan infecciones del tracto urinario ( Escherichia coli , Enterobacter , Klebsiella , Citrobacter y Proteus ) tienen enzimas que reducen el nitrato presente en la orina a nitrito. [18] La prueba es un cribado rápido de posibles infecciones por bacterias entéricas, pero no sustituye a las pruebas de análisis de orina ni al examen microscópico como herramientas de diagnóstico, ni al seguimiento posterior como tantos otros microorganismos que no reducen el nitrato ( bacterias gram positivas y levaduras). También puede causar infecciones urinarias. [19] [20]
Las tiras reactivas detectan nitrito mediante la reacción de Griess en la que el nitrito reacciona en un medio ácido con una amina aromática (ácido para-arsanílico o sulfanilamida) para formar una sal de diazonio que a su vez reacciona con tetrahidrobenzoquinolina para producir un colorante azoico rosa. . [6] [20]
La prueba de nitrito no es particularmente fiable y los resultados negativos en presencia de síntomas clínicos no son infrecuentes, lo que significa que la prueba no debe considerarse concluyente. Se pueden obtener resultados negativos en presencia de microorganismos no reductores de nitratos. Las bacterias reductoras de nitritos necesitan permanecer en contacto con el nitrato durante el tiempo suficiente para producir cantidades detectables (primera orina producida por la mañana o al menos con una retención de orina de 4 horas). Un gran número de bacterias pueden reaccionar para reducir el nitrito a nitrógeno, lo que dará un resultado falso negativo. El uso de antibióticos inhibirá el metabolismo bacteriano provocando resultados negativos aunque haya bacterias presentes. Además, algunas sustancias como el ácido ascórbico competirán con la reacción de Greiss dando lecturas bajas no representativas. [6] [20]
Es normal encontrar hasta 3 (ocasionalmente 5) leucocitos por campo de alto poder (40X) en una muestra de orina, teniendo las mujeres resultados ligeramente superiores debido a la contaminación vaginal. [ cita necesaria ] Los números más altos indican infección urinaria. La tira reactiva de orina para detectar glóbulos blancos detecta la esterasa leucocitaria, que está presente en los gránulos azurófilos de monocitos y granulocitos ( neutrófilos , eosinófilos y basófilos ). Las bacterias, los linfocitos y las células epiteliales del tracto genitourinario no contienen esterasas. [21] Los granulocitos neutrófilos son los leucocitos más comúnmente asociados con infecciones urinarias. Una prueba positiva de esterasa leucocitaria normalmente indica la presencia de bacterias y una prueba de nitrito positiva (aunque no siempre es así). Las infecciones causadas por Trichomonas , Chlamydia y levaduras producen leucocituria sin bacteriuria. La inflamación de los tejidos renales ( nefritis intersticial ) puede producir leucocituria, en particular nefritis intersticial tóxica con predominio de eosinófilos. [21]
La prueba de esterasa leucocitaria es puramente indicativa y no debe utilizarse únicamente para el diagnóstico, ya que no reemplaza los exámenes microscópicos ni los de urocultivo. [19]
La reacción de la tira reactiva de orina se basa en la acción de la esterasa leucocitaria al catalizar la hidrólisis de un éster de ácido indolcarboxílico. El indoxilo que se libera se combina con una sal de diazonio para producir un tinte azol de color violeta. [21]
La reacción de la esterasa necesita unos 2 minutos para tener lugar. La presencia de agentes oxidantes fuertes o formaldehído puede provocar falsos positivos. Los resultados falsos negativos se asocian con concentraciones elevadas de proteínas (más de 500 mg/dL), glucosa (más de 3 g/dL), ácido oxálico y ácido ascórbico . La orina con un peso específico elevado también puede provocar la crenación de leucocitos, lo que puede impedir la liberación de esterasas. [22]
El límite de detección de una prueba es la concentración a la que la prueba comienza a pasar de negativo a positivo. Aunque el límite de detección puede variar entre muestras de orina, el límite de detección se define como la concentración del analito que da como resultado una reacción positiva en el 90% de las orinas examinadas.
[23]
Las tiras reactivas de orina se pueden utilizar en muchas áreas de la cadena sanitaria, incluido el cribado para exámenes de rutina, el seguimiento del tratamiento, el autocontrol por parte de los pacientes y/o la medicina preventiva general.
Las tiras reactivas de orina se utilizan para realizar pruebas de detección tanto en hospitales como en la práctica general. El objetivo del cribado es la identificación temprana de pacientes probables mediante el examen de grandes grupos de población. La importancia de la detección de diabetes y enfermedades renales entre las poblaciones de alto riesgo está adquiriendo mucha importancia.
El seguimiento del tratamiento con la ayuda de tiras reactivas de orina permite al profesional de la salud comprobar los resultados del tratamiento prescrito y, si es necesario, introducir cambios en el curso del tratamiento.
El autocontrol con tiras reactivas de orina bajo la guía de un profesional de la salud es un método eficaz para controlar el estado de la enfermedad. Esto se aplica especialmente a los diabéticos , donde la idea de un autocontrol del estado metabólico (determinación de glucosa y cetonas) es evidente.
En medicina veterinaria, especialmente en perros y gatos, la tira reactiva se puede utilizar para el análisis de orina.
En muchas culturas la orina alguna vez fue considerada un fluido místico, y en algunas culturas todavía se considera como tal hasta el día de hoy. Entre sus usos se incluyen la cicatrización de heridas, la estimulación de las defensas del organismo y exámenes para diagnosticar la presencia de enfermedades.
Sólo a finales del siglo XVIII los médicos interesados en la química centraron su atención en las bases científicas del análisis de orina y en su uso en la medicina práctica.
Aunque las tiras reactivas han cambiado poco en apariencia desde la década de 1960, ahora contienen una serie de innovaciones. Nuevas técnicas de impregnación, indicadores de color más estables y la mejora constante en la gradación de color han contribuido al hecho de que el uso de tiras reactivas de orina se haya establecido en la práctica clínica y general como un instrumento de diagnóstico confiable. El menú de parámetros ofrecido ha ido creciendo constantemente en las últimas décadas.
Se sabe que el ácido ascórbico (vitamina C) interfiere con la reacción de oxidación de la sangre y la almohadilla de glucosa en las tiras reactivas de orina comunes. Algunas tiras reactivas de orina están protegidas contra la interferencia del yodato, que elimina el ácido ascórbico por oxidación. [25] Algunas tiras reactivas incluyen una prueba de ascorbato urinario.
Durante la detección de rutina, si se identifica una prueba positiva de leucocitos, sangre, proteínas, nitritos y un pH superior a 7, el sedimento de orina se puede analizar microscópicamente para precisar un diagnóstico.
El análisis automático de tiras reactivas de orina mediante analizadores automáticos de tiras reactivas de orina es una práctica bien establecida en el análisis de orina moderno. Pueden medir calcio , sangre, glucosa, bilirrubina, urobilinógeno, cetonas, leucocitos, creatinina , microalbúmina , pH, ácido ascórbico y proteínas. [26]
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