Tinción
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio.
Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.
Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar orgánulos dentro de células individuales.
En bioquímica, esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto.
Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste, se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función.
A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos, algunas más que otras.
Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado, la tinción mordentada permanece.
Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente, la Biological Stain Commission, y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza, concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas.
También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas, por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos, basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la hematoxilina), y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes.
[5] Adicionalmente, la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos, permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares.
Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel.
Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente, que usualmente es aluminio o alumbre.
El cristal violeta, al ser combinado con un mordiente adecuado, tiñe las paredes celulares de color púrpura.
El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas.
La técnica de tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular.
De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina.
La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno, músculo liso o mitocondrias.
Utilizado con un mordiente, la hematoxilina tiñe los núcleos celulares de color azul violeta a negro.
Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN.
Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN.
El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal, y por lo tanto es más soluble en solventes acuosos, aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática.
En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente, aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular.
Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos, pero prácticamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas.
Colorea los núcleos celulares de rojo, y se utiliza principalmente como contracoloración.
La coloración de Sudán se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas", por lo común, lípidos.
El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos.
El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos.
[8] Nota: Esta lista incluye solo algunas de las tinciones más comunes, y no es ni con mucho completa.
