Actuó en revistas en los años 1920 y utilizó el „típico Berliner Schnauze (dialecto berlinés)“ en los cabarets, entre otros el Kabarett der Komiker en 1933.

Tenía 41 años cuando grabó canciones por vez primera, los temas „Eine Weiße mit ’nem Schuss?“ (de Willi Kollo) y „Wenn in Werder die Kirschen blüh’n“ (de Fred Raymond).

En la década de 1930 actuó en varias producciones cinematográficas, entre ellas Das Veilchen vom Potsdamer Platz (1936) y Wir machen Musik (1942).

Finalizada la Segunda Guerra Mundial, y cumplidos los sesenta años de edad, comenzó su trayectoria en el cabaret fundado por Hans Joachim Heinrichs en 1945 Berliner Kammerbrettl.

Lotte Werkmeister falleció en el año 1970 en Bergholz-Rehbrücke, localidad de la que fue nombrada ciudadana honoraria, y en la cual fue enterrada.