[4]​[5]​ Al igual que el 350 GT, el 400 GT y su otra versión fueron equipados con un motor V12, pero en comparación con su predecesor la cilindrada del motor se aumentó a 3939 cc, lo que aumentó la potencia a 320 CV (239 kW).

La carrocería del 400 GT 2+2 fue en realidad diferente a la del 350 GT, con una mayor altura, techo diferente, y algunos cambios en las láminas de metal por todo el coche.

El interior del 400 GT 2+2 fue modificado para que se instalasen 2 asientos más en la parte trasera, donde en el 350 GT sólo había un espacio para el equipaje o 1 asiento más.

El 400 GT 2+2 también tenía una caja de cambios diseñada por Lamborghini, con un sincronizador estilo de Porsche en todos los engranajes, que mejoraron la transmisión enormemente.

Una versión especial única, denominada 400 GT Monza, fue construida por Neri y Bonacini, quienes habían trabajado anteriormente en el 350 GT y en el prototipo 350 GTV presentado en Turín en 1963.