Al regresar inicia su carrera religiosa.

Diversos autores afirman, sin mostrar fuentes, que fue alumno de la Universidad de Salamanca, o que estudió teología en la Universidad de Alcalá siguiendo las tres vías (tomismo, escotismo y nominalismo) que sólo se impartían allí, o en el colegio de Rodrigo de Santaella en Sevilla.

[1]​ Escritor ascético como otros místicos precursores, este escritor andaluz desarrolla un ideario donde la efectividad y el empirismo son los protagonistas de su obra.

[3]​ Osuna es un expositor principal del método contemplativo llamado recogimiento.

Escribió compulsivamente, a veces escribió varios libros a la vez, y el orden de edición no se correspondía con el orden lógico.