Sexto hijo de Marco Antonio Colonna y de Felicia Orsini,[1] estudió artes en la universidad de Alcalá de Henares y teología en la de Salamanca.
En 1586, con la recomendación de Felipe II,[2] fue nombrado cardenal por Sixto V, en cuya dignidad participó en los cónclaves en los que resultaron elegidos los papas Urbano VII, Gregorio XIV, Inocencio IX y Clemente VIII.
Entre 1602 y 1604 desempeñó el cargo de virrey de Aragón.
En 1606 ocupó la diócesis suburbicaria de Palestrina, donde murió a los 48 años de edad; fue sepultado en la archibasílica de San Juan de Letrán de Roma.
[3][4] Miguel de Cervantes le dedicó su novela La Galatea.