En 1912, Little actuaba con regularidad en seriales de temática western dirigidos por Thomas H. Ince, a menudo en el papel de "Princesa India", y usualmente trabajando junto a Francis Ford, Grace Cunard, Olive Tell, Jack Conway, Ethel Grandin, Mildred Harris y la estrella cowboy Art Acord para los Essanay Studios.Otros actores importantes de la época con los que trabajó fueron Harold Lockwood, Jane Wolfe, William Worthington, Tom Chatterton, y el también director Frank Borzage.Aunque posiblemente sea más recordada por su trabajo en los westerns, Ann Little fue una actriz versátil, con varios papeles en producciones dramáticas e incluso en comedias que le valieron positivas críticas.En 1917 Little fue contratada por Paramount Pictures, siendo a menudo emparejada con el famoso actor Wallace Reid en varios dramas y comedias populares y, aunque presuntamente cansada de estar encasillada en el género western, continuó actuando en dicho género, haciendo junto al actor cowboy Jack Hoxie el popular serial de 1919 Lightning Bryce.En tiempos posteriores dirigió el Hotel Chateau Marmont en Sunset Strip, y raramente hablaba de sus años en el cine.