Tinción de Papanicolaou

Método de tinción histológica

Tinción de Papanicolaou que muestra una lesión intraepitelial escamosa de bajo grado (LSIL) en una prueba de Papanicolaou . Núcleos celulares teñidos de azul.

La tinción de Papanicolaou (también tinción de Papanicolaou y tinción de Pap ) es una técnica de tinción citológica multicromática (multicolor) desarrollada por George Papanicolaou en 1942. ^{[1] [2] [3]} La tinción de Papanicolaou es una de las tinciones más utilizadas en citología , ^[1] donde se utiliza para ayudar a los patólogos a realizar un diagnóstico. Aunque es más conocida por su uso en la detección de cáncer de cuello uterino en la prueba de Papanicolaou o el frotis de Papanicolaou, también se utiliza para teñir preparaciones de muestras no ginecológicas de una variedad de secreciones corporales y de biopsias con aguja pequeña de órganos y tejidos. ^{[4] [5]} Papanicolaou publicó tres formulaciones de esta tinción en 1942, 1954 y 1960. ^[2]

Uso

La tinción de Papanicolaou se utiliza para diferenciar células en preparaciones de frotis (en las que las muestras se extienden o se extienden sobre un portaobjetos de vidrio para microscopio) ^[6] de varias secreciones corporales y biopsias con aguja ; las muestras pueden incluir frotis ginecológicos ( frotis de Papanicolaou ), esputo , cepillados, lavados, orina , líquido cefalorraquídeo , ^[4] líquido abdominal, líquido pleural , líquido sinovial , líquido seminal , ^[7] aspiraciones con aguja fina , muestras de tacto tumoral u otros materiales que contengan células sueltas. ^{[8] [4] [9]}

La tinción de Papanicolaou no está completamente estandarizada y viene en varias formulaciones, que difieren en los colorantes exactos utilizados, sus proporciones y el tiempo del proceso. ^{[2] [1]} La tinción de Papanicolaou generalmente se asocia con la citopatología en la que se examinan células sueltas, pero la tinción también se ha modificado y se ha utilizado en cortes de tejido. ^[9]

citología vaginal

La tinción de Papanicolaou se utiliza en la prueba de Papanicolaou (o prueba de Papanicolaou) y es una técnica confiable en la detección del cáncer de cuello uterino en ginecología . ^[10]

Método de tinción generalizada

La forma clásica de la tinción de Papanicolaou implica cinco tinciones en tres soluciones. ^{[2] [11] [12]}

• La primera solución de tinción contiene hematoxilina que tiñe los núcleos celulares . ^{[10] [2] [12]} Papanicolaou utilizó hematoxilina de Harris en las tres formulaciones de la tinción que publicó. ^[2]
• La segunda solución de tinción (designada OG-6), contiene Orange G en alcohol etílico al 95% con una pequeña cantidad de ácido fosfotúngstico . ^{[12] [2]} En OG-6, OG significa Orange G y el '6' denota la concentración de ácido fosfotúngstico agregado; otras variantes son OG-5 y OG-8). ^[2]
• La tercera solución de tinción se compone de tres colorantes, eosina Y , verde claro SF amarillento y marrón Bismarck Y en alcohol etílico al 95% con una pequeña cantidad de ácido fosfotúngstico y carbonato de litio . ^{[12] [2]} Esta solución, designada EA, seguida de un número que indica la proporción de los colorantes, otras formulaciones incluyen EA-36, EA-50 y EA-65. ^[2]

Las contratinciones se disuelven en alcohol etílico al 95%, lo que evita que las células se tiñen demasiado, lo que oscurecería los detalles nucleares y los contornos de las células, especialmente en el caso de que las células se superpongan en el portaobjetos. ^{[3] [2]} Se agrega ácido fosfotúngstico para ajustar el pH de las contratinciones y ayuda a optimizar la intensidad del color. ^[2] La contratinción EA contiene marrón de Bismarck y ácido fosfotúngstico, que cuando se combinan, hacen que ambos precipiten fuera de la solución, lo que reduce la vida útil de la mezcla. ^[2]

Resultados

La tinción debe dar como resultado células bastante transparentes, de modo que se puedan interpretar incluso muestras más gruesas con células superpuestas. ^[2] Los núcleos celulares deben ser nítidos, de color azul a negro ^{[12] [13]} y los patrones de cromatina del núcleo deben estar bien definidos. El citoplasma celular se tiñe de azul verdoso y la queratina se tiñe de color naranja. ^{[13] [5]}

La eosina Y tiñe las células escamosas epiteliales superficiales , los nucléolos , los cilios y los glóbulos rojos . ^[2] El verde claro amarillento del SF confiere una tinción azul al citoplasma de las células activas, como las células columnares, las células escamosas parabasales y las células escamosas intermedias. ^[14] Las células superficiales son de color naranja a rosa, y las células intermedias y parabasales son de color verde turquesa a azul. ^[12]

Tinción ultrarrápida de Papanicolaou

La tinción ultrarrápida de Papanicolaou es una alternativa a las muestras de aspiración con aguja fina, desarrollada para lograr una claridad visual comparable en un tiempo significativamente más corto. El proceso difiere en la rehidratación del frotis secado al aire con solución salina , el uso de formaldehído al 4% en fijador de etanol al 65% y el uso de hematoxilina -2 de Richard-Allan y Cyto-Stain , lo que da como resultado un proceso de 90 segundos que produce tinciones policromáticas transparentes. ^[15]

Ejemplos de tinción de Papanicolaou

• 
  Melanoma maligno , biopsia por aspiración con aguja fina del hígado , frotis directo.
• 
  Carcinoma de células escamosas , lavado bronquial.
• 
  Cáncer papilar de tiroides , biopsia por aspiración con aguja fina .
• 
  Muestra de citología de orina benigna .
• 
  Carcinoma de células escamosas en el cuello uterino .

Documentos de George N. Papanicolaou que describen su mancha

• Papanicolaou, George N. "Un nuevo procedimiento para teñir frotis vaginales". Science 95.2469 (1942): 438–439.

• Papanicolaou, George N. "El método del frotis celular para diagnosticar el cáncer". American Journal of Public Health and the Nation's Health 38.2 (1948): 202–205.

• Papanicolaou, George N. "Atlas de citología exfoliativa". Publicado para el Commonwealth Fund por Harvard University Press. (1954).

• Papanicolaou, George N. "Memorando sobre tinción". Atlas de citología exfoliativa. Cambridge, MA: Harvard University Press, Suplemento II (1960): 12.

Véase también

• Diff-Quik : método de tinción de Romanowsky comúnmente utilizado en citología ^[16]

Referencias

1. Schulte EK (1991). "Estandarización de colorantes y tinciones biológicas: dificultades y posibilidades". Histoquímica . 95 (4): 319–328. doi :10.1007/BF00266958. PMID  1708749. S2CID  29628388.
2. Gill, Gary W. (2013). "Tinción de Papanicolaou". Citopreparación . Fundamentos de citopatología. Vol. 12. págs. 143–189. doi :10.1007/978-1-4614-4933-1_10. ISBN 978-1-4614-4932-4. ISSN  1574-9053.
3. Chantziantoniou N, Donnelly AD, Mukherjee M, Boon ME, Austin RM (2017). "Inicio y desarrollo del método de tinción de Papanicolaou". Acta Cytol . 61 (4–5): 266–280. doi : 10.1159/000457827 . PMID  28384641.{{cite journal}}: CS1 maint: varios nombres: lista de autores ( enlace )
4. Kumar, Vinay; Abbas, Abul K.; Aster, Jon C. (2013). Patología básica de Robbins (novena edición). Elsevier/Saunders. pág. 910. ISBN 978-1-4377-1781-5.
5. Drury, RAB; Wallington, EA (1980). Técnica histológica de Carleton (quinta edición). Oxford University Press. pp. 520p. ISBN 0-19-261310-3.
6. Diccionario médico de Stedman (27.ª edición). Lippincott Williams & Wilkins. 2006. ISBN 978-0683400076.
7. Lars Björndahl; David Mortimer; Christopher LR Barratt (1 de abril de 2010). Una guía práctica para la andrología básica de laboratorio. Cambridge University Press. ISBN 978-1-139-48249-3.
8. Hoda RS (2007). "Citología no ginecológica en preparaciones líquidas: una revisión morfológica de hechos y artefactos". Citopatología diagnóstica . 35 (10): 621–34. doi :10.1002/dc.20698. PMID  17854077. S2CID  38797168.
9. Preethi, S.; Sivapathasundharam, B. (2014). "¿Será la tinción de Papanicolaou modificada la nueva tinción para la queratina?". Journal of Histotechnology . 38 (1): 9–13. doi :10.1179/2046023614Y.0000000053. ISSN  0147-8885. S2CID  84486076.
10. Ross, Michael H.; Pawlina, Wojciech (2016). Histología: texto y atlas: con biología celular y molecular correlacionada (7.ª ed.). Wolters Kluwer. pp. 984p. ISBN 978-1451187427.
11. Carson, Freida L; Hladik, Christa (2009). Histotecnología: un texto autodidacta (3.ª ed.). Hong Kong: American Society for Clinical Pathology Press. págs. 361–3363. ISBN 978-0-89189-581-7.
12. Bancroft, John; Stevens, Alan, eds. (1982). La teoría y la práctica de las técnicas histológicas (2.ª ed.). Longman Group Limited.
13. Dey, Pranab (2018). "Tinción de rutina en el laboratorio de citología". Técnicas básicas y avanzadas de laboratorio en histopatología y citología . págs. 133–138. doi :10.1007/978-981-10-8252-8_14. ISBN 978-981-10-8251-1.
14. Faith Mokobi (9 de septiembre de 2020). "Tinción de Papanicolaou (tinción de Papanicolaou) para la prueba de Papanicolaou".
15. Yang GC, Alvarez II (1995). "Tinción ultrarrápida de Papanicolaou. Una preparación alternativa para la citología por aspiración con aguja fina". Acta Cytol . 39 (1): 55–60. PMID  7531380.
16. Demay, Richard (2012). "Capítulo 26: Tinciones". El arte y la ciencia de la citopatología . Chicago, IL: Am Soc Clinical Pathology. pág. 1505. ISBN 978-0-89189-644-9.OCLC 761848930  .