Los microfluídicos basados en papel son dispositivos microfluídicos que consisten en una serie de fibras hidrofílicas de celulosa o nitrocelulosa que transportan fluido desde una entrada a través del medio poroso hasta una salida o región deseada del dispositivo, por medio de la acción capilar . [1] Esta tecnología se basa en la prueba de flujo lateral convencional que es capaz de detectar muchos agentes infecciosos y contaminantes químicos. La principal ventaja de esto es que es en gran medida un dispositivo controlado pasivamente a diferencia de los dispositivos microfluídicos más complejos. El desarrollo de dispositivos microfluídicos basados en papel comenzó a principios del siglo XXI para satisfacer la necesidad de sistemas de diagnóstico médico económicos y portátiles .
Los dispositivos microfluídicos basados en papel presentan las siguientes regiones: [2]
El movimiento de fluido a través de un medio poroso como el papel está regido por la permeabilidad (ciencias de la tierra) , la geometría y los efectos de la evaporación . En conjunto, estos factores dan como resultado una penetración capilar limitada por evaporación que se puede ajustar controlando la porosidad y la geometría del dispositivo. [4] El papel es un medio poroso en el que el fluido se transporta principalmente por capilaridad y evaporación. [5] El flujo capilar durante la humectación se puede aproximar mediante la ecuación de Washburn , que se deriva de la ley de Jurin y la ecuación de Hagen-Poiseuille . [6] La velocidad promedio del flujo de fluido se generaliza como, donde es la tensión superficial, el ángulo de contacto, es la viscosidad y es la distancia recorrida por el líquido. Modelos más extensos tienen en cuenta la tortuosidad del papel , [7] el radio de los poros y la deformación del papel . [8]
Una vez que el medio está completamente mojado, el flujo subsiguiente es laminar y sigue la ley de Darcy . [9] La velocidad promedio del flujo de fluido se generaliza como, donde es la permeabilidad del medio y es el gradiente de presión . [10] Una consecuencia del flujo laminar es que la mezcla es difícil y se basa únicamente en la difusión , que es más lenta en sistemas porosos. [11]
Los dispositivos microfluídicos basados en papel se pueden fabricar en función de las dimensiones, es decir, 2D y 3D. [12] Para fabricar microfluídicos basados en papel 2D, se han empleado variaciones de métodos, como impresión en cera, impresión por inyección de tinta , fotolitografía , impresión flexográfica , tratamiento con plasma, tratamiento con láser, grabado (microfabricación) , serigrafía , impresora 3D de procesamiento de luz digital (DLP) y cribado de cera. [13] Una laminación adicional de múltiples microfluídicos de papel crea microfluídicos pseudo-3D que podrían proporcionar una dimensión adicional de la red fluídica y aumentar la complejidad. Cada técnica tiene como objetivo crear barreras físicas hidrófobas en papel hidrófilo que transporten pasivamente soluciones acuosas. [14] Luego, los reactivos biológicos y químicos deben depositarse selectivamente a lo largo del dispositivo sumergiendo el sustrato en una solución de reactivo o colocando localmente un reactivo sobre el sustrato. [15]
La impresión con cera utiliza una impresora sencilla para imprimir un patrón de cera sobre papel con el diseño deseado. Luego, la cera se derrite con una placa calefactora para crear canales. [16] Esta técnica es rápida y de bajo costo, pero tiene una resolución relativamente baja debido a la isotropía de la cera derretida.
La impresión por inyección de tinta requiere recubrir el papel con un polímero hidrófobo y luego colocar selectivamente una tinta que graba el polímero para revelar el papel. [17] Esta técnica es de bajo costo y tiene alta resolución, pero está limitada por la velocidad de colocar una gota de tinta a la vez.
Las técnicas fotolitográficas son similares a la impresión por inyección de tinta, ya que utilizan una fotomáscara para grabar selectivamente un polímero fotorresistente . [18] Esta técnica tiene alta resolución y es rápida, pero tiene altos costos de equipo y material.
Esta técnica utiliza una técnica de impresión DLP en la que los polímeros de resina fotocurables se exponen a la luz para formar límites hidrófobos de microcanales abiertos en un papel poroso. Si los efectos de la evaporación son un problema en la aplicación específica, se pueden utilizar dos capas adicionales de resina curable en la parte superior e inferior del canal. A continuación, se limpia el exceso de resina sin curar con etanol. [19] Esta técnica tiene costes de equipo relativamente bajos y utiliza materiales fácilmente disponibles, lo que la convierte en una candidata prometedora para la producción en masa de dispositivos de diagnóstico en el punto de atención .
En esta técnica, primero se vuelve hidrófobo el papel utilizando un agente hidrofobizante como AKD o polimerización de plasma de fluorocarbono , y luego se utiliza el grabado de plasma de O2 con una máscara para crear patrones hidrófilos en el papel. Una ventaja de los procesos basados en plasma es que los diseños y funcionalidades complejos, como canales totalmente cerrados y semicerrados, [20] interruptores de flujo de encendido y apagado, [21] y canales de control de flujo de fluido [22] se pueden incorporar con relativa facilidad. Sin embargo, el costo de producción es relativamente más alto que otros métodos de fabricación.
La ionización por pulverización de papel se está desarrollando rápidamente como una interfaz para dispositivos analíticos basados en papel micro μPAD y espectrometría de masas. La técnica, descrita por primera vez por el grupo de Graham Cooks en Purdue, [23] implica aplicar un voltaje a una hoja triangular de papel húmedo cerca de la entrada de un espectrómetro de masas. Aunque el mecanismo exacto no se entiende bien, pueden ocurrir dos modos de operación: una pulverización de cono múltiple a altas velocidades de flujo y una pulverización de cono único que ocurre cuando se ha agotado el solvente. [24] Esto es parte de un esfuerzo mayor para combinar manipulaciones microfluídicas complejas con la detección espectral de masas. La impresión de cera de barreras hidrofóbicas es un método común para crear canales de flujo distintos dentro de dispositivos de papel, y esto se ha extendido a μPAD-MS para mejorar la eficiencia de ionización (al permitir el enfoque de la corriente de analito) y permitir la mezcla de reacción mediante la impresión de cera en la superficie triangular del papel. [25] También se han demostrado separaciones cromatográficas en μPAD antes de la detección por pulverización de papel. [26] Inicialmente, la ionización por pulverización de papel se aplicó para la detección de moléculas pequeñas, como productos farmacéuticos [27] y drogas de abuso. [28] Sin embargo, también se ha demostrado que la ionización por pulverización de papel puede ionizar proteínas grandes mientras se conservan interacciones no covalentes. [29]
Pocos detectores analíticos son verdaderamente específicos para una sola especie; por lo tanto, a menudo es necesario algún tipo de paso de separación antes de la detección. Además, la separación permite la detección de múltiples analitos dentro de una sola plataforma. Las separaciones basadas en cromatografía planar (TLC) son quizás las más fáciles de implementar, ya que muchos μPAD se construyen con papel cromatográfico. Normalmente, el canal de separación se define mediante la impresión de cera de dos barreras hidrófobas. [30] La detección electroquímica es quizás la más común, [31] probablemente debido a su facilidad de implementación, aunque la colorimetría , la quimioluminiscencia [32] y la detección espectral de masas también se han utilizado junto con las separaciones cromatográficas basadas en papel. A pesar de la facilidad de implementación, la cromatografía planar se ve obstaculizada por una altura de placa relativamente baja (es decir, una eficiencia de separación deficiente). Desde que el grupo de Chakraborty demostró la viabilidad del flujo electrocinético en μPAD, [33] han aparecido en la literatura varias aplicaciones de separaciones electroforéticas en μPAD. El grupo Crooks en UT-Austin demostró con éxito que las separaciones electroforéticas en μPAD se podían lograr con voltajes aplicados relativamente bajos en comparación con los dispositivos electroforéticos convencionales debido a las altas intensidades de campo que se pueden generar en hojas muy delgadas (180 μm) de papel para origami. [34] También se pueden utilizar métodos de separación más simples en μPAD; por ejemplo, el grupo Henry demostró la separación del plasma de la sangre completa utilizando membranas de separación de sangre. [35]
Existen varias formas de controlar el flujo de fluido en los canales. Estas incluyen cambiar el ancho y la longitud del canal, alterar la humectabilidad del papel, desviar parte del fluido a través de un canal paralelo o cambiar la viscosidad del fluido. [36] El flujo en los PAD se puede apagar con puentes de azúcar solubles, tratamiento de descarga de corona para alterar un recubrimiento en el papel de un estado hidrófobo a hidrófilo, o el uso de un polímero expandible activado por el flujo para cerrar la ruta de flujo. [37]
La integración de plataformas microfluídicas y componentes electrónicos tiene el potencial de generar sistemas de análisis total micro (μTAS), que son dispositivos que incluyen y automatizan todos los pasos esenciales para la preparación y el análisis de muestras. [38] La electrónica de papel se basa en estructuras funcionales como conductores que se fabrican en la superficie del papel, pero la microfluídica basada en papel se basa en canales y barreras que se fabrican dentro del sustrato. [38] Esta incompatibilidad llevó a que la mayoría de los μTAS se desarrollaran utilizando electrodos externos en contacto con los canales de papel. Sin embargo, en 2009, se integraron electrodos serigrafiados en un dispositivo microfluídico basado en papel para crear un biosensor de glucosa, lactato y ácido úrico. [39] Este primer informe de integración electrónica para microfluídica basada en papel ilustró cómo esto puede mejorar el diseño de μTAS a bajo costo. Desde entonces, se han desarrollado diversas técnicas de fabricación de electrodos, entre ellas la serigrafía , la impresión por inyección de tinta , la deposición catódica de metal, el dibujo a lápiz, la pirólisis inducida por láser y los electrodos externos para crear una red de trazas conductoras. [40]
La serigrafía es el método más popular para crear trazos electrónicos sobre papel. En este proceso, la tinta se transfiere a áreas de los canales microfluídicos basados en papel utilizando una plantilla. Dungchai et al . demostraron la detección electroquímica utilizando tinta de carbono serigrafiada para los electrodos de trabajo y contraelectrodos y tinta de plata/cloruro de plata como electrodo de referencia al final del canal microfluídico. [39] Los electrodos serigrafiados en dispositivos microfluídicos basados en papel se han utilizado no solo para desarrollar biosensores para metabolitos, [39] [41] [42] sino también para detectar bacterias [43] y metales pesados [44] en alimentos y agua. La naturaleza escalable de este proceso hace que sea prometedor crear dispositivos electroquímicos a un costo ultrabajo adecuados para pruebas de campo. [45]
Una técnica física prometedora es la impresión por inyección de tinta, que permite depositar materiales conductores de forma precisa y reproducible sobre papel. [38] [46] Como prueba de concepto, Ko et al . desarrollaron un chip eléctrico basado en papel utilizando una impresora de oficina en casa, una tinta hecha de nanotubos de carbono y papel de revista. [47] De manera similar, se imprimieron nanopartículas de plata en canales microfluídicos para detectar cambios en la permitividad de los fluidos, revelando información sobre la concentración y las proporciones de mezcla. [48] Sin embargo, los grupos de investigación han descubierto que estas tintas que contienen nanopartículas pueden autoagregarse en el papel debido a un secado desigual, lo que conduce a una cobertura no uniforme y respuestas no lineales. [46] Una técnica física prometedora es la impresión por inyección de tinta, que permite depositar materiales conductores de forma precisa y reproducible sobre papel. [38] [46] [49] [50] En este sentido, el crecimiento controlado de nanopartículas puede ayudar a mejorar la conductividad y el rendimiento de detección. A medida que los grupos de semillas crecen y se interconectan dentro de las fibras de papel, sus propiedades y estructura del material final se pueden controlar a través del proceso y las condiciones químicas. [51] Las condiciones típicas del proceso de crecimiento consisten en iones metálicos disueltos en un entorno químico reductor. Una vez que las nanopartículas han crecido, se pueden funcionalizar con biomoléculas de reconocimiento para aumentar la especificidad y la sensibilidad de los dispositivos microfluídicos. [52]
La impresión por inyección de tinta es compatible con una amplia variedad de materiales y es una tecnología prometedora no solo para fabricar trazas conductoras, sino también para incorporar componentes electrónicos avanzados como transistores en dispositivos basados en papel. [53]
La pulverización catódica de metales y óxidos metálicos es una de las técnicas más consolidadas en la microfabricación en salas blancas. Este enfoque se ha adaptado para pulverizar electrodos de oro sobre dispositivos microfluídicos basados en papel y ha demostrado un excelente rendimiento en la detección de ADN mediante etiquetas de puntos cuánticos. [54] Un beneficio notable de emplear oro puro como material del electrodo es el potencial de aprovechar la química de monocapa autoensamblada , que facilita la funcionalización y la antiincrustación de la superficie del electrodo.
La técnica del lápiz sobre papel es posiblemente la forma más sencilla y accesible de crear electrodos en microfluídica basada en papel, ya que utiliza suministros de oficina comunes y económicos. Aquí, el circuito grafítico se crea en el dispositivo microfluídico basado en papel dibujando repetidamente con un lápiz. [55] [56] [57] Por ejemplo, este método de integración eléctrica se utilizó en un dispositivo microfluídico de papel completamente dibujado a mano para la detección del cáncer en el punto de atención. [57] Esta técnica sin solventes permite la posibilidad de crear μTAS improvisados basados en papel. Sin embargo, el lápiz sobre papel también puede conducir a una deposición no uniforme de grafito, lo que limita el rendimiento de estos circuitos dibujados a mano. [56] Además, aunque el proceso se puede automatizar, el procedimiento de dibujo repetido es poco escalable.
La pirólisis de celulosa inducida por láser representa un método práctico para transformar el papel no conductor en un material similar al grafeno , ofreciendo así un medio fácilmente disponible para modelar electrodos sobre papel. [58] Los electrodos se crean in situ y conservan la propiedad porosa y absorbente del sustrato de papel, al tiempo que demuestran una gran área de superficie electroactiva para la detección. [59] Dado que los electrodos son completamente permeables al flujo capilar, se pueden construir dispositivos de flujo electroquímico utilizando esta tecnología. Sin embargo, como método de fabricación sin reactivos, hay poco margen para ajustar las propiedades de la superficie y la composición química de los electrodos resultantes.
El avance de tecnologías como la impresión 3D ha permitido la creación de electrodos utilizando equipos sencillos y de fácil acceso, lo que ha dado lugar a numerosos casos en los que estos electrodos se modelan como unidades independientes y, posteriormente, se integran con dispositivos microfluídicos basados en papel. Con este fin, ha habido varios ejemplos de modelado de electrodos termoplásticos y su uso para detección electroquímica, por ejemplo, en análisis de inyección de flujo. [60]
Se han desarrollado otros métodos de integración física ( recubrimiento por pulverización o centrifugación , mezcla y filtración al vacío) para la electrónica de papel, [46] pero aún no se han implementado en dispositivos microfluídicos basados en papel.
La principal ventaja de los dispositivos microfluídicos basados en papel sobre los dispositivos microfluídicos tradicionales es su potencial para su uso en el campo en lugar de en un laboratorio. [61] [62] El papel de filtro es ventajoso en un entorno de campo porque es capaz de eliminar contaminantes de la muestra y evitar que se desplacen por el microcanal. Esto significa que las partículas no inhibirán la precisión de los ensayos basados en papel cuando se utilizan al aire libre. [62] Los dispositivos microfluídicos basados en papel también son de tamaño pequeño (aproximadamente unos pocos mm a 2 cm de largo y ancho) [62] [63] [64] en comparación con otras plataformas microfluídicas, como los dispositivos microfluídicos basados en gotas, que a menudo utilizan portaobjetos de vidrio de hasta 75 mm de longitud. [65] [66] Debido a su pequeño tamaño y material relativamente duradero, los dispositivos microfluídicos basados en papel son portátiles. [61] [62] Los dispositivos basados en papel también son relativamente económicos. El papel de filtro es muy barato, al igual que la mayoría de los agentes de modelado utilizados en la fabricación de microcanales, incluidos PDMS y cera. La mayoría de los principales métodos de fabricación basados en papel tampoco requieren equipos de laboratorio costosos. [61] Estas características de la microfluídica basada en papel la hacen ideal para pruebas en el punto de atención , particularmente en países que carecen de herramientas de diagnóstico médico avanzadas. [62] La microfluídica basada en papel también se ha utilizado para realizar pruebas ambientales y de seguridad alimentaria. [67] [68] [69] [70] Los principales problemas en la aplicación de esta tecnología son la falta de investigación en las técnicas de control de flujo, precisión y exactitud, la necesidad de procedimientos de operador más simples en el campo y la escala de producción para cumplir con los requisitos de volumen de un mercado global. [37] Esto se debe en gran medida al enfoque en la industria en utilizar los canales de fabricación basados en silicio actuales para comercializar tecnologías LOC de manera más eficiente y económica. [71]
El objetivo original de la microfluídica basada en papel (μPAD) era fabricar dispositivos de punto de atención (POC) de bajo costo y fáciles de usar que se puedan operar sin la asistencia de personal médico o cualquier otro especialista calificado en áreas rurales y con recursos limitados. [72] Para lograr este objetivo, μPAD debe cumplir con los criterios "Asequible, Sensible, Específico, Fácil de usar, Rápido y robusto, Sin equipo, Entregar", proporcionados por la Organización Mundial de la Salud (OMS), que son los requisitos para las pruebas de diagnóstico para entornos con recursos limitados. [72] [73] [74] Sin embargo, en la "Guía para ayudar a la selección de pruebas de diagnóstico" oficial de POC se afirma que estos criterios son genéricos y se pueden modificar según la aplicación de la prueba. [73] El principal problema de los diagnósticos microfluídicos basados en papel es que la investigación en este campo se dirige a proporcionar nuevos conceptos e ideas en lugar de mejorar la aceptación del usuario y, como resultado, la mayoría de los dispositivos μPAD aún no pueden ser interpretados por usuarios no profesionales. [75] Sin embargo, POC no es la única aplicación de la microfluídica basada en papel para diagnósticos. Recientemente, se empleó un papel en la producción de dispositivos analíticos microfluídicos más complicados, llamados dispositivos de laboratorio en un chip (LOC), que también se utilizan en diagnósticos. El uso de papel para fabricar dispositivos LOC en lugar de polidimetilsiloxano (PDMS) y vidrio puede reducir el costo y el tamaño al mismo tiempo que aumenta la portabilidad. Esto permite que los dispositivos LOC se vuelvan más accesibles en condiciones de recursos limitados. [76]
Recientemente, la microfluídica de papel se ha utilizado en la fabricación de numerosas pruebas inmunológicas. Khan et al. en 2010 investigaron un dispositivo de tipificación sanguínea basado en el principio de que la aglutinación de glóbulos rojos , desencadenada por la interacción de antígenos específicos , disminuye drásticamente la absorción y el transporte de sangre en papel o medios cromatográficos . [77] El concepto se exhibió con un prototipo de dispositivo microfluídico basado en papel, hecho de un papel de filtro con forma de zona central con tres canales extensibles. Cada canal se trata con una solución diferente de anticuerpo (Epiclone Anti-A, Anti-B y Anti-D). [77] Dado que los μPAD se crearon deliberadamente para su uso en condiciones de escasez de recursos, es muy importante proporcionar la capacidad de analizar muestras reales como sangre y orina humanas no pretratadas . [78] Este dispositivo está construido para analizar muestras de sangre completa , lo que es un paso importante para aumentar la aceptación del usuario de los diagnósticos microfluídicos basados en papel. El análisis se basa en el comportamiento de absorción de la mezcla de sangre o anticuerpos sobre el papel. La mezcla de muestras de sangre con anticuerpos de inmunoglobulina M , específicos para cada grupo sanguíneo , provoca la aglutinación de los glóbulos rojos (RBC) mediante la formación de puentes de polímeros tras la adsorción en los antígenos de los glóbulos rojos correspondientes, y se produce la separación cromatográfica de la muestra en el canal determinado del dispositivo. Al mismo tiempo, la separación no se produce en las manos empapadas en anticuerpos no específicos y la muestra de sangre se debilita como una solución uniforme y estable . A partir de la evidente diferencia en el transporte de la solución y la apariencia del canal, se puede identificar el efecto de separación para la determinación del tipo de sangre. [79] [61] [77]
Noiphung et al. en 2014 siguieron un enfoque en la tipificación sanguínea microfluídica basada en papel usando anticuerpos para causar la aglutinación de glóbulos rojos, y el grupo diseñó un nuevo dispositivo analítico basado en papel (PAD) para la agrupación sanguínea que se puede usar para la realización sincrónica de la agrupación sanguínea Rh y ABO directa e inversa en el mismo dispositivo. [80] La agrupación directa es un procedimiento de tipificación sanguínea mediante el cual los glóbulos rojos del paciente se mezclan con reactivos Anti-A y Anti-B. Por otro lado, la tipificación inversa es un procedimiento de tipificación sanguínea donde el suero del paciente se mezcla con células del reactivo A y células del reactivo B. Los resultados deben ser opuestos a la tipificación directa. [81] El dispositivo diseñado tiene dos lados: lado delantero (F), hecho de papel de cromatografía con tres canales manchados con 1,5 mL de soluciones de anticuerpos Anti-A, Anti-B y Anti-D cada uno, y lado inverso (R), hecho con membrana de separación de sangre y conectado a canales de anticuerpos de tipo A y tipo B. El PAD se fabrica utilizando una combinación de tecnologías de inmersión en cera para unir el papel de cromatografía Whatman y la membrana de separación de sangre. El dispositivo incluía tres canales impresos en cera para la agrupación directa, dos de los cuales también se aplicaron para la agrupación inversa. Si bien el lado R era apto para el análisis de muestras de sangre completa, el grupo de Noiphung descubrió que las muestras de sangre completa son demasiado viscosas para aplicarse directamente en un lado de papel del dispositivo. Durante el experimento, se determinó que la relación óptima de dilución sangre-agua es 1:2. La tipificación sanguínea se ejecutó midiendo la relación de las distancias de transporte de los glóbulos rojos (RBC) y el plasma . La precisión de los PAD propuestos en la tipificación sanguínea fue del 92 %, 85 %, 89 %, 93 % y 96 % para los tipos de sangre A, B, AB, O y Rh+ respectivamente. [80] [79] [77]
Los dispositivos microfluídicos basados en papel se han diseñado para monitorear una amplia variedad de dolencias médicas. La glucosa juega un papel importante en la diabetes y el cáncer, [82] y se puede detectar a través de un ciclo catalítico que involucra glucosa oxidasa , peróxido de hidrógeno y peroxidasa de rábano picante que inicia una reacción entre la glucosa y un indicador de color, frecuentemente yoduro de potasio , en un dispositivo microfluídico basado en papel. [82] Este es un ejemplo de detección colorimétrica . El primer dispositivo microfluídico basado en papel, desarrollado por el grupo de George Whitesides en Harvard, pudo detectar simultáneamente proteínas y glucosa a través de reacciones de cambio de color ( reacción de yoduro de potasio para glucosa y reacción de azul de tetrabromofenol para la proteína BSA ). [62] La parte inferior del dispositivo de papel se inserta en una solución de muestra preparada en el laboratorio y se observa la cantidad de cambio de color. [62] Más recientemente, se desarrolló un dispositivo microfluídico basado en papel que utiliza detección colorimétrica para cuantificar la glucosa en el plasma sanguíneo. El plasma sanguíneo se separa de las muestras de sangre completa en un dispositivo impreso en cera, donde los glóbulos rojos son aglutinados por anticuerpos y el plasma sanguíneo puede fluir a un segundo compartimento para la reacción de cambio de color. [63] La detección electroquímica [83] también se ha utilizado en estos dispositivos. Proporciona una mayor sensibilidad en la cuantificación, mientras que la detección colorimétrica se utiliza principalmente para evaluaciones cualitativas. [61] [82] Se han utilizado electrodos serigrafiados [84] y electrodos impresos directamente en papel de filtro [85] . Un ejemplo de un dispositivo microfluídico basado en papel que utiliza la detección electroquímica tiene forma de mancuerna para aislar el plasma de la sangre completa. [85] La corriente del peróxido de hidrógeno producido en el ciclo catalítico mencionado anteriormente se mide y se convierte en concentración de glucosa. [85]
El grupo de Whitesides también desarrolló un dispositivo microfluídico basado en papel 3D para la detección de glucosa que puede producir curvas de calibración en el chip debido al diseño mejorado del flujo de fluido. [86] Este dispositivo 3D consta de capas de papel estampadas con canales microfluídicos que están conectados por capas de cinta adhesiva de doble cara con agujeros. Los agujeros en la cinta permiten el flujo entre canales en capas alternas de papel, por lo que este dispositivo permite rutas de flujo más complicadas y permite la detección de múltiples muestras en una gran cantidad (hasta ~1000) de zonas de detección en la última capa de papel. [86] Más recientemente, se desarrollaron dispositivos microfluídicos basados en papel 3D ensamblados usando origami . [87] A diferencia del diseño de Whitesides, estos dispositivos utilizan una sola capa de papel estampado que luego se dobla en múltiples capas antes de que la solución de muestra se inyecte en el dispositivo. [87] Posteriormente, el dispositivo se puede desplegar y cada capa del dispositivo se puede analizar para la detección simultánea de múltiples analitos. [87] Este dispositivo es más simple y menos costoso de fabricar que el dispositivo mencionado anteriormente que utiliza múltiples capas de papel. [86] [87] La mezcla entre los canales en las diferentes capas no fue un problema en ninguno de los dispositivos, por lo que ambos dispositivos tuvieron éxito en cuantificar la glucosa y la BSA en múltiples muestras simultáneamente. [86] [87]
Los dispositivos microfluídicos basados en papel tienen varias aplicaciones fuera del campo médico. Por ejemplo, los biosensores basados en papel se han utilizado ampliamente en el monitoreo ambiental . [67] [68] [69] [70] Se desarrollaron dos dispositivos recientes para la detección de Salmonella [68] y E. coli . [67] El último dispositivo se utilizó específicamente para detectar E. coli en siete muestras de agua de campo de Tucson , Arizona . [67] Las partículas de poliestireno conjugadas con anticuerpos se cargaron en el medio del canal microfluídico, después de la entrada de la muestra. La inmunoaglutinación ocurre cuando las muestras que contienen Salmonella o E. coli , respectivamente, entran en contacto con estas partículas. [67] [68] La cantidad de inmunoaglutinación se puede correlacionar con el aumento de la dispersión de luz de Mie, que se detectó con una aplicación de teléfono inteligente especializada bajo luz ambiental. [67] [68] La microfluídica basada en papel también se ha utilizado para detectar pesticidas en productos alimenticios, como el jugo de manzana y la leche. [69] Un diseño reciente utilizó impresión de inyección de tinta piezoeléctrica para imprimir papel con la enzima acetilcolinesterasa (AChE) y el sustrato acetato de indofenilo (IPA), y este dispositivo microfluídico basado en papel se utilizó para detectar pesticidas organofosforados ( inhibidores de AChE ) a través de una disminución del color azul-violeta. [69] Este dispositivo se distingue por el uso de papel bioactivo en lugar de compartimentos con reactivos almacenados previamente, y se demostró que tiene una buena estabilidad a largo plazo, lo que lo hace ideal para uso en campo. [69] Un diseño microfluídico basado en papel más reciente utilizó un sensor, que consiste en ADN monocatenario marcado con fluorescencia (ssDNA) acoplado con óxido de grafeno , en su superficie para detectar simultáneamente metales pesados y antibióticos en productos alimenticios. [70] Los metales pesados aumentaron la intensidad de la fluorescencia, mientras que los antibióticos disminuyeron la intensidad de la fluorescencia. [70] Recientemente, los dispositivos basados en papel se han vuelto muy atractivos para fabricar dispositivos analíticos económicos, desechables y convenientes para la determinación de fosfato reactivo en agua. Estos dispositivos utilizan el protocolo de azul de molibdeno para la detección de fosfato. [88]