stringtranslate.com

Criopreservación

Muestras conservadas criogénicamente que se extraen de un recipiente con nitrógeno líquido

La criopreservación o crioconservación es un proceso en el que el material biológico ( células , tejidos u órganos ) se congela para preservar el material durante un período prolongado de tiempo. [1] A bajas temperaturas (normalmente −80 °C (−112 °F) o −196 °C (−321 °F) utilizando nitrógeno líquido ), se detiene eficazmente cualquier metabolismo celular que pueda dañar el material biológico en cuestión. La criopreservación es una forma eficaz de transportar muestras biológicas a largas distancias, almacenar muestras durante períodos prolongados de tiempo y crear un banco de muestras para los usuarios. Se añaden moléculas, denominadas agentes crioprotectores (CPA), para reducir el choque osmótico y el estrés físico que sufren las células en el proceso de congelación. [2] Algunos agentes crioprotectores utilizados en la investigación se inspiran en plantas y animales de la naturaleza que tienen una tolerancia al frío única para sobrevivir a inviernos duros, incluidos: árboles, [3] [4] ranas de bosque, [5] y tardígrados. [6] El primer cadáver humano que se congeló con la esperanza de una futura resurrección fue el de James Bedford , unas horas después de su muerte causada por cáncer en 1967.[15] El de Bedford es el único cadáver criónico congelado antes de 1974 que todavía se encuentra congelado en la actualidad.

Criopreservación natural

Los tardígrados , organismos multicelulares microscópicos, pueden sobrevivir a la congelación reemplazando la mayor parte de su agua interna con un azúcar llamado trehalosa , lo que evita que se cristalice y dañe las membranas celulares . Las mezclas de solutos pueden lograr efectos similares. Algunos solutos, incluidas las sales, tienen la desventaja de que pueden ser tóxicos en concentraciones intensas. Además del oso de agua, las ranas de bosque pueden tolerar la congelación de su sangre y otros tejidos. La urea se acumula en los tejidos en preparación para la hibernación y el glucógeno hepático se convierte en grandes cantidades en glucosa en respuesta a la formación de hielo interno. Tanto la urea como la glucosa actúan como " crioprotectores " para limitar la cantidad de hielo que se forma y reducir la contracción osmótica de las células. Las ranas pueden sobrevivir a muchos eventos de congelación/descongelación durante el invierno si no se congela más del 65% del agua corporal total. La investigación que explora el fenómeno de las "ranas congeladas" ha sido realizada principalmente por el investigador canadiense Dr. Kenneth B. Storey . [ cita requerida ]

La tolerancia a la congelación , en la que los organismos sobreviven al invierno congelándose y cesando sus funciones vitales, se conoce en unos pocos vertebrados: cinco especies de ranas ( Rana sylvatica , Pseudacris triseriata , Hyla crucifer , Hyla versicolor , Hyla chrysoscelis ), una de salamandras ( Salamandrella keyserlingii ), una de serpientes ( Thamnophis sirtalis ) y tres de tortugas ( Chrysemys picta , Terrapene carolina , Terrapene ornata ). [7] Las tortugas mordedoras Chelydra serpentina y las lagartijas de pared Podarcis muralis también sobreviven a la congelación nominal, pero no se ha establecido que sea adaptativa para la hibernación. En el caso de Rana sylvatica, un criopreservante es la glucosa ordinaria, cuya concentración aumenta aproximadamente en 19 mmol/L cuando las ranas se enfrían lentamente. [7]

Historia

Tubos de muestras biológicas que se colocan en nitrógeno líquido.

Uno de los primeros teóricos de la criopreservación fue James Lovelock . En 1953, sugirió que el daño a los glóbulos rojos durante la congelación se debía al estrés osmótico , [8] y que el aumento de la concentración de sal en una célula deshidratada podría dañarla. [9] [10] A mediados de la década de 1950, experimentó con la criopreservación de roedores, determinando que los hámsteres podían congelarse con el 60% del agua del cerebro cristalizada en hielo sin efectos adversos; se demostró que otros órganos eran susceptibles a sufrir daños. [11]

La criopreservación se aplicó a materiales humanos a partir de 1954, con tres embarazos resultantes de la inseminación de esperma previamente congelado. [12] El esperma de aves fue criopreservado en 1957 por un equipo de científicos en el Reino Unido dirigido por Christopher Polge . [13] Durante 1963, Peter Mazur, en el Laboratorio Nacional Oak Ridge en los EE. UU., demostró que la congelación intracelular letal podía evitarse si el enfriamiento era lo suficientemente lento como para permitir que saliera suficiente agua de la célula durante la congelación progresiva del líquido extracelular. Esa velocidad difiere entre células de diferente tamaño y permeabilidad al agua: una velocidad de enfriamiento típica de alrededor de 1 °C/minuto es apropiada para muchas células de mamíferos después del tratamiento con crioprotectores como el glicerol o el dimetilsulfóxido, pero la velocidad no es un óptimo universal. [14]

El 22 de abril de 1966 se congeló el primer cadáver humano (que había estado embalsamado durante dos meses) colocándolo en nitrógeno líquido y almacenándolo a una temperatura apenas por encima del punto de congelación. El cadáver era el de una anciana de Los Ángeles, cuyo nombre se desconoce, y pronto fue descongelado y enterrado por sus familiares. El primer cadáver humano que se congeló con la esperanza de una futura resurrección fue el de James Bedford , pocas horas después de su muerte por cáncer en 1967. [15] El de Bedford es el único cadáver criogénico congelado antes de 1974 que todavía se encuentra congelado en la actualidad. [16]

Riesgos

Los fenómenos que pueden causar daño a las células durante la criopreservación ocurren principalmente durante la etapa de congelación e incluyen efectos de solución, formación de hielo extracelular , deshidratación y formación de hielo intracelular . Muchos de estos efectos pueden reducirse con crioprotectores. Una vez que el material preservado se ha congelado, está relativamente a salvo de sufrir más daños. [17]

Efectos de la solución
A medida que los cristales de hielo crecen en el agua helada, se excluyen los solutos , lo que hace que se concentren en el agua líquida restante. Las altas concentraciones de algunos solutos pueden ser muy dañinas.
Formación de hielo extracelular
Cuando los tejidos se enfrían lentamente, el agua migra fuera de las células y se forma hielo en el espacio extracelular. Un exceso de hielo extracelular puede causar daño mecánico a la membrana celular debido al aplastamiento.
Deshidración
La migración de agua, que provoca la formación de hielo extracelular, también puede provocar deshidratación celular. Las tensiones asociadas a esta situación sobre la célula pueden causar daños directos.
Formación de hielo intracelular
Si bien algunos organismos y tejidos pueden tolerar algo de hielo extracelular, cualquier cantidad apreciable de hielo intracelular casi siempre es fatal para las células.

Principales métodos para prevenir riesgos

Las principales técnicas para prevenir daños durante la criopreservación son una combinación bien establecida de congelación lenta y a velocidad controlada y un proceso más nuevo de congelación rápida conocido como vitrificación .

Congelación lenta programable

Un tanque de nitrógeno líquido, utilizado para abastecer un congelador criogénico (para almacenar muestras de laboratorio a una temperatura de aproximadamente -150 °C o -238 °F)

La congelación lenta y a velocidad controlada , también conocida como congelación lenta programable (SPF) , [18] es una técnica en la que las células se enfrían a alrededor de -196 °C en el transcurso de varias horas.

La congelación lenta programable se desarrolló a principios de los años 70 y finalmente dio como resultado el primer nacimiento de embriones humanos congelados en 1984. Desde entonces, se han utilizado máquinas que congelan muestras biológicas mediante secuencias programables o velocidades controladas para la biología humana, animal y celular: "congelan" una muestra para preservarla mejor para su posterior descongelación, antes de congelarla o criopreservarla en nitrógeno líquido. Estas máquinas se utilizan para congelar ovocitos, piel, productos sanguíneos, embriones, esperma, células madre y la conservación general de tejidos en hospitales, consultorios veterinarios y laboratorios de investigación de todo el mundo. A modo de ejemplo, se estima que el número de nacimientos vivos a partir de embriones congelados "congelados lentamente" es de unos 300.000 a 400.000, o el 20% de los 3 millones de nacimientos estimados por fertilización in vitro (FIV). [19]

La congelación intracelular letal se puede evitar si el enfriamiento es lo suficientemente lento como para permitir que salga suficiente agua de la célula durante la congelación progresiva del fluido extracelular. Para minimizar el crecimiento de cristales de hielo extracelulares y la recristalización, [20] se pueden utilizar biomateriales como alginatos , alcohol polivinílico o quitosano para impedir el crecimiento de cristales de hielo junto con crioprotectores tradicionales de moléculas pequeñas. [21] Esa velocidad difiere entre células de diferente tamaño y permeabilidad al agua : una velocidad de enfriamiento típica de aproximadamente 1 °C/minuto es apropiada para muchas células de mamíferos después del tratamiento con crioprotectores como glicerol o dimetilsulfóxido (DMSO), pero la velocidad no es un óptimo universal. La velocidad de 1 °C/minuto se puede lograr utilizando dispositivos como un congelador de velocidad controlada o un contenedor de congelación portátil de sobremesa. [22]

Varios estudios independientes han aportado pruebas de que los embriones congelados almacenados mediante técnicas de congelación lenta pueden ser, en algunos aspectos, "mejores" que los frescos en la FIV. Los estudios indican que el uso de embriones y óvulos congelados en lugar de embriones y óvulos frescos reduce el riesgo de muerte fetal y parto prematuro, aunque todavía se están investigando las razones exactas.

Vitrificación

La vitrificación es un proceso de congelación rápida (enfriamiento ultrarrápido) que ayuda a prevenir la formación de cristales de hielo y ayuda a prevenir daños durante la criopreservación.

Los investigadores Greg Fahy y William F. Rall ayudaron a introducir la vitrificación en la criopreservación reproductiva a mediados de los años 1980. [23] A partir de 2000, los investigadores afirman que la vitrificación proporciona los beneficios de la criopreservación sin daños debido a la formación de cristales de hielo. [24] La situación se volvió más compleja con el desarrollo de la ingeniería de tejidos, ya que tanto las células como los biomateriales deben permanecer libres de hielo para preservar la alta viabilidad y funciones celulares, la integridad de las construcciones y la estructura de los biomateriales. La vitrificación de construcciones de ingeniería de tejidos fue reportada por primera vez por Lilia Kuleshova, [25] quien también fue la primera científica en lograr la vitrificación de ovocitos , lo que resultó en un nacimiento vivo en 1999. [26] Para la criopreservación clínica, la vitrificación generalmente requiere la adición de crioprotectores antes del enfriamiento. Los crioprotectores son macromoléculas agregadas al medio de congelación para proteger a las células de los efectos perjudiciales de la formación de cristales de hielo intracelulares o de los efectos de la solución, durante el proceso de congelación y descongelación. Permiten un mayor grado de supervivencia celular durante la congelación, reducen el punto de congelación y protegen la membrana celular de las lesiones relacionadas con la congelación. Los crioprotectores tienen una alta solubilidad, baja toxicidad a altas concentraciones, un bajo peso molecular y la capacidad de interactuar con el agua a través de enlaces de hidrógeno.

En lugar de cristalizarse , la solución almibarada se convierte en hielo amorfo , es decir, se vitrifica . En lugar de un cambio de fase de líquido a sólido por cristalización, el estado amorfo es como un "líquido sólido", y la transformación se produce en un pequeño rango de temperaturas conocido como la temperatura de " transición vítrea ".

La vitrificación del agua se promueve mediante un enfriamiento rápido y se puede lograr sin crioprotectores mediante una disminución extremadamente rápida de la temperatura (megakelvins por segundo). La velocidad necesaria para alcanzar el estado vítreo en agua pura se consideraba imposible hasta 2005. [27]

Dos condiciones que suelen ser necesarias para que se produzca la vitrificación son un aumento de la viscosidad y una disminución de la temperatura de congelación. Muchos solutos cumplen ambas condiciones, pero las moléculas más grandes suelen tener un efecto mayor, en particular sobre la viscosidad. El enfriamiento rápido también favorece la vitrificación.

En los métodos de criopreservación establecidos, el soluto debe penetrar la membrana celular para lograr una mayor viscosidad y disminuir la temperatura de congelación dentro de la célula. Los azúcares no atraviesan fácilmente la membrana. Los solutos que sí lo hacen, como el DMSO, un crioprotector común, suelen ser tóxicos en concentraciones intensas. Uno de los compromisos difíciles de la criopreservación vitrificante se refiere a limitar el daño producido por el propio crioprotector debido a su toxicidad. Las mezclas de crioprotectores y el uso de bloqueadores de hielo han permitido a la empresa 21st Century Medicine vitrificar un riñón de conejo a -135 °C con su mezcla de vitrificación patentada. Tras el recalentamiento, el riñón se trasplantó con éxito a un conejo, con funcionalidad y viabilidad completas, capaz de sostener al conejo indefinidamente como el único riñón funcional. [28] En 2000, FM-2030 se convirtió en la primera persona en ser vitrificada con éxito de manera póstuma. [29]

Persuflación

La sangre puede ser reemplazada con gases nobles inertes y/o gases metabólicamente vitales como el oxígeno , de modo que los órganos puedan enfriarse más rápidamente y se necesite menos anticongelante. Dado que las regiones de tejido están separadas por gas, las pequeñas expansiones no se acumulan, lo que protege contra la rotura. [30] Una pequeña empresa, Arigos Biomedical, "ya ha recuperado corazones de cerdo de los 120 grados bajo cero", [31] aunque la definición de "recuperado" no está clara. Las presiones de 60 atm pueden ayudar a aumentar las tasas de intercambio de calor. [32] La perfusión/persuflación de oxígeno gaseoso puede mejorar la conservación de los órganos en relación con el almacenamiento en frío estático o la perfusión en máquina hipotérmica, ya que la menor viscosidad de los gases puede ayudar a llegar a más regiones de órganos preservados y entregar más oxígeno por gramo de tejido. [33]

Tejidos congelables

En general, la criopreservación es más sencilla para muestras delgadas y células suspendidas, porque se pueden enfriar más rápidamente y, por lo tanto, requieren dosis menores de crioprotectores tóxicos . Por lo tanto, la criopreservación de hígados y corazones humanos para su almacenamiento y trasplante aún no es práctica.

Sin embargo, las combinaciones adecuadas de crioprotectores y regímenes de enfriamiento y enjuague durante el calentamiento a menudo permiten la criopreservación exitosa de materiales biológicos, en particular suspensiones celulares o muestras delgadas de tejido. Algunos ejemplos incluyen:

Embriones

La criopreservación de embriones se utiliza para el almacenamiento de embriones, por ejemplo, cuando la FIV ha dado como resultado más embriones de los que se necesitan actualmente.

Se ha informado de un embarazo y un nacimiento sano resultante de un embrión almacenado durante 27 años, después del embarazo exitoso de un embrión del mismo lote tres años antes. [39] Muchos estudios han evaluado a los niños nacidos de embriones congelados, o "frosties". El resultado ha sido uniformemente positivo sin aumento de defectos de nacimiento o anomalías del desarrollo. [40] Un estudio de más de 11.000 embriones humanos criopreservados no mostró ningún efecto significativo del tiempo de almacenamiento en la supervivencia después de la descongelación para ciclos de FIV o donación de ovocitos, o para embriones congelados en las etapas pronucleares o de división. [41] Además, la duración del almacenamiento no tuvo ningún efecto significativo en el embarazo clínico, el aborto espontáneo, la implantación o la tasa de nacidos vivos, ya sea de ciclos de FIV o de donación de ovocitos. [41] Más bien, la edad de los ovocitos, la proporción de supervivencia y el número de embriones transferidos son predictores del resultado del embarazo. [41]

Tejido ovárico

La criopreservación de tejido ovárico es de interés para las mujeres que desean preservar su función reproductiva más allá del límite natural, o cuyo potencial reproductivo está amenazado por la terapia del cáncer, [42] por ejemplo en neoplasias hematológicas o cáncer de mama. [43] El procedimiento consiste en tomar una parte del ovario y realizar una congelación lenta antes de almacenarlo en nitrógeno líquido mientras se realiza la terapia. Luego, el tejido se puede descongelar e implantar cerca de las trompas de Falopio, ya sea ortotópico (en la ubicación natural) o heterotópico (en la pared abdominal), [43] donde comienza a producir nuevos óvulos, lo que permite que se produzca una concepción normal. [44] El tejido ovárico también se puede trasplantar a ratones inmunodeprimidos ( ratones SCID ) para evitar el rechazo del injerto , y el tejido se puede recolectar más tarde cuando se hayan desarrollado los folículos maduros. [45]

Ovocitos

La criopreservación de ovocitos humanos es una nueva tecnología en la que se extraen, congelan y almacenan los óvulos de una mujer ( ovocitos ). Más tarde, cuando esté lista para quedarse embarazada, los óvulos se pueden descongelar, fertilizar y transferir al útero como embriones . Desde 1999, cuando Kuleshova y sus colaboradores informaron sobre el nacimiento del primer bebé de un embrión derivado de óvulos de mujer vitrificados y calentados en la revista Human Reproduction, [25] este concepto ha sido reconocido y difundido. Este avance en la consecución de la vitrificación de los ovocitos de una mujer supuso un avance importante en nuestro conocimiento y práctica del proceso de FIV, ya que la tasa de embarazo clínico es cuatro veces mayor después de la vitrificación de ovocitos que después de la congelación lenta. [46] La vitrificación de ovocitos es vital para preservar la fertilidad en pacientes oncológicas jóvenes y para personas que se someten a FIV y se oponen, por razones religiosas o éticas, a la práctica de congelar embriones.

Semen

El semen puede utilizarse con éxito casi indefinidamente después de la criopreservación. El período de almacenamiento exitoso más prolongado registrado es de 22 años. [47] Se puede utilizar para la donación de esperma cuando el receptor desea que el tratamiento se realice en un momento o lugar diferente o como un medio para preservar la fertilidad en el caso de hombres que se someten a una vasectomía o a tratamientos que pueden comprometer su fertilidad, como quimioterapia , radioterapia o cirugía.

Tejido testicular

La criopreservación de tejido testicular inmaduro es un método en desarrollo para facilitar la reproducción a niños jóvenes que necesitan recibir terapia gonadotóxica. Los datos obtenidos en animales son prometedores, ya que se han obtenido crías sanas tras el trasplante de suspensiones de células testiculares congeladas o trozos de tejido. Sin embargo, ninguna de las opciones de restauración de la fertilidad a partir de tejido congelado, es decir, el trasplante de suspensiones de células, el injerto de tejido y la maduración in vitro, ha demostrado ser eficaz y segura en humanos hasta el momento. [48]

Musgo

Cuatro ecotipos diferentes de Physcomitrella patens almacenados en el Centro Internacional de Reservas de Musgos

Ralf Reski y sus colaboradores [49] desarrollaron la criopreservación de plantas de musgo enteras , especialmente de Physcomitrella patens , y la realizan en el International Moss Stock Center . Este biobanco recolecta, preserva y distribuye mutantes y ecotipos de musgo . [50]

Células estromales mesenquimales (MSC)

Las MSC, cuando se transfunden inmediatamente a las pocas horas de la descongelación, pueden mostrar una función reducida o una eficacia reducida en el tratamiento de enfermedades en comparación con las MSC que están en la fase logarítmica de crecimiento celular (frescas). Como resultado, las MSC criopreservadas deben volver a la fase logarítmica de crecimiento celular en un cultivo in vitro antes de administrarlas para ensayos clínicos o terapias experimentales. El recultivo de las MSC ayudará a recuperarse del shock que sufren las células durante la congelación y la descongelación. Varios ensayos clínicos sobre MSC han fracasado en los que se utilizaron productos criopreservados inmediatamente después de la descongelación en comparación con los ensayos clínicos que utilizaron MSC frescas. [51]

Semilla

La criopreservación de plantas se está volviendo vital por su valor para la biodiversidad. Las semillas se consideran a menudo un importante sistema de transmisión de información genética. La criopreservación de semillas recalcitrantes es la más difícil debido a la intolerancia a las bajas temperaturas y al bajo contenido de agua. [52] Sin embargo, la solución de vitrificación de plantas puede resolver el problema y ayudar a criopreservar las semillas recalcitrantes (Nymphaea caerulea). [53]

Conservación de cultivos microbiológicos

Las bacterias y los hongos se pueden conservar refrigerados durante un corto periodo de tiempo (desde meses hasta aproximadamente un año, según el caso); sin embargo, la división celular y el metabolismo no se detienen por completo y, por lo tanto, no es una opción óptima para el almacenamiento a largo plazo (años) o para preservar cultivos genéticamente o fenotípicamente, ya que las divisiones celulares pueden provocar mutaciones o el subcultivo puede causar cambios fenotípicos. Una opción preferida, que depende de la especie, es la criopreservación. Los gusanos nematodos son los únicos eucariotas multicelulares que han demostrado sobrevivir a la criopreservación. [54] [55]

Hongos

Los hongos, en particular los zigomicetos, ascomicetos y basidiomicetos superiores, independientemente de su esporulación, pueden almacenarse en nitrógeno líquido o congelados. La criopreservación es un método distintivo para los hongos que no esporulan (de lo contrario, se pueden utilizar otros métodos de conservación de esporas a menor costo y facilidad), esporulan pero tienen esporas delicadas (grandes o sensibles a la liofilización), son patógenos (es peligroso mantener hongos metabólicamente activos) o se van a utilizar para reservas genéticas (lo ideal es que tengan una composición idéntica a la del depósito original). Al igual que con muchos otros organismos, se utilizan crioprotectores como DMSO o glicerol (por ejemplo, hongos filamentosos 10% glicerol o levadura 20% glicerol). Las diferencias entre la elección de crioprotectores dependen de la especie (o clase), pero en general, para los hongos, los crioprotectores penetrantes como el DMSO, el glicerol o el polietilenglicol son los más eficaces (otros no penetrantes incluyen azúcares como manitol, sorbitol, dextrano, etc.). No se recomienda la repetición de la congelación y descongelación, ya que puede reducir la viabilidad. Se recomiendan congeladores de respaldo o sitios de almacenamiento de nitrógeno líquido. A continuación, se resumen varios protocolos para la congelación (cada uno utiliza criotubos de polipropileno con tapa de rosca): [56]

Bacteria

Muchas cepas cultivables de laboratorio comunes se congelan para preservar existencias genética y fenotípicamente estables a largo plazo. [57] El subcultivo y la refrigeración prolongada de las muestras pueden provocar la pérdida de plásmidos o mutaciones. Los porcentajes finales comunes de glicerol son 15, 20 y 25. De una placa de cultivo fresca, se elige una sola colonia de interés y se realiza un cultivo líquido. A partir del cultivo líquido, el medio se mezcla directamente con una cantidad igual de glicerol; la colonia debe revisarse para detectar defectos como mutaciones. Todos los antibióticos deben lavarse del cultivo antes del almacenamiento a largo plazo. Los métodos varían, pero la mezcla se puede hacer suavemente por inversión o rápidamente por vórtice y el enfriamiento puede variar colocando el criotubo directamente a −50 a −95 °C, congelando de golpe en nitrógeno líquido o enfriando gradualmente y luego almacenando a −80 °C o menos (nitrógeno líquido o vapor de nitrógeno líquido). La recuperación de bacterias también puede variar, es decir, si las perlas se almacenan dentro del tubo, entonces las pocas perlas se pueden usar para sembrar o el stock congelado se puede raspar con un asa y luego sembrar; sin embargo, dado que solo se necesita una pequeña cantidad de stock, el tubo entero nunca se debe descongelar por completo y se debe evitar la congelación y descongelación repetidas. La recuperación del 100% no es factible independientemente de la metodología. [58] [59] [60]

Tolerancia a la congelación en animales

Gusanos

Los nematodos microscópicos que viven en el suelo, Panagrolaimus detritophagus y Plectus parvus, son los únicos organismos eucariotas que han demostrado ser viables después de la criopreservación durante muchos años (30.000 a 40.000 años). En este caso, la conservación fue natural en lugar de artificial, debido al permafrost . Cobraron vida cuando se calentaron.

Vertebrados

Se ha demostrado que varias especies animales, incluidos peces, anfibios y reptiles, toleran la congelación. Al menos cuatro especies de ranas ( Pseudacris crucifer , Hyla versicolor , Pseudacris triseriata , Lithobates sylvaticus ) y varias especies de tortugas ( Terrapene carolina , cría de Chrysemys picta ), lagartijas y serpientes son tolerantes a la congelación y han desarrollado adaptaciones para sobrevivir a la congelación. Si bien algunas ranas hibernan bajo tierra o en el agua, las temperaturas corporales aún caen a -5 a -7 °C, lo que hace que se congelen. La rana de bosque ( Lithobates sylvaticus ) puede soportar la congelación repetida, durante la cual aproximadamente el 65% de su líquido extracelular se convierte en hielo. [57]

Perspectiva antropológica sobre la criopreservación

Basada en una ciencia especulativa, la criónica es controvertida en el debate científico y puede entenderse mejor como un ritual de muerte emergente a lo largo de la evolución social de la cultura y la tecnología humanas. La creencia en una vida después de la muerte , o segunda vida, donde el cuerpo fenomenológico sufre una transición o resurrección es recurrente en la tradición antigua, la religión y la ciencia ficción. Sin embargo, el lenguaje cada vez más socializado de la criotecnología en los tratamientos de salud y bienestar, recontextualiza el despertar de los no muertos en la esfera biosocial, enmarcando la mortalidad como algo parecido a una enfermedad que puede controlarse o curarse. La criónica pone en tela de juicio los límites del yo soberano [61] y el cuerpo individual, desafiando las definiciones legales de la personalidad. [62] Sin embargo, estos límites no son universales y las ideas que limitan al yo dentro de la dicotomía del dualismo cartesiano se definen a través de la filosofía y el derecho occidentales. Para entender la impronta de la criónica en el cuerpo político [63] es útil aplicar la definición foucaultiana de biopoder . La capacidad de acceder y aprovechar formas de criotecnología (desde el crioalmacenamiento de alimentos, sangre o esperma) está históricamente ligada a la clase, la riqueza y el poder. Es fundamental para la fertilidad, la salud y la muerte y, en este sentido, la criónica es un mecanismo en la estructura de poder de la " cadena de frío " [61] con potencial para producir, preservar y/o restringir la vida.

Desequilibrio de poder

La criopreservación requiere de recursos financieros y médicos sustanciales para su potencial éxito. Por lo tanto, se sugiere que quienes pueden acceder a la criónica deben descender de una riqueza o poder significativos. Esta forma moderna de biopoder se integra en la sociedad como un nuevo método de dictar poder sobre el cuerpo individual o fenomenológico a la hora de determinar los resultados de vida o muerte. Considerando la naturaleza cíclica de la riqueza y el poder en la sociedad ya (sistemáticamente socavada por la raza, el género, la clase y la religión), es probable que el uso de la criónica en el futuro tenga una influencia autoperpetuante en estas estructuras. Por lo tanto, existe un mayor potencial para amplificar los desequilibrios de poder ya existentes, ya que las implicaciones desde una perspectiva legal, financiera y sociocultural contribuirán a sostener la práctica criónica, excluyendo a la mayoría de los miembros de la sociedad para beneficiar a un grupo ya dominante. En última instancia, la criónica refuerza las desigualdades hegemónicas que ya existen en la sociedad actual en las que pocos se beneficiarán y pone en tela de juicio la ambigüedad ética de la autonomía corporal individual en la búsqueda de la autoconservación o la supervivencia. [64] [65] [66] [67]

Cuestiones relativas al cuerpo político

La criopreservación ha sido durante mucho tiempo una cuestión del cuerpo individual contra el cuerpo político . Aquellos que buscan extender su esperanza de vida a pesar de la muerte a través de la preservación sufren de condiciones crónicas, incurables y/o degenerativas, teniendo que superar numerosas legalidades con respecto a la disposición del cuerpo, el almacenamiento de tejido humano, los derechos de los menores y, en algunos casos, el suicidio médicamente asistido [68] [69] En 1993, Thomas Donaldson , que sufría de un tumor cerebral, solicitó una muerte médicamente asistida. [70] Debido al tumor, se le negó y su cuerpo fue criopreservado después de que el tumor hubiera devastado tanto el tejido cerebral circundante que Donaldson falleció. [70] No fue hasta 25 años después, en 2018, que la primera persona, Norman Hardy , fue criopreservada con éxito después de que se le permitiera una muerte médicamente asistida. [70] [71] En 2016, una niña de catorce años ganó el derecho legal a que su cadáver fuera congelado criogénicamente, convirtiéndose en un caso histórico en el Reino Unido. [72] Ese mismo año, Cryonics UK confirmó que su miembro más joven tenía solo 7 años. [73]

Véase también

Referencias

  1. ^ Hunt, Charles J. (2017), Crook, Jeremy M.; Ludwig, Tenneille E. (eds.), "Crioconservación: vitrificación y enfriamiento a velocidad controlada", Bancos de células madre: conceptos y protocolos , Methods in Molecular Biology, vol. 1590, Nueva York, NY: Springer, págs. 41–77, doi :10.1007/978-1-4939-6921-0_5, ISBN 978-1-4939-6921-0, PMID  28353262 , consultado el 8 de enero de 2023
  2. ^ "Agente crioprotector: descripción general | Temas de ScienceDirect" www.sciencedirect.com . Consultado el 8 de enero de 2023 .
  3. ^ "¿Cómo sobreviven los árboles al invierno?". www.nationalforests.org . Consultado el 8 de enero de 2023 .
  4. ^ Cavender-Bares, Jeannine (1 de enero de 2005), Holbrook, N. Michele; Zwieniecki, Maciej A. (eds.), "19 - Impactos de la congelación en el transporte a larga distancia en plantas leñosas", Transporte vascular en plantas , Ecología fisiológica, Burlington: Academic Press, págs. 401–424, doi :10.1016/b978-012088457-5/50021-6, ISBN 978-0-12-088457-5, consultado el 8 de enero de 2023
  5. ^ "La sangre anticongelante permite que las ranas se congelen y descongelen con los caprichos del invierno". Animales . 20 de febrero de 2007. Archivado desde el original el 2 de marzo de 2021 . Consultado el 8 de enero de 2023 .
  6. ^ Mayer-Grenu, rea; Stuttgart, Universidad de. "Cómo sobreviven los tardígrados a temperaturas gélidas". phys.org . Consultado el 8 de enero de 2023 .
  7. ^ ab Costanzo JP, Lee RE, Wright MF (diciembre de 1991). "La carga de glucosa previene las lesiones por congelación en ranas de bosque enfriadas rápidamente" (PDF) . The American Journal of Physiology . 261 (6 Pt 2): R1549–53. doi :10.1152/ajpregu.1991.261.6.R1549. PMID  1750578.
  8. ^ Lovelock JE (marzo de 1953). "La hemólisis de los glóbulos rojos humanos por congelación y descongelación". Biochimica et Biophysica Acta . 10 (3): 414–26. doi :10.1016/0006-3002(53)90273-X. PMID  13058999.
  9. ^ Fuller BJ, Lane N, Benson EE, eds. (2004). La vida en el estado congelado. CRC Press . p. 7. ISBN 978-0203647073.
  10. ^ Mazur P (mayo de 1970). "Criobiología: la congelación de sistemas biológicos". Science . 168 (3934): 939–49. Bibcode :1970Sci...168..939M. doi :10.1126/science.168.3934.939. PMID  5462399.
  11. ^ "El caso criobiológico de la criónica" (PDF) . Criónica . Vol. 9, no. 3. Alcor Life Extension Foundation . Marzo de 1988. p. 27. Número 92. Archivado desde el original (PDF) el 2020-04-17 . Consultado el 2018-10-03 .
  12. ^ "Se ha demostrado que la paternidad después de la muerte es posible". Cedar Rapids Gazette . 9 de abril de 1954.
  13. ^ Polge C (diciembre de 1957). "Almacenamiento a baja temperatura de espermatozoides de mamíferos". Actas de la Royal Society of London. Serie B, Ciencias Biológicas . 147 (929): 498–508. Bibcode :1957RSPSB.147..498P. doi :10.1098/rspb.1957.0068. PMID  13494462. S2CID  33582102.
  14. ^ Mazur P (julio de 1963). "Estudios sobre suspensiones rápidamente congeladas de células de levadura mediante análisis térmico diferencial y conductimetría". Biophysical Journal . 3 (4): 323–53. Bibcode :1963BpJ.....3..323M. doi :10.1016/S0006-3495(63)86824-1. PMC 1366450 . PMID  13934216. 
  15. ^ "Estimado Dr. Bedford (y aquellos que lo cuidarán después de mí)". Criónica. Julio de 1991. Consultado el 23 de agosto de 2009 .
  16. ^ Perry RM (octubre de 2014). "Fallos de suspensión: lecciones de los primeros tiempos". ALCOR: Life Extension Foundation . Consultado el 29 de agosto de 2018 .
  17. ^ Mazur, P. (1984). "Congelación de células vivas: mecanismos e implicaciones". Revista estadounidense de fisiología. Fisiología celular . 247 (3): C125–C142. doi :10.1152/ajpcell.1984.247.3.C125. PMID  6383068.
  18. ^ Vutyavanich T, Piromlertamorn W, Nunta S (abril de 2010). "Congelación rápida versus congelación lenta programable de espermatozoides humanos". Fertilidad y esterilidad . 93 (6): 1921–8. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.04.076 . PMID  19243759.
  19. ^ "enlace muerto" . Consultado el 26 de julio de 2020 .[ enlace muerto ]
  20. ^ Deller RC, Vatish M, Mitchell DA, Gibson MI (3 de febrero de 2014). "Los polímeros sintéticos permiten la criopreservación celular no vítrea al reducir el crecimiento de cristales de hielo durante la descongelación". Nature Communications . 5 : 3244. Bibcode :2014NatCo...5.3244D. doi : 10.1038/ncomms4244 . PMID  24488146.
  21. ^ Sambu S (25 de junio de 2015). "Un enfoque bayesiano para optimizar los protocolos de criopreservación". PeerJ . 3 : e1039. doi : 10.7717/peerj.1039 . PMC 4485240 . PMID  26131379. 
  22. ^ Thompson M, Nemits M, Ehrhardt R (mayo de 2011). "Crioconservación y descongelación controladas por velocidad de células de mamíferos". Protocol Exchange . doi :10.1038/protex.2011.224.
  23. ^ Rall WF, Fahy GM (14-20 de febrero de 1985). "Crioconservación sin hielo de embriones de ratón a -196 grados C mediante vitrificación". Nature . 313 (6003): 573–5. Bibcode :1985Natur.313..573R. doi :10.1038/313573a0. PMID  3969158. S2CID  4351126.
  24. ^ "Alcor: El origen de nuestro nombre" (PDF) . Alcor Life Extension Foundation. Invierno de 2000. Consultado el 25 de agosto de 2009 .
  25. ^ ab Kuleshova LL, Wang XW, Wu YN, Zhou Y, Yu H (2004). "Vitrificación de hepatocitos encapsulados con tasas de enfriamiento y calentamiento reducidas". Cryo Letters . 25 (4): 241–54. PMID  15375435.
  26. ^ Kuleshova L, Gianaroli L, Magli C, Ferraretti A, Trounson A (diciembre de 1999). "Nacimiento tras vitrificación de una pequeña cantidad de ovocitos humanos: informe de caso". Human Reproduction . 14 (12): 3077–9. doi : 10.1093/humrep/14.12.3077 . PMID  10601099.
  27. ^ Bhat SN, Sharma A, Bhat SV (diciembre de 2005). "Vitrificación y transición vítrea del agua: perspectivas a partir de la ESR con sonda de espín". Physical Review Letters . 95 (23): 235702. arXiv : cond-mat/0409440 . Bibcode :2005PhRvL..95w5702B. doi :10.1103/PhysRevLett.95.235702. PMID  16384318. S2CID  11050312.
  28. ^ Fahy GM, Wowk B, Pagotan R, Chang A, Phan J, Thomson B, Phan L (julio de 2009). "Aspectos físicos y biológicos de la vitrificación renal". Organogénesis . 5 (3): 167–75. doi :10.4161/org.5.3.9974. PMC 2781097 . PMID  20046680. 
  29. ^ Chamberlain, Fred (invierno de 2000). "Un tributo a FM-2030" (PDF) . Cryonics . 21 (4): 11. Archivado (PDF) desde el original el 19 de noviembre de 2010. Consultado el 25 de agosto de 2009 .
  30. ^ Geddes L (11 de septiembre de 2013). "Un corazón de vidrio podría ser la clave para almacenar órganos". New Scientist .
  31. ^ Flynn M (10 de octubre de 2018). "Corazón de hielo". Revista BOSS .
  32. ^ US 9314015, Van Sickle, Stephen & Jones, Tanya, "Método y aparato para la prevención de fracturamiento termomecánico en tejido vitrificado utilizando enfriamiento rápido y calentamiento por persuflación", publicado el 19 de abril de 2016, asignado a Arigos Biomedical Inc. 
  33. ^ Suszynski TM, Rizzari MD, Scott WE, Tempelman LA, Taylor MJ, Papas KK (junio de 2012). "Persuflación (o perfusión de oxígeno gaseoso) como método de preservación de órganos". Criobiología . 64 (3): 125–43. doi :10.1016/j.cryobiol.2012.01.007. PMC 3519283 . PMID  22301419. 
  34. ^ Lee JY, Lee JE, Kim DK, Yoon TK, Chung HM, Lee DR (febrero de 2010). "Alta concentración de suero sintético, equilibrio gradual y enfriamiento lento como técnica eficiente para la criopreservación a gran escala de células madre embrionarias humanas". Fertilidad y esterilidad . 93 (3): 976–85. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.017 . PMID  19022437.
  35. ^ Fischer, Barbara. "Crioconservación: lo que necesita saber sobre la congelación criogénica". www.susupport.com . Consultado el 3 de agosto de 2022 .
  36. ^ Panis B, Nagel M, Van den Houwe I (noviembre de 2020). "Desafíos y perspectivas para la conservación de los recursos genéticos de los cultivos en bancos de genes de campo, en colecciones in vitro y/o en nitrógeno líquido". Plantas . 9 (12): 1634. doi : 10.3390/plants9121634 . PMC 7761154 . PMID  33255385. 
  37. ^ Malek Zadeh S (2009). "Crioconservación del meristemo axial de Crocus sativus L." Criobiología . 59 (3): 412. doi :10.1016/j.cryobiol.2009.10.163.
  38. ^ Mikuła A., Chmielarz P., Hazubska-Przybył T., Kulus D., Maślanka M., Pawłowska B., Zimnoch-Guzowska E., 2022. Criopreservación de tejidos vegetales en Polonia: contribuciones a la investigación, estado actual y aplicaciones . Acta Societatis Botanicorum Poloniae 91: 9132 https://doi.org/10.5586/asbp.9132
  39. ^ New York Times > Nace una niña en Tennessee a partir de un embrión congelado durante 27 años. 3 de diciembre de 2020.
  40. ^ "Genetics & IVF Institute". Givf.com. Archivado desde el original el 6 de diciembre de 2012. Consultado el 27 de julio de 2009 .
  41. ^ abc Riggs R, Mayer J, Dowling-Lacey D, Chi TF, Jones E, Oehninger S (enero de 2010). "¿El tiempo de almacenamiento influye en la supervivencia posdescongelación y el resultado del embarazo? Un análisis de 11.768 embriones humanos criopreservados". Fertilidad y esterilidad . 93 (1): 109–15. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.09.084 . PMID  19027110.
  42. ^ Isachenko V, Lapidus I, Isachenko E, Krivokharchenko A, Kreienberg R, Woriedh M, et al. (agosto de 2009). "Vitrificación de tejido ovárico humano versus congelación convencional: evaluación morfológica, endocrinológica y biológica molecular". Reproducción . 138 (2): 319–27. doi : 10.1530/REP-09-0039 . PMID  19439559.
  43. ^ ab Oktay K, Oktem O (febrero de 2010). "Crioconservación y trasplante de ovarios para la preservación de la fertilidad en indicaciones médicas: informe de una experiencia en curso". Fertilidad y esterilidad . 93 (3): 762–8. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.006 . PMID  19013568.
  44. ^ Nacimiento vivo después de trasplante ortotópico de tejido ovárico criopreservado [ enlace muerto permanente ‍ ] The Lancet, 24 de septiembre de 2004
  45. ^ Lan C, Xiao W, Xiao-Hui D, Chun-Yan H, Hong-Ling Y (febrero de 2010). "Cultivo de tejidos antes del trasplante de tejido ovárico fetal humano congelado-descongelado en ratones inmunodeficientes". Fertilidad y esterilidad . 93 (3): 913–9. doi : 10.1016/j.fertnstert.2008.10.020 . PMID  19108826.
  46. ^ Glujovsky D, Riestra B, Sueldo C, Fiszbajn G, Repping S, Nodar F, Papier S, Ciapponi A (2014). "Vitrificación versus congelación lenta para mujeres sometidas a criopreservación de ovocitos". Base de datos Cochrane de revisiones sistemáticas (9): CD010047. doi :10.1002/14651858.CD010047.pub2. PMC 11246547. PMID 25192224  . 
  47. ^ NOTICIAS y comunicados de prensa de Planer > Nace un niño tras 22 años de almacenamiento de semen en un congelador de velocidad controlada de Planer Archivado el 8 de septiembre de 2012 en archive.today 14/10/2004
  48. ^ Wyns C, Curaba M, Vanabelle B, Van Langendonckt A, Donnez J (2010). "Opciones para la preservación de la fertilidad en niños prepúberes". Human Reproduction Update . 16 (3): 312–28. doi : 10.1093/humupd/dmp054 . PMID  20047952.
  49. ^ Schulte J, Reski R (2004). "Crioconservación de alto rendimiento de 140.000 mutantes de Physcomitrella patens". Biología vegetal . 6 (2). Biotecnología vegetal, Universidad de Friburgo, Friburgo, Alemania: 119–27. Bibcode :2004PlBio...6..119S. doi :10.1055/s-2004-817796. PMID  15045662. S2CID  260252544.
  50. ^ "Musgos congelados". ScienceDaily .
  51. ^ François M, Copland IB, Yuan S, Romieu-Mourez R, Waller EK, Galipeau J (febrero de 2012). "Las células estromales mesenquimales criopreservadas muestran propiedades inmunosupresoras deterioradas como resultado de la respuesta al choque térmico y la autorización de interferón-γ deteriorada". Citoterapia . 14 (2): 147–52. doi :10.3109/14653249.2011.623691. PMC 3279133 . PMID  22029655. 
  52. ^ Roque-Borda CA, Kulus D., Vacaro de Souza A., Kaviani B., Vicente EF 2021. Criopreservación de germoplasma vegetal agronómico mediante métodos basados ​​en la vitrificación: una descripción general de estudios de casos seleccionados. Revista Internacional de Ciencias Moleculares 22(11): 6157. https://doi.org/10.3390/ijms22116157
  53. ^ Lee, Chung-Hao (2016). Criopreservación de semillas de nenúfar azul (Nymphaea caerulea) utilizando glutatión añadiendo solución de vitrificación vegetal, PVS+ / 埃及藍睡蓮種子的冷凍保存 —使用添加穀胱甘肽的植物抗凍配方(PDF) . Universidad Nacional Tsing Hua. OCLC  1009363362.
  54. ^ Weisberger M (2018). "Gusanos congelados durante 42.000 años en el permafrost siberiano retorciéndose para cobrar vida". Live Science .
  55. ^ Shatilovich AV, Tchesunov AV, Neretina TV, Grabarnik IP, Gubin SV, Vishnivetskaya TA, Onstott TC, Rivkina EM (mayo de 2018). "Nematodos viables del permafrost del Pleistoceno tardío de las tierras bajas del río Kolyma". Ciencias Biológicas Doklady . 480 (1): 100–102. doi :10.1134/S0012496618030079. PMID  30009350. S2CID  49743808.
  56. ^ "Copia archivada" (PDF) . Archivado desde el original (PDF) el 17 de mayo de 2014. Consultado el 15 de mayo de 2014 .{{cite web}}: CS1 maint: copia archivada como título ( enlace )
  57. ^ ab Vitt, Laurie J.; Caldwell, Janalee P. (2014). Herpetología: una introducción a la biología de anfibios y reptiles (4ª ed.). Ámsterdam. ISBN 978-0-12-386919-7. OCLC  839312807.{{cite book}}: Mantenimiento de CS1: falta la ubicación del editor ( enlace )
  58. ^ Liofilización y criopreservación de bacterias
  59. ^ "Addgene: Protocolo - Cómo crear una reserva de glicerol bacteriano". Addgene.org . Consultado el 9 de septiembre de 2015 .
  60. ^ "Crecimiento de cultivos bacterianos". Archivado desde el original el 7 de septiembre de 2013. Consultado el 15 de mayo de 2014 .
  61. ^ ab Friedrich, E 2017, 'El auge del criopoder: biopolítica en la era de la vida criogénica', en EK Joanna Radin (ed.), Criopolítica: vida congelada en un mundo que se derrite, The MIT Press, Cambridge, Massachusetts, págs. 59-66.
  62. ^ Falconer, K 2023, 'Criopreservación y muerte de la personalidad jurídica', Mortalidad: Promoción del estudio interdisciplinario de la muerte y el morir, págs. 1-16.
  63. ^ Nancy Scheper-Hughes, MML 1987, 'El cuerpo consciente: un prolegómeno para el trabajo futuro en antropología médica', Medical Anthropology Quarterly, vol. 1, no. 1, págs. 6-41.
  64. ^ Foucault, M. Rabinow, P. 1991, 'Derecho a la muerte y poder sobre la vida', El lector de Foucault, Penguin Books, pp 258-272.
  65. ^ Perry, RM. 2014, 'Fallos de suspensión: lecciones de los primeros años', Cryonics Archive, For The Record, consultado el 19 de agosto de 2024 > https://www.cryonicsarchive.org/library/suspension-failures-lessons-from-the-early-years/
  66. ^ Scheper-Hughes, N. Lock MM. 1987, 'El cuerpo consciente: un prolegómeno para el trabajo futuro en antropología médica', Medical Anthropology Quarterly, vol 1, no. 1, pp 6-41.
  67. ^ Umeh, GF. 2024, 'Cryonics y la dignidad de la vida humana: un enfoque ético', Nnadiebube Journal of Languages ​​and Literature, vol 2, no. 2, pp 28-40.
  68. ^ Dein, S. (2022). Criónica: ciencia o religión. Revista de religión y salud, 61(4), 3164–3176. https://doi.org/10.1007/s10943-020-01166-6
  69. ^ Stan, O, A. (2016). Suspensión criónica: debate sobre la finitud de la vida, extensión del capital temporal y cancelación de la muerte. Revista de investigación comparada en antropología y sociología, 7(2), 71–91.
  70. ^ abc Cohen, J. (2020). Cuerpos congelados e imaginarios futuros: muerte asistida, criogenia y una buena muerte. Religiones, 11(11), 584. https://doi.org/10.3390/rel11110584
  71. ^ Romain, T. (2010). Extensión extrema de la vida: inversión en criónica a largo plazo. ANTROPOLOGÍA MÉDICA, 29(2), 194–215. https://doi.org/10.1080/01459741003715391
  72. ^ Conway, H. (2018). Cadáveres congelados y padres en conflicto: Re JS (Disposición del cuerpo) Modern Law Review, 81(1), 132–141. https://doi.org/10.1111/1468-2230.12319
  73. ^ Ungoed-Thomas, J., y Leake, J. (2016). Niño de 7 años inscrito para congelamiento de cuerpo. The Sunday Times, 1.

Lectura adicional