Criomicroscopía electrónica

Se trata de una técnica muy utilizada en biología estructural, pues permite observar directamente (sin tinciones ni fijaciones) estados conformacionales nativos a resolución atómica.

La tomografía crioelectrónica es una versión de la criomicroscopía electrónica en la que se crea una reconstrucción en tres dimensiones a partir de imágenes bidimensionales inclinadas a temperaturas criogénicas.

El material biológico se expande en la rejilla de un microscopio electrónico y se preserva en un estado hidratado-congelado mediante enfriamiento rápido, normalmente en etano líquido a una temperatura próxima a la del nitrógeno líquido.

Los especímenes más gruesos (hasta deceneas de μm) se vitrifican mediante enfriamiento rápido en etano.

Las secciones se colocan en la rejilla de un microscopio electrónico y son visualizadas del mismo modo que los especímenes vitrificados en película fina.

Imagen de GroEL suspendida en hielo vítreo obtenida por criomicroscopía electrónica.
Receptor de insulina (INS-R). Izquierda Crio Electron Microscopy. Derecha: esquema de reconstrucción 3D, muestra los cuatro sitios de unión al ligando (en rojo).