ELISPOT

El ELISpot (acrónimo del inglés Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay: ‘ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas de puntos’) es un método común utilizado para monitorizar la respuesta inmune de seres humanos y animales.

Esto hace a los ensayos ELISPOT mucho más sensibles que los convencionales ELISA.

A continuación se lava nuevamente la placa para remover todo el anticuerpo marcado que no se haya unido y finalmente se añade un conjugado de avidina - HRP y el sustrato de reacción, usualmente BCIP o cloruro de nitroblue tetrazolium (NBT).

La avidina se une con altísima afinidad a la biotina de los anticuerpos marcadores y la enzima unida a la avidina reacciona con peróxido de hidrógeno provocando la precipitación del sustrato coloreado.

El producto final, usualmente un punto de color negro azulado, marca el lugar donde se encontraba una célula productora.