Charlotte Witthauer debutó en los escenarios en 1932 en el Stadttheater de Oberhausen, donde recibió un contrato permanente.

En los siguientes años hizo papeles de reparto en producciones como Feuerwerk (1954, junto a Lilli Palmer) o en Morgen fällt die Schule aus (1971) y Betragen ungenügend!

En 1949 actuó en la radio junto a Heinz Rühmann, Elfriede Kuzmany y Grethe Weiser en la comedia Du kannst mir viel erzählen.

En ambas emisiones actuó con Hans Christian Blech, Elfriede Irrall y Almut Eggert.

Había estado casada con el actor Hans Quest desde 1940 hasta 1968, fecha en la que se divorciaron.