El dúo "Sul suo capo aggravi un Dio" entre Ana (soprano) y Juana Seymour (mezzosoprano) está considerado uno de los mejores de todo el repertorio operístico.
Los principales papeles femeninos de las óperas Ana Bolena, María Estuardo, y Roberto Devereux son a menudo conocidos como las "Tres Reinas de Donizetti."
Ana Bolena no se representó con frecuencia hasta después de la Segunda Guerra Mundial.
El reparto incluía a Sara Scuderi como Ana, Giulietta Simionato como Juana Seymour y Cesare Siepi como Enrique VIII.
Otras intérpretes que destacaron en el papel de Anna han sido Leyla Gencer, Montserrat Caballé, Renata Scotto, Edita Gruberová, Mariella Devia y Anna Netrebko.
Nadie más lo oye, y ella se dice que las cenizas de su primer amor aún arden, y que ella ahora es infeliz en su vano esplendor.
Rochefort le contesta que el amor nunca se ve satisfecho.
Percy se agita ante la perspectiva de ver a Ana, quien fue su primer amor.
Entra Percy, y dice que ve a Ana infeliz.
Él saca su espada para matarse, y Ana grita.
Smeton dice que no es cierto y se abre la túnica para ofrecer el pecho al rey si está mintiendo.
Ana contesta que no comprará su vida a cambio de la infamia.
Escena 2: Antecámara que lleva al salón donde el Consejo de los Pares está reunido Hervey dice a los cortesanos que Ana está perdida, porque Smeton ha hablado, revelando su crimen.
Enrique VIII dice que ella no salvará a Ana si se marcha.
Escena 3: Torre de Londres Percy y Rochefort están juntos en una celda.
En su delirio, Ana le pregunta por qué no toca su laúd.
Ana dice que no invocará la venganza sobre la perversa pareja.
Smeton, Percy y Rochefort dicen que la víctima ya ha sido sacrificada.
Hay una grabación histórica según La discoteca ideal de la ópera, de Roger Alier y otros,[8] la dirigida por Gianandrea Gavazzeni (1957, grabación en vivo), con Maria Callas (Anna Bolena), Nicola Rossi-Lemeni (Enrico), Giulietta Simionato (Giovanna), Gianni Raimondi (Percy), Plinio Clabassi (Rochefort), Gabriella Carturan (Smeton) y Luigi Rumbo (Hervey).