Las laminas , también conocidas como láminas nucleares , son proteínas fibrosas en filamentos intermedios de tipo V , que proporcionan función estructural y regulación transcripcional en el núcleo celular . Las láminas nucleares interactúan con las proteínas de la membrana nuclear interna para formar la lámina nuclear en el interior de la envoltura nuclear . Las laminas tienen propiedades elásticas y mecanosensibles y pueden alterar la regulación genética en una respuesta de retroalimentación a señales mecánicas. [1] Las laminas están presentes en todos los animales pero no se encuentran en microorganismos , plantas u hongos . [2] [3] Las proteínas laminas participan en el desmontaje y reformado de la envoltura nuclear durante la mitosis , el posicionamiento de los poros nucleares y la muerte celular programada . Las mutaciones en los genes laminosos pueden provocar varias laminopatías genéticas , que pueden poner en peligro la vida.
Las láminas se identificaron por primera vez en el núcleo celular mediante microscopía electrónica . Sin embargo, no fueron reconocidos como componentes vitales del soporte estructural nuclear hasta 1975. [4] Durante este período, las investigaciones de los núcleos del hígado de rata revelaron que las láminas tienen una relación arquitectónica con la cromatina y los poros nucleares. [5] Más tarde, en 1978, las técnicas de inmunomarcaje revelaron que las láminas se localizan en la envoltura nuclear debajo de la membrana nuclear interna. No fue hasta 1986 que un análisis de clones de ADNc de láminas en una variedad de especies confirmó que las láminas pertenecen a la familia de proteínas de filamento intermedio (IF). [4] Investigaciones adicionales encontraron evidencia que respalda que todas las proteínas IF surgieron de un ancestro común similar a una lámina. Esta teoría se basa en la observación de que los organismos que contienen proteínas IF necesariamente también contienen láminas; sin embargo, la presencia de láminas no es un requisito para contener simultáneamente proteínas IF. Además, las comparaciones de secuencias entre láminas y proteínas IF respaldan que en las formas tempranas de proteínas IF se encuentra una secuencia de aminoácidos característica de las láminas. Esta secuencia se pierde en formas posteriores de proteínas IF, lo que sugiere que la estructura de los filamentos intermedios posteriores divergió. [6] [7] Después de esta investigación, las investigaciones sobre láminas se desaceleraron. Los estudios de las laminas se hicieron más populares en la década de 1990 cuando se descubrió que las mutaciones en los genes que codifican las laminas pueden estar relacionadas con distrofias musculares, miocardiopatías y neuropatías. [8] [9] Se están realizando investigaciones actuales para desarrollar métodos de tratamiento para las laminopatías antes mencionadas e investigar el papel que desempeñan las láminas en el proceso de envejecimiento.
La estructura de las láminas se compone de tres unidades que son comunes entre los filamentos intermedios: un dominio de varilla helicoidal α central que contiene repeticiones de heptada rodeadas por dominios globulares N y C-terminales. El terminal N es más corto y está ubicado en la parte superior (cabeza), mientras que el terminal C es más largo y está ubicado en el extremo (cola). [2] [10] Las laminas tienen una estructura única de repeticiones de heptada que es de naturaleza continua y contiene seis heptadas adicionales. [11] Si bien el dominio de la cabeza de las láminas es bastante consistente, la composición del dominio de la cola varía según el tipo de lámina. Sin embargo, todos los dominios C-terminales contienen una secuencia de localización nuclear (NLS). Al igual que otras proteínas IF, las láminas se autoensamblan en estructuras más complejas. La unidad básica de estas estructuras es un dímero en espiral. Los dímeros se organizan de cabeza a cola, lo que permite la formación de un protofilamento. A medida que estos protofilamentos se agregan, forman filamentos laminares. Las láminas de organismos de nivel superior, como los vertebrados, continúan ensamblando formaciones paracristalinas. [2] Estas estructuras complejas permiten que las láminas nucleares realicen sus funciones especializadas en el mantenimiento de la forma del núcleo, así como funciones durante la mitosis y la apoptosis.
Las láminas se dividen en dos categorías principales: tipos A y B. Estas subdivisiones se basan en similitudes en secuencias de ADNc, características estructurales, puntos isoeléctricos y tendencias de expresión. [2] [5]
Las láminas de tipo A se caracterizan por un punto isoeléctrico neutro y normalmente se muestran durante las últimas etapas del desarrollo embrionario. Expresadas en células diferenciadas, las láminas de tipo A se originan a partir del gen LMNA . [12] Se pueden crear dos isoformas, las láminas A y C, a partir de este gen mediante empalme alternativo . Esto crea una gran cantidad de homología entre las isoformas. [4] A diferencia de la lamina C, la lamina A se genera en una forma precursora llamada prelamina A. La prelamina A y la lamina C difieren en estructura solo en el extremo carboxilo. Aquí, la prelamina A contiene dos exones adicionales de los que carece la lamina C. Además, la lamina C contiene seis residuos de aminoácidos únicos, mientras que la prelamina A contiene noventa y ocho residuos que no se encuentran en la otra isoforma. [9] Se encuentra un motivo CaaX dentro de los residuos únicos en la prelamina A. Debido a la presencia del motivo CaaX, la prelamina A sufre una serie de modificaciones postraduccionales para convertirse en lamina A madura. Estos pasos incluyen la farnesilación de la cisteína carboxilo terminal, liberación endoproteolítica de los aminoácidos terminales, carboximetalación de la farnesilcisteína accesible y eliminación de los quince residuos finales mediante una metaloproteasa de zinc. La primera modificación que implica la farnesilación de la prelamina A es crucial para el desarrollo de la lamina A madura. La isoforma lamina C no sufre modificaciones postraduccionales. [9] [13] Algunos estudios han demostrado que las láminas A y C no son necesarias para la formación de la lámina nuclear; sin embargo, las alteraciones en el gen LMNA pueden contribuir a limitaciones físicas y mentales. [14]
Las láminas de tipo B se caracterizan por un punto isoeléctrico ácido y normalmente se expresan en cada célula. [12] [15] Al igual que con las láminas de tipo A, existen múltiples isoformas de láminas de tipo B, siendo las más comunes la lamina B1 y la lamina B2 . Se producen a partir de dos genes distintos, LMNB1 y LMNB2 . [9] Al igual que la prelamina A, las láminas de tipo B también contienen un motivo CaaX en el extremo carboxilo terminal. Este marcador desencadena la misma secuencia de modificaciones postraduccionales descritas previamente para la prelamina A, excepto por el paso de escisión final que involucra una metaloproteasa de zinc. [9] [13] Investigaciones adicionales de láminas de tipo B en múltiples especies han encontrado evidencia que respalda que las láminas de tipo B existieron antes que las láminas de tipo A. Esto se debe a la similitud en la estructura de las láminas de tipo B entre invertebrados y vertebrados. Además, los organismos que solo contienen una lámina contienen una lámina de tipo B. [6] Otros estudios que han investigado las similitudes y diferencias estructurales entre las láminas de tipo A y B han encontrado que las posiciones de los intrones/exones en las láminas de tipo B se han conservado en las láminas de tipo A, con más variaciones en las láminas de tipo A. -laminas tipo. Esto sugiere que el ancestro común de estos tipos de láminas fue una lámina de tipo B.
Debido a sus propiedades como tipo de proteína IF, las láminas brindan apoyo para mantener la forma del núcleo. También desempeñan un papel indirecto en el anclaje del núcleo al retículo endoplasmático , formando una unidad continua dentro de la célula. Esto se logra mediante la conexión de la lámina y las proteínas que interactúan con la lámina (SUN1/SUN2) con proteínas en la membrana nuclear externa. Estas proteínas a su vez interactúan con elementos citoesqueléticos del retículo endoplásmico , formando un complejo fuerte que puede resistir el estrés mecánico. [6] Los núcleos que carecen de láminas o tienen versiones mutadas tienen una forma deformada y no funcionan correctamente. [2]
Durante la mitosis, las láminas son fosforiladas por el factor promotor de la mitosis (MPF), que impulsa el desmontaje de la lámina y la envoltura nuclear. Esto permite que la cromatina se condense y el ADN se replique. Después de la segregación cromosómica, la desfosforilación de las láminas nucleares por una fosfatasa promueve el reensamblaje de la envoltura nuclear.
La apoptosis es un proceso altamente organizado de muerte celular programada. Las laminas son objetivos cruciales para este proceso debido a sus estrechas asociaciones con la cromatina y la envoltura nuclear. Las enzimas apoptóticas llamadas caspasas se dirigen a las láminas y escinden los tipos A y B. [15] Esto permite que la cromatina se separe de la lámina nuclear para condensarse. A medida que continúa la apoptosis, las estructuras celulares se reducen lentamente hasta convertirse en "ampollas" compartimentadas. Finalmente, estos cuerpos apoptóticos son digeridos por los fagocitos . [3] Los estudios de apoptosis que involucran láminas mutantes de tipo A y B que son resistentes a la escisión por caspasas muestran una disminución de la condensación del ADN y la formación de "ampollas" apoptóticas, lo que subraya el importante papel de las láminas en la apoptosis. [10]
Las mutaciones en el gen LMNA, que codifica las láminas A y C, pueden producir una serie de trastornos que van desde distrofias musculares , neuropatías , miocardiopatías y síndromes de envejecimiento prematuro . En conjunto, estas afecciones se conocen como laminopatías .
Una laminopatía específica es el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford (HGPS), caracterizado por envejecimiento prematuro. Los afectados por esta afección parecen normales al nacer, pero muestran signos de envejecimiento prematuro, como pérdida de cabello, delgadez, anomalías en las articulaciones y habilidades motoras débiles a medida que se desarrollan. Además, los problemas de salud que suelen observarse en las personas mayores, como la aterosclerosis y la hipertensión arterial, se producen a una edad mucho más temprana. Las personas con HGPS generalmente mueren al comienzo de la adolescencia, generalmente después de un ataque cardíaco o un derrame cerebral. [3] [16]
El HGPS es causado por una mutación puntual en el gen LMNA que codifica la lámina A. La alteración genética da como resultado un empalme alternativo, creando una forma mutada de prelamina A que es mucho más corta y carece del sitio de escisión para una metaloproteasa de zinc. Debido a que la prelamina A no puede procesarse adecuadamente durante las modificaciones postraduccionales , conserva su modificación lipídica (farnesilación) y permanece en la membrana nuclear interna. Esto altera la estabilidad mecánica del núcleo, lo que resulta en una mayor tasa de muerte celular y, por tanto, una mayor tasa de envejecimiento. [3] Los estudios actuales están investigando los efectos de los inhibidores de farnesil-transferasa (FTI) para ver si la unión de farnesilo se puede inhibir durante la modificación postraduccional de la prelamina A para tratar a pacientes con HGPS. [8]
Algunas laminopatías afectan el músculo cardíaco . Estas mutaciones causan un espectro de enfermedades cardíacas que van desde ningún efecto aparente hasta una miocardiopatía dilatada grave que conduce a insuficiencia cardíaca . Las laminopatías frecuentemente causan problemas del ritmo cardíaco en una etapa temprana del proceso de la enfermedad, incluidos ritmos cardíacos anormalmente lentos, como disfunción del nódulo sinusal y bloqueo auriculoventricular , y ritmos cardíacos anormalmente rápidos, como la taquicardia ventricular . Como resultado, quienes padecen enfermedades cardíacas con Lamin A/C suelen recibir tratamiento con marcapasos o desfibriladores implantables además de medicamentos. [17]