Las hemaglutininas reconocen glicoconjugados de la superficie celular que contienen ácido siálico en la superficie de los glóbulos rojos del huésped con baja afinidad y los utilizan para ingresar al endosoma de las células del huésped. [4] En el endosoma, las hemaglutininas se activan a un pH de 5 a 6,5 para sufrir cambios conformacionales que permiten la unión viral a través de un péptido de fusión . [5]
Las hemaglutininas son pequeñas proteínas que se proyectan desde la superficie de la membrana del virus como puntas de 135 angstrom (Å) de largo con un diámetro de 30-50 Å. [12] Cada pico está formado por tres subunidades de monómero idénticas, lo que convierte a la proteína en un homotrímero . Estos monómeros están formados por dos glicopéptidos , HA1 y HA2, y unidos por dos polipéptidos disulfuro , incluido el HA1 distal a la membrana y el HA2 más pequeño, proximal a la membrana. Se utilizaron cristalografía de rayos X y espectroscopia para identificar que la mayoría de las estructuras proteicas están formadas por proteínas α-helicoidales . [13] Además de la estructura central homotrimérica, las hemaglutininas tienen cuatro subdominios: el subdominio R de unión al receptor distal de membrana, el dominio vestigial E, que funciona como una esterasa destructora de receptores , el dominio de fusión F y el subdominio de anclaje de membrana M. El subdominio de anclaje a la membrana forma cadenas proteicas elásticas que unen la hemaglutinina al ectodominio. [14]
Usos en serología
Ensayo de inhibición de la hemaglutinación : [15] Un ensayo serológico que se puede utilizar para detectar anticuerpos utilizando glóbulos rojos con antígenos de superficie conocidoso para identificar antígenos de superficie de glóbulos rojos, como virus o bacterias, utilizando un panel de anticuerpos conocidos. Este método, realizado por primera vez por George K. Hirst en 1942, consiste en mezclar muestras de virus con diluciones de suero para que los anticuerpos se unan al virus antes de que se agreguen los glóbulos rojos a la mezcla. En consecuencia, los virus unidos a anticuerpos no pueden unirse a los glóbulos rojos, lo que significa quese ha inhibido el resultado positivo de una prueba debido a la hemaglutinación . Por el contrario, si se produce hemaglutinación, la prueba resultará negativa.
Un diagrama esquemático de la configuración experimental para detectar hemaglutinación para el tipaje sanguíneo.
Detección de tipaje sanguíneo por hemaglutinación : [16] Este método consiste en medir tanto el espectro de reflectancia de la sangre sola (no aglutinación) como el de la sangre mezclada con reactivos de anticuerpos (aglutinación) utilizando un sensor en modo guía de ondas. Como resultado, se observan algunas diferencias en la reflectancia entre las muestras. Una vez añadidos los anticuerpos, también se pueden determinar los tipos de sangre y el tipo Rh(D) gracias al sensor en modo guía de ondas. Esta técnica es capaz de detectar aglutinaciones débiles, que son casi imposibles de detectar con el ojo humano.
Determinación del grupo sanguíneo ABO : utilizando anticuerpos anti-A y anti-B que se unen específicamente a los antígenos de superficie del grupo sanguíneo A o Ben los glóbulos rojos , es posible analizar una pequeña muestra de sangre y determinar el grupo sanguíneo ABO (o tipo de sangre) de un individuo. No identifica elantígeno Rh(D) (tipo de sangre Rh).
El método de clasificación sanguínea con tarjeta de cabecera se basa en la aglutinación visual para determinar el grupo sanguíneo de un individuo. La tarjeta contiene reactivos de anticuerpos del grupo sanguíneo secos fijados en su superficie. Se coloca una gota de sangre del individuo en cada área de grupo sanguíneo de la tarjeta. La presencia o ausencia de floculación (aglutinación visual) permite un método rápido y conveniente para determinar el estado ABO y Rhesus del individuo. Como esta técnica depende del ojo humano, es menos fiable que la tipificación sanguínea basada en sensores en modo guía de ondas.
En el caso de los glóbulos rojos, las células transformadas se conocen como kodecitos . La tecnología Kode expone antígenos exógenos en la superficie de las células, lo que permite detectar respuestas anticuerpo-antígeno mediante la prueba de hemaglutinación tradicional. [18]
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enlaces externos
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