stringtranslate.com

Almacenamiento de esperma femenino

Órganos de almacenamiento de esperma en la mosca de la fruta Drosophila melanogaster . La hembra se apareó primero con el macho GFP y luego se apareó nuevamente con el macho RFP.

El almacenamiento de esperma femenino es un proceso biológico y, a menudo, un tipo de selección sexual en el que los espermatozoides transferidos a una hembra durante el apareamiento se retienen temporalmente dentro de una parte específica del tracto reproductivo antes de que el ovocito u óvulo sea fertilizado. Este proceso tiene lugar en algunas especies de animales. El sitio de almacenamiento es variable entre los diferentes taxones animales y varía desde estructuras que parecen funcionar únicamente para la retención de esperma, como la espermateca de los insectos [1] y los túbulos de almacenamiento de esperma de las aves ( anatomía de las aves ), [2] [3] hasta regiones más generales del tracto reproductivo enriquecidas con receptores a los que se asocian los espermatozoides antes de la fertilización, como la porción caudal del oviducto de la vaca que contiene anexinas que asocian los espermatozoides . [4] El almacenamiento de esperma femenino es una etapa integral en el proceso reproductivo de muchos animales con fertilización interna. Tiene varias funciones biológicas documentadas, entre ellas:

Mayor diversidad de crías

Una ventaja importante de los insectos hembra que almacenan la ganancia de esperma es una mayor diversidad genética en su descendencia. Hay muchas formas en que las hembras pueden alterar la genética de la descendencia para aumentar su éxito y diversidad. Un ejemplo de cómo se puede lograr esto es en las hembras de Scathophaga que fertilizan preferentemente los huevos para sobrevivir en diferentes entornos. Dado que muchos entornos requieren diferentes rasgos para el éxito, las hembras de alguna manera pueden combinar espermatozoides (adquiridos de múltiples parejas) que tienen los mejores genes para cualquier entorno en el que se desarrollarán. [20] Muchas de las diferentes propiedades del entorno, incluida la temperatura y las propiedades térmicas, afectan la elección de esperma de la hembra. [21] Los estudios también han demostrado que la oviposición no es aleatoria y las hembras ponen huevos con diferentes genotipos de PGM ( fosfoglucomutasa ) en diferentes entornos para optimizar el éxito de la descendencia. Las hembras son muy conscientes de su entorno y manipulan la diversidad genética de su descendencia de formas apropiadas para asegurar su éxito.

Otra forma en que las hembras que almacenan esperma pueden alterar la diversidad de su descendencia es controlando el parentesco con los machos que les proporcionan esperma. La depresión endogámica puede tener un impacto perjudicial en las poblaciones de organismos y se debe al apareamiento de individuos estrechamente relacionados. Para combatir este efecto, los insectos hembra parecen ser capaces de separar el esperma de los parientes del esperma de los no parientes para elegir la mejor opción para fertilizar sus óvulos. Los grillos hembras pueden almacenar preferentemente el esperma de varios machos no emparentados en lugar del de sus hermanos; esto da como resultado que más de la descendencia tenga ascendencia no emparentada. Poder elegir entre los espermatozoides después de la cópula podría ser ventajoso para las hembras porque elegir entre parejas antes de la cópula puede ser más costoso, o puede ser demasiado difícil distinguir a los machos antes del apareamiento. [22] Las hembras poseen habilidades notables para seleccionar el esperma para almacenar y para fertilizar sus óvulos, lo que hará que su descendencia sea diversa. Aunque se ha demostrado que la mayoría de las especies de insectos hembras pueden almacenar esperma, algunos ejemplos específicos que se han estudiado incluyen los grillos de campo, [22] las moscas del estiércol [21] y las moscas de la fruta mediterráneas. [23] Las hembras se benefician en gran medida de este mecanismo, pero los machos a menudo pueden experimentar una baja aptitud física porque su paternidad no está segura.

El esperma almacenado suele determinar qué macho acaba fertilizando la mayor cantidad de óvulos. Un ejemplo de esto se observa en los escarabajos rojos de la harina , donde la mayor parte del esperma se almacena en el primer apareamiento. Otro macho puede extraer el esperma almacenado previamente para tener más posibilidades de apareamiento exitoso.

Coevolución antagónica

Los genitales espinosos, como los de este gorgojo del frijol , pueden ayudar a extraer esperma de las estructuras de almacenamiento de esperma.

La coevolución antagónica es la relación entre machos y hembras donde la morfología sexual cambia con el tiempo para cambiar con los rasgos sexuales del sexo opuesto con el fin de lograr el máximo éxito reproductivo. [24] Uno de estos desarrollos son los sitios alternativos de almacenamiento de esperma, como los receptáculos seminales, las espermatecas y las pseudoespermatecas, que son complejos y extremadamente variables para permitir una mayor elección en la selección de espermatozoides. [25] En algunos casos, los sitios de almacenamiento de esperma pueden producir proteasas que descomponen varias proteínas en el líquido seminal masculino, lo que resulta en la selección femenina en los espermatozoides. [26]

Al igual que las hembras, los machos han desarrollado respuestas para contrarrestar las adaptaciones evolutivas del sexo opuesto. Las respuestas en los insectos pueden variar tanto en los genitales como en las estructuras de los espermatozoides, junto con variaciones en el comportamiento. Los genitales masculinos espinosos ayudan a anclar al macho a la hembra durante la cópula y eliminan el esperma de los machos anteriores de las estructuras de almacenamiento de las hembras. [27] Los machos también han desarrollado formas alternativas de copular. En el caso de la chinche de cama, los machos inseminan traumáticamente a las hembras, lo que permite un paso más rápido del esperma a los sitios de almacenamiento del esperma femenino. [28] Los espermatozoides son recibidos por el mesospermalegio y finalmente llegan a las espermatecas, también conocidas como conceptáculos seminales .

A nivel microscópico, los machos de Drosophila tienen diferentes longitudes de cola de esperma que corresponden a varios tamaños de receptáculos seminales femeninos. [29] Se ha demostrado que una cola de esperma de macho más larga tiene un mayor éxito reproductivo con un receptáculo seminal femenino más grande, mientras que se ha descubierto que los espermatozoides con colas más cortas tienen más éxito en receptáculos seminales más pequeños.

Elección femenina críptica

La capacidad de almacenar y separar el esperma de varios machos permite a las hembras manipular la paternidad eligiendo qué esperma fertilizará sus óvulos, un proceso conocido como elección críptica femenina. Existe evidencia de esta capacidad en muchos taxones diferentes, incluidos pájaros , reptiles , gasterópodos , arácnidos e insectos . [30] [31] [32] [33] [20] Al combinar el almacenamiento de esperma a largo plazo con el comportamiento poliándrico, los miembros hembras de la familia de tortugas Testudinidae tienen acceso al esperma de una variedad de machos genéticamente diferentes y potencialmente pueden influir en la paternidad de una nidada durante cada evento de fertilización, no solo a través de sus elecciones de apareamiento. Como resultado de nidadas con mayor variación en los genes paternos y una mayor competencia espermática, las hembras pueden maximizar tanto la calidad genética como el número de crías. [34]

La elección críptica permite a las hembras elegir preferentemente el esperma. De este modo, las hembras pueden aparearse varias veces y asignar esperma a sus óvulos según el fenotipo paterno o según otras características. En algunos casos, como en la mosca amarilla del estiércol , ciertos rasgos masculinos afectarán la aptitud de los huevos puestos en condiciones ambientales particulares. Las hembras pueden elegir el esperma en función de la calidad del macho como una función de su interacción con el medio ambiente. [21] En otras especies, como la mosca Dryomyza anilis , las hembras eligen preferentemente el esperma de un lugar de almacenamiento sobre otro. Los machos de esta especie han desarrollado comportamientos, como el golpeteo abdominal, para aumentar su número de espermatozoides almacenados en el sitio de almacenamiento favorito. [35] También existe evidencia de este patrón de almacenamiento, elección críptica y comportamiento masculino en el escarabajo de la harina Tribolium castaneum . [36] Algunas especies, como Egernia striolata , no solo utilizan la selección del almacenamiento de esperma para mejorar la aptitud de su descendencia, sino para darles la ventaja en caso de conflicto sexual. [37]

Mecanismos

Contracciones musculares femeninas

La contracción muscular como medio para mover los espermatozoides a través del sistema reproductivo dentro y fuera de las estructuras de almacenamiento se ha estudiado en dípteros , ortópteros y lepidópteros , así como en las especies Rhodnius prolixus y el gorgojo del algodón . En R. prolixus , las contracciones peristálticas rítmicas del oviducto provocan contracciones de la bursa copulatriz y el movimiento de la espermateca . Este movimiento de la espermateca da como resultado la migración de los espermatozoides al conducto espermatecal y al reservorio de la espermateca. [38] [39] [40] En el gorgojo del algodón, las contracciones también se utilizan para mover los espermatozoides desde las espermatecas para que puedan fertilizar el óvulo. [41] Se ha observado en las langostas que el sistema nervioso inicia las contracciones musculares reproductivas femeninas. [42] En algunas especies, como R. prolixus , las contracciones que mueven a los espermatozoides hacia el almacenamiento de esperma son iniciadas por una secreción masculina en el eyaculado. [38] Las secreciones masculinas, como la glicoproteína ACP36D en Drosophila , también pueden desempeñar un papel en la preparación del sistema reproductor femenino para el almacenamiento de esperma. Provoca cambios en la forma del útero que permiten el acceso de los espermatozoides a los órganos de almacenamiento de esperma. [43]

Sistema nervioso del insecto hembra

El sistema nervioso de los insectos hembra afecta a muchos de los procesos implicados en el almacenamiento de esperma. El sistema nervioso puede indicar contracciones musculares , absorción de líquidos y liberación de hormonas , todo lo cual ayuda a trasladar el esperma a los órganos de almacenamiento. [44] Cuando el sistema nervioso de las moscas de la fruta hembras ( Drosophila melanogaster ) fue reemplazado por un sistema nervioso masculinizado mediante manipulación genética, el almacenamiento de esperma se vio afectado, lo que sugiere que el sistema nervioso femenino es único y necesario para almacenar el esperma de forma adecuada. [45]

El sistema nervioso es responsable de varios métodos de fertilización. En la langosta migratoria ( Locusta migratoria ), la presencia de un óvulo en la cámara genital da como resultado un aumento de las contracciones espermatecales. Como resultado, se libera esperma para fertilizar el óvulo. Luego se activa un bucle neural (desde el ganglio VIII a través del nervio N2B hasta los nervios N2B2, N2B3, N2B4 y N2B6b) para dirigir al esperma para fertilizar el óvulo mediante contracciones musculares. [44] En la mosca de la fruta del Caribe ( Anastrepha suspensa ), tanto las espermatecas como sus conductos están inervados por un ganglio abdominal ubicado debajo del primer esternito abdominal . [46] Esta ubicación sugiere que el receptáculo de esperma puede comprimir e influir en la cantidad de esperma absorbido o liberado por la mosca hembra. [46]

Referencias

  1. ^ Klowden MJ. 2003. Espermateca. En Resh VH y Cardé RT (eds.): Enciclopedia de insectos. San Diego, CA: Academic Press. 1266.
  2. ^ Liem KL, Bemis WE, Walker WF y Grande L. 2001. Anatomía funcional de los vertebrados: una perspectiva evolutiva Archivado el 26 de diciembre de 2021 en Wayback Machine. 3.ª ed. Belmont, CA: Brooks/Cole – Thomson Learning. Pág. 703.
  3. ^ Birkhead TR. 1998. Competencia espermática en aves: mecanismos y función. En Birkhead TR y Møller AP (eds.) 1998. Competencia espermática y selección sexual. San Diego, CA: Academic Press. Pp. 826.
  4. ^ Ignotz, George G; Cho, Margaret Y; Suarez, Susan S (2007). "Las anexinas son receptores oviductales candidatos para las proteínas de superficie del esperma bovino y, por lo tanto, pueden servir para mantener el esperma bovino en el reservorio oviductal1". Biología de la reproducción . 77 (6): 906–13. doi : 10.1095/biolreprod.107.062505 . PMID  17715429.
  5. ^ abc Suarez, SS (2002). "Formación de un reservorio de espermatozoides en el oviducto". Reproducción en animales domésticos . 37 (3): 140–3. doi :10.1046/j.1439-0531.2002.00346.x. PMID  12071887.
  6. ^ Suarez, S. S (2008). "Control de la hiperactivación en los espermatozoides". Human Reproduction Update . 14 (6): 647–57. doi : 10.1093/humupd/dmn029 . PMID  18653675.
  7. ^ Allen, A. K; Spradling, A. C (2007). "El receptor de hormona nuclear Hr39 relacionado con Sf1 regula el desarrollo y la función del tracto reproductivo femenino de Drosophila". Desarrollo . 135 (2): 311–21. doi : 10.1242/dev.015156 . PMID  18077584.
  8. ^ Hunter, RH F; Leglise, P. C (1971). "Fertilización polispérmica después de cirugía tubárica en cerdos, con especial referencia al papel del istmo". Reproducción . 24 (2): 233–46. CiteSeerX 10.1.1.1028.5312 . doi :10.1530/jrf.0.0240233. PMID  5102536. 
  9. ^ Kardong KV. 2009. Vertebrados: Anatomía comparada, función, evolución. 5.ª ed. Boston, MA: McGraw Hill. Pág. 779.
  10. ^ Birkhead, T. R; Møller, A. P (1993). "Selección sexual y separación temporal de eventos reproductivos: datos de almacenamiento de esperma de reptiles, aves y mamíferos". Revista biológica de la Sociedad Linneana . 50 (4): 295–311. doi :10.1111/j.1095-8312.1993.tb00933.x.
  11. ^ Holt, William V (2011). "Mecanismos de almacenamiento de esperma en el tracto reproductor femenino: una comparación entre especies". Reproducción en animales domésticos . 46 : 68–74. doi : 10.1111/j.1439-0531.2011.01862.x . PMID  21884282.
  12. ^ Ridley, M (1988). "Frecuencia de apareamiento y fecundidad en insectos". Biological Reviews . 63 (4): 509–49. doi :10.1111/j.1469-185X.1988.tb00669.x. S2CID  85110084.
  13. ^ Den Boer, SP A; Baer, ​​B; Dreier, S; Aron, S; Nash, D. R; Boomsma, J. J (2009). "Uso prudente del esperma por las reinas de las hormigas cortadoras de hojas". Actas de la Royal Society B: Ciencias Biológicas . 276 (1675): 3945–53. doi :10.1098/rspb.2009.1184. JSTOR  30245087. PMC 2825782 . PMID  19710057. 
  14. ^ Antolin MF y Henk AD. 2003. Determinación del sexo. En Resh VH y Cardé RT (eds.): Enciclopedia de insectos. San Diego, CA: Academic Press. 1266.
  15. ^ Werren, J. H (1980). "Adaptaciones de la proporción sexual a la competencia local por la pareja en una avispa parásita". Science . 208 (4448): 1157–9. Bibcode :1980Sci...208.1157W. doi :10.1126/science.208.4448.1157. PMID  17783073. S2CID  28151928.
  16. ^ King, P. E (1961). "Un posible método de determinación de la proporción sexual en el himenóptero parásito Nasonia vitripennis". Nature . 189 (4761): 330–1. Código Bibliográfico :1961Natur.189..330K. doi :10.1038/189330a0. S2CID  4181967.
  17. ^ Birkhead TR y Møller AP (eds.) 1998. Competencia espermática y selección sexual. San Diego, CA: Academic Press. Pág. 826.
  18. ^ Eberhard WG. 1996. Control femenino: selección sexual y elección críptica femenina. Princeton, NJ: Princeton University Press. Pp 501.
  19. ^ Leonard J. y Cordoba-Aguilar A. 2010. La evolución de los caracteres sexuales primarios en los animales (pp. 1–52). Oxford: Oxford University Press.
  20. ^ ab Ward, Paul I (2000). "Elección críptica de hembras en la mosca amarilla del estiércol Scathophaga Stercoraria (L.)". Evolución . 54 (5): 1680–6. doi :10.1111/j.0014-3820.2000.tb00712.x. PMID  11108595. S2CID  86351582.
  21. ^ abc Ward, Paul I; Vonwil, Judith; Scholte, Ernst-Jan; Knop, Eva (2002). "Experimentos de campo sobre las distribuciones de huevos de diferentes genotipos de fosfoglucomutasa (PGM) en la mosca amarilla del estiércol Scathophaga stercoraria (L.)". Ecología molecular . 11 (9): 1781–5. Bibcode :2002MolEc..11.1781W. doi :10.1046/j.1365-294X.2002.01558.x. PMID  12207727. S2CID  1292185.
  22. ^ ab Bretman, Amanda; Newcombe, Devi; Tregenza, TOM (2009). "Las hembras promiscuas evitan la endogamia controlando el almacenamiento de esperma". Ecología molecular . 18 (16): 3340–5. Bibcode :2009MolEc..18.3340B. doi :10.1111/j.1365-294X.2009.04301.x. PMID  19694961. S2CID  21936522.
  23. ^ Taylor, Phillip W; Yuval, Boaz (1999). "Selección sexual poscopulatoria en moscas de la fruta mediterráneas: ventajas para los machos grandes y alimentados con proteínas". Animal Behaviour . 58 (2): 247–254. doi :10.1006/anbe.1999.1137. PMID  10458875. S2CID  13919705.
  24. ^ Rowe, Locke; Arnqvist, Göran (2002). "Coevolución sexualmente antagónica en un sistema de apareamiento: combinación de enfoques experimentales y comparativos para abordar los procesos evolutivos". Evolución . 56 (4): 754–67. doi : 10.1111/j.0014-3820.2002.tb01386.x . PMID  12038533. S2CID  221736131.
  25. ^ Marchini, Daniela; Bene, Giovanna Del; Dallai, Romano (2009). "Morfología funcional del aparato reproductor femenino de Stephanitis pyrioides (Heteroptera, Tingidae): Un nuevo papel para las pseudoespermatecas". Journal of Morphology . 271 (4): 473–82. doi :10.1002/jmor.10811. PMID  19941380. S2CID  7316706.
  26. ^ Prokupek, Adrianne; Hoffman, Federico; Eyun, Seong-il; Moriyama, Etsuko; Zhou, Min; Harshman, Lawrence (2008). "Un análisis de etiquetas de secuencia expresada evolutivamente de genes de Drosophila Spermatheca". Evolución . 62 (11): 2936–47. doi : 10.1111/j.1558-5646.2008.00493.x . PMID  18752616. S2CID  33477158.
  27. ^ Ronn, J; Katvala, M; Arnqvist, G (2007). "Coevolución entre genitales masculinos dañinos y resistencia femenina en escarabajos de semillas". Actas de la Academia Nacional de Ciencias . 104 (26): 10921–5. Bibcode :2007PNAS..10410921R. doi : 10.1073/pnas.0701170104 . PMC 1904142 . PMID  17573531. 
  28. ^ Siva-Jothy, M. T; Stutt, A. D (2003). "Una cuestión de gusto: detección directa del estado de apareamiento de las hembras en la chinche". Actas de la Royal Society B: Ciencias Biológicas . 270 (1515): 649–52. doi :10.1098/rspb.2002.2260. PMC 1691276 . PMID  12769466. 
  29. ^ Miller, G. T; Pitnick, S (2002). "Coevolución espermatozoide-hembra en Drosophila". Science . 298 (5596): 1230–3. Bibcode :2002Sci...298.1230M. doi :10.1126/science.1076968. PMID  12424377. S2CID  46698905.
  30. ^ Wagner, R. H; Helfenstein, F; Danchin, E (2004). "Elección de espermatozoides jóvenes por parte de las hembras en un ave genéticamente monógama". Actas de la Royal Society B: Biological Sciences . 271 (Supl 4): S134–7. doi :10.1098/rsbl.2003.0142. PMC 1810032 . PMID  15252964. 
  31. ^ Moore, Jennifer A; Daugherty, Charles H; Godfrey, Stephanie S; Nelson, Nicola J (2009). "Monogamia estacional y paternidad múltiple en una población salvaje de un reptil territorial (tuátara)". Revista biológica de la Sociedad Linneana . 98 (1): 161–70. doi : 10.1111/j.1095-8312.2009.01271.x .
  32. ^ Beese, K; Armbruster, GF J; Beier, K; Baur, B (2009). "Evolución de los órganos de almacenamiento de esperma femenino en el carrefour de los gasterópodos estilomatóforos". Journal of Zoological Systematics and Evolutionary Research . 47 (5): 208–11. doi : 10.1111/j.1439-0469.2008.00491.x .
  33. ^ Welke, Klaas; Schneider, Jutta M (2009). "Evitación de la endogamia a través de la elección críptica de hembras en la araña de telaraña caníbal Argiope lobata". Ecología del comportamiento . 20 (5): 1056–62. doi : 10.1093/beheco/arp097 .
  34. ^ Holt, WV; Lloyd, RE (2010). "Almacenamiento de esperma en el tracto reproductivo femenino de vertebrados: ¿cómo funciona tan bien?". Theriogenology . 73 (6): 713–22. doi :10.1016/j.theriogenology.2009.07.002. PMID  19632711.
  35. ^ Bussière, L. F; Demont, M; Pemberton, A. J; Hall, M. D; Ward, P. I (2010). "La evaluación del éxito de la inseminación en moscas amarillas del estiércol mediante PCR competitiva". Recursos de ecología molecular . 10 (2): 292–303. doi : 10.1111/j.1755-0998.2009.02754.x . PMID  21565024. S2CID  10879957.
  36. ^ Bloch Qazi, M. C (2003). "Un mecanismo potencial para la elección críptica de hembras en un escarabajo de la harina". Journal of Evolutionary Biology . 16 (1): 170–6. doi : 10.1046/j.1420-9101.2003.00501.x . PMID  14635892. S2CID  5636469.
  37. ^ Riley, Julia L; Stow, Adam; Bolton, Peri E; Dennison, Siobhan; Byrne, Richard; Whiting, Martin J (19 de agosto de 2021). "Almacenamiento de esperma en un lagarto de vida familiar, el eslizón arbóreo (Egernia striolata)". Revista de herencia (esab048). doi :10.1093/jhered/esab048. ISSN 0022-1503.
  38. ^ ab Davey, KG (1958). "La migración de los espermatozoides en la hembra de Rhodnius prolixus". Journal of Experimental Biology . 35 : 694–701. doi :10.1242/jeb.35.3.694.
  39. ^ Nonidez, José F (1920). "Los fenómenos internos de la reproducción en Drosophila". The Biological Bulletin . 39 (4): 207–30. doi : 10.2307/1536488 . JSTOR  1536488.
  40. ^ Omura, S (1935). "Estructura y función del sistema genital femenino de Bombyx mori con especial referencia al mecanismo de fertilización" (PDF) . Revista de la Facultad de Agricultura . 40 (3): 111–31.
  41. ^ Villavaso, Eric J (1975). "Funciones del músculo espermatecal del picudo del algodón, Anthonomus grandis". Journal of Insect Physiology . 21 (6): 1275–8. Código Bibliográfico :1975JInsP..21.1275V. doi :10.1016/0022-1910(75)90099-2.
  42. ^ Clark, Julie; Lange, Angela B (2001). "Evidencia de un circuito neural involucrado en el control de las contracciones espermatecales en Locusta migratoria". Journal of Insect Physiology . 47 (6): 607–616. Bibcode :2001JInsP..47..607C. doi :10.1016/S0022-1910(00)00149-9. PMID  11249949.
  43. ^ Avila, F. W; Wolfner, M. F (2009). "Acp36DE es necesaria para los cambios conformacionales uterinos en hembras apareadas de Drosophila". Actas de la Academia Nacional de Ciencias . 106 (37): 15796–800. Bibcode :2009PNAS..10615796A. doi : 10.1073/pnas.0904029106 . JSTOR  40484802. PMC 2747198 . PMID  19805225. 
  44. ^ ab Clark, Julie; Lange, Angela B (2001). "Evidencia de un circuito neural involucrado en el control de las contracciones espermatecales en Locusta migratoria". Journal of Insect Physiology . 47 (6): 607–616. Bibcode :2001JInsP..47..607C. doi :10.1016/s0022-1910(00)00149-9. PMID  11249949.
  45. ^ Arthur, B; Hauschteck-Jungen, E; Nothiger, R; Ward, P. I (1998). "Un sistema nervioso femenino es necesario para el almacenamiento normal de esperma en Drosophila melanogaster: un sistema nervioso masculinizado es tan bueno como ninguno". Actas de la Royal Society B: Ciencias Biológicas . 265 (1407): 1749–53. doi :10.1098/rspb.1998.0498. JSTOR  51255. PMC 1689365 . 
  46. ^ ab Fritz, Ann H (2002). "Un ganglio abdominal único en Anastrepha suspensa (Diptera: Tephritidae) y su inervación de los órganos de almacenamiento de esperma femenino". Anales de la Sociedad Entomológica de América . 95 (1): 103–8. doi : 10.1603/0013-8746(2002)095[0103:asagia]2.0.co;2 .