stringtranslate.com

Fosfatasa alcalina

La enzima fosfatasa alcalina (ALP, fenilfosfatasa alcalina) es una fosfatasa con la función fisiológica de desfosforilar compuestos. La enzima se encuentra en una multitud de organismos, tanto procariotas como eucariotas , con la misma función general, pero en diferentes formas estructurales adecuadas al entorno en el que funcionan. La fosfatasa alcalina se encuentra en el espacio periplásmico de la bacteria E. coli . Esta enzima es estable al calor y tiene su máxima actividad a un pH alto. En los humanos, se encuentra en muchas formas dependiendo de su origen dentro del cuerpo: juega un papel integral en el metabolismo dentro del hígado y el desarrollo dentro del esqueleto. Debido a su prevalencia generalizada en estas áreas, su concentración en el torrente sanguíneo es utilizada por los diagnosticadores como un biomarcador para ayudar a determinar diagnósticos como hepatitis u osteomalacia . [2]

El nivel de fosfatasa alcalina en la sangre se controla mediante la prueba ALP, que suele formar parte de los análisis de sangre de rutina. Los niveles de esta enzima en la sangre dependen de factores como la edad, el sexo o el tipo de sangre. [2] Los niveles de fosfatasa alcalina en la sangre también aumentan de dos a cuatro veces durante el embarazo. Esto es el resultado de la fosfatasa alcalina adicional producida por la placenta y el hígado. [3] [4] Además, los niveles anormales de fosfatasa alcalina en la sangre podrían indicar problemas relacionados con el hígado, la vesícula biliar o los huesos. Los tumores y las infecciones renales, así como la desnutrición, también han mostrado niveles anormales de fosfatasa alcalina en la sangre. [2] Los niveles de fosfatasa alcalina en una célula se pueden medir mediante un proceso llamado "método de puntuación". Por lo general, se toma un frotis de sangre y se tiñe para categorizar cada leucocito en "índices de fosfatasa alcalina leucocítica" específicos. Este marcador está diseñado para distinguir los leucocitos y determinar la actividad enzimática diferente a partir del grado de tinción de cada muestra. [5]

Bacteriano

En las bacterias gramnegativas , como Escherichia coli , la fosfatasa alcalina se encuentra en el espacio periplásmico , externo a la membrana celular interna y dentro de la porción de peptidoglicano de la pared celular. Dado que el espacio periplásmico es más propenso a la variación ambiental que la célula interna, la fosfatasa alcalina es adecuadamente resistente a la inactivación, desnaturalización o degradación . Esta característica de la enzima es poco común en muchas otras proteínas. [6]

La estructura y función precisas de la isozima en E. coli están orientadas exclusivamente a proporcionar una fuente de fosfato inorgánico cuando el entorno carece de este metabolito. Los fosfatos inorgánicos se unen entonces a proteínas transportadoras que entregan los fosfatos inorgánicos a un sistema de transporte específico de alta afinidad, conocido como sistema de transporte específico de fosfato, que transporta el fosfato a través de la membrana citoplasmática. [7]

Mientras que la membrana externa de E. coli contiene porinas que son permeables a los compuestos fosforilados, la membrana interna no. Surge un problema en cómo transportar dichos compuestos a través de la membrana interna y hacia el citosol. La fuerte carga aniónica de los grupos fosfato junto con el resto del compuesto hace que los compuestos fosforilados sean muy inmiscibles en la región no polar de la bicapa. La solución surge al separar el grupo fosfato del compuesto a través de ALP. [8] para la translocación al citosol, [9] El objetivo principal de la desfosforilación por fosfatasa alcalina es aumentar la velocidad de difusión de las moléculas fosforiladas en las células al tiempo que se inhibe su difusión hacia el exterior. [ 10]

La fosfatasa alcalina es una enzima dimérica que contiene zinc con un peso molecular de 86 000 Da, cada subunidad contiene 429 aminoácidos con cuatro residuos de cisteína que unen las dos subunidades. [11]  La fosfatasa alcalina contiene cuatro iones Zn y dos iones Mg, con Zn ocupando los sitios activos A y B, y Mg ocupando el sitio C, por lo que la fosfatasa alcalina nativa completamente activa se denomina enzima (Zn A Zn B Mg C ) 2. El mecanismo de acción de la fosfatasa alcalina implica la coordinación geométrica del sustrato entre los iones Zn en los sitios activos. [11]

La fosfatasa alcalina en E. coli es poco común en condiciones de temperatura elevada, como 80 °C. Debido a la energía cinética inducida por esta temperatura, los enlaces de hidrógeno débiles y las interacciones hidrofóbicas de las proteínas comunes se degradan y, por lo tanto, se fusionan y precipitan. Sin embargo, tras la dimerización de la fosfatasa alcalina, los enlaces que mantienen sus estructuras secundaria y terciaria quedan enterrados de manera efectiva, de modo que no se ven tan afectados a esta temperatura. Además, incluso a temperaturas más elevadas, como 90 °C, la fosfatasa alcalina tiene la característica inusual de la desnaturalización inversa. Debido a esto, aunque finalmente se desnaturaliza a aproximadamente 90 °C, tiene la capacidad adicional de reformar con precisión sus enlaces y volver a su estructura y función originales una vez que se enfría nuevamente. [6]

La fosfatasa alcalina en E. coli se encuentra en el espacio periplásmico y, por lo tanto, se puede liberar utilizando técnicas que debilitan la pared celular y liberan la proteína. Debido a la ubicación de la enzima y la disposición de la proteína de la enzima, la enzima está en solución con una cantidad menor de proteínas que las que hay en otra parte de la célula. [12] La estabilidad térmica de las proteínas también se puede aprovechar al aislar esta enzima (a través de la desnaturalización térmica). Además, la fosfatasa alcalina se puede analizar utilizando fosfato de p-nitrofenilo. Una reacción en la que la fosfatasa alcalina desfosforila el sustrato no específico, fosfato de p-nitrofenilo para producir p-nitrofenol (PNP) y fosfato inorgánico. El color amarillo del PNP y su λ max a 410 permiten que la espectrofotometría determine la actividad enzimática. [13] Algunas complejidades de la regulación y el metabolismo bacterianos sugieren que otros propósitos más sutiles de la enzima también pueden desempeñar un papel en la célula. Sin embargo, en el laboratorio , las Escherichia coli mutantes que carecen de fosfatasa alcalina sobreviven bastante bien, al igual que los mutantes incapaces de detener la producción de fosfatasa alcalina. [14]

El pH óptimo para la actividad de la enzima de E. coli es 8,0 [15] mientras que el pH óptimo de la enzima bovina es ligeramente superior, 8,5. [16] La fosfatasa alcalina representa el 6% de todas las proteínas en las células desreprimidas. [17]

Fosfatasa alcalina heterodímera

Cuando varias copias de un polipéptido codificado por un gen forman un agregado, esta estructura proteica se denomina multímero. Cuando un multímero se forma a partir de polipéptidos producidos por dos alelos mutantes diferentes de un gen particular, el multímero mixto puede exhibir una mayor actividad funcional que los multímeros no mezclados formados por cada uno de los mutantes por separado. En tal caso, el fenómeno se denomina complementación intragénica . La fosfatasa alcalina de E. coli , una enzima dímera, exhibe complementación intragénica. [18]

Uso en investigación

Al cambiar los aminoácidos de la enzima fosfatasa alcalina de tipo salvaje producida por Escherichia coli , se crea una fosfatasa alcalina mutante que no solo tiene un aumento de 36 veces en la actividad enzimática, sino que también conserva la estabilidad térmica. [19] Los usos típicos en el laboratorio para las fosfatasas alcalinas incluyen la eliminación de monoésteres de fosfato para evitar la autoligación, lo cual es indeseable durante la clonación de ADN plasmídico . [20]

Las fosfatasas alcalinas comunes utilizadas en la investigación incluyen:

La fosfatasa alcalina intestinal humana muestra una homología de alrededor del 80% con la enzima intestinal bovina, lo que confirma que comparten su origen evolutivo. Esa misma enzima bovina tiene más del 70% de homología con la enzima placentaria humana. Sin embargo, la enzima hepática humana y la enzima placentaria solo comparten un 20% de homología a pesar de sus similitudes estructurales. [25]

La fosfatasa alcalina se ha convertido en una herramienta útil en los laboratorios de biología molecular , ya que el ADN normalmente posee grupos fosfato en el extremo 5' . La eliminación de estos fosfatos evita que el ADN se ligue (el extremo 5' se une al extremo 3' ), manteniendo así las moléculas de ADN lineales hasta el siguiente paso del proceso para el que se están preparando; además, la eliminación de los grupos fosfato permite el radiomarcaje (reemplazo por grupos fosfato radiactivos) para medir la presencia del ADN marcado a través de pasos posteriores en el proceso o experimento. Para estos fines, la fosfatasa alcalina del camarón es la más útil, ya que es la más fácil de inactivar una vez que ha hecho su trabajo. [26]

Otro uso importante de la fosfatasa alcalina es como etiqueta para inmunoensayos enzimáticos debido a la elevada actividad catalítica de la enzima ALP. [27]

Las células madre pluripotentes indiferenciadas tienen niveles elevados de fosfatasa alcalina en su membrana celular , por lo tanto, la tinción de fosfatasa alcalina se utiliza para detectar estas células y probar la pluripotencia (es decir, células madre embrionarias o células de carcinoma embrionario ). [28]

Existe una correlación positiva entre los niveles séricos de fosfatasa alcalina ósea (=BAP) y la formación ósea en humanos, aunque no se recomienda su uso como biomarcador en la práctica clínica. [29]

Industria láctea

La fosfatasa alcalina se utiliza comúnmente en la industria láctea como indicador de una pasteurización exitosa. Esto se debe a que la bacteria más estable al calor que se encuentra en la leche , Mycobacterium paratuberculosis , se destruye a temperaturas inferiores a las requeridas para desnaturalizar la enzima. Por lo tanto, su presencia es ideal para indicar una pasteurización fallida. [30] [31]

La verificación de la pasteurización se realiza normalmente midiendo la fluorescencia de una solución que se vuelve fluorescente cuando se expone a la fosfatasa alcalina activa. Los productores de leche del Reino Unido exigen ensayos de fluorimetría para demostrar que la fosfatasa alcalina se ha desnaturalizado, [32] ya que las pruebas de p-nitrofenilfosfato no se consideran lo suficientemente precisas para cumplir con los estándares sanitarios.

Como alternativa, se puede utilizar el cambio de color del p -nitrofenilfosfato como sustrato en una solución tamponada (prueba de Aschaffenburg Mullen). [33] La leche cruda normalmente produciría una coloración amarilla en un par de minutos, mientras que la leche pasteurizada correctamente no debería mostrar ningún cambio. Hay excepciones a esto, como en el caso de las fosfatasas alcalinas termoestables producidas por algunas bacterias, pero estas bacterias no deberían estar presentes en la leche. [34]

Además, la prueba rápida de fosfatasa de Scharer investiga la presencia y la ausencia de enzimas ALP en la leche cruda. Esta prueba es ventajosa ya que una pasteurización completa inactiva las enzimas ALP, lo que no produce ningún cambio de color. Sin embargo, los resultados positivos de la prueba hacen que el color de la leche cruda cambie a azul, lo que indica la presencia de enzimas ALP. La prueba funciona escindiendo un grupo fosfato del sustrato fenilfosfato disódico, lo que provoca la liberación de un grupo fenol e indica resultados positivos de la prueba observados visualmente y mediante un espectrofotómetro. [35]

Inhibidores

Todas las isoenzimas de la fosfatasa alcalina de los mamíferos, excepto la placentaria (PALP y SEAP), son inhibidas por la homoarginina y, de manera similar, todas, excepto las intestinales y placentarias, son bloqueadas por el levamisol . [36] El fosfato es otro inhibidor que inhibe competitivamente la fosfatasa alcalina. [37]

Otro ejemplo conocido de un inhibidor de la fosfatasa alcalina es el ácido [(4-nitrofenil)metil]fosfónico. [38]

En suelos contaminados con metales, la fosfatasa alcalina es inhibida por el Cd (cadmio). Además, la temperatura aumenta la inhibición del Cd sobre la actividad enzimática, lo que se refleja en valores crecientes de K m . [39]

Humano

Fisiología

En los seres humanos, la fosfatasa alcalina está presente en todos los tejidos del cuerpo, pero se concentra especialmente en el hígado , el conducto biliar , el riñón , los huesos , la mucosa intestinal y la placenta . En el suero predominan dos tipos de isoenzimas de fosfatasa alcalina : la esquelética y la hepática. Durante la infancia, la mayoría de las fosfatasas alcalinas son de origen esquelético. [40] Los seres humanos y la mayoría de los demás mamíferos contienen las siguientes isoenzimas de fosfatasa alcalina: [41]

Cuatro genes codifican las cuatro isoenzimas. El gen de la fosfatasa alcalina no específica de tejido se encuentra en el cromosoma 1 , y los genes de las otras tres isoformas se encuentran en el cromosoma 2. [ 42]

Fosfatasa alcalina intestinal

La fosfatasa alcalina intestinal es secretada por los enterocitos y parece desempeñar un papel fundamental en la homeostasis y protección intestinal [43] [44] , así como en la supresión de la inflamación [45] a través de la represión de la cascada inflamatoria dependiente del receptor tipo Toll (TLR)-4 y de MyD88 . [46] Desfosforila ligandos microbianos tóxicos/inflamatorios como lipopolisacáridos (LPS), [47] dinucleótidos de citosina-guanina no metilados, flagelina y nucleótidos extracelulares como el difosfato de uridina o el ATP. La desfosforilación de LPS por IAP puede reducir la gravedad de la infección por Salmonella tryphimurium y Clostridioides difficile restaurando la microbiota intestinal normal. [47] Por lo tanto, la expresión alterada de IAP se ha implicado en enfermedades inflamatorias crónicas como la enfermedad inflamatoria intestinal (EII). [47] [48] También parece regular la absorción de lípidos [49] y la secreción de bicarbonato [50] en la mucosa duodenal, que regula el pH de la superficie. Desde la década de 1960, la fosfatasa alcalina intestinal se ha utilizado en la administración de fármacos . Como escinde las subestructuras de fosfato de los fármacos, agentes auxiliares e incluso de la superficie de los nanotransportadores, esta enzima permite el diseño de sistemas de administración de fármacos que pueden alterar sus propiedades en el cuerpo a demanda. [51] La solubilidad de muchos fármacos se puede mejorar sustancialmente mediante el diseño de profármacos de fosfato . En la mucosa intestinal , las subestructuras de fosfato son escindidas por la fosfatasa alcalina y el fármaco se absorbe. [52] Además, los nanotransportadores aniónicos que exhiben propiedades bioinertes pueden alterar su superficie para ser interactivos una vez que han alcanzado el epitelio intestinal debido a una escisión desencadenada por la fosfatasa alcalina de los grupos fosfato aniónicos de su carga superficial que se convierte en catiónica, mejorando, por ejemplo, la captación celular. [53]

En células cancerosas

Los estudios muestran que la proteína fosfatasa alcalina que se encuentra en las células cancerosas es similar a la que se encuentra en los tejidos corporales no malignos y que la proteína se origina del mismo gen en ambos. Un estudio comparó las enzimas de las metástasis hepáticas del carcinoma pulmonar de células gigantes y las células placentarias no malignas. Las dos eran similares en la secuencia NH2 - terminal , el mapa de péptidos, el peso molecular de la subunidad y el punto isoelectrónico. [54]

En un estudio diferente en el que los científicos examinaron la presencia de la proteína fosfatasa alcalina en una línea celular de cáncer de colon humano, también conocida como HT-29, los resultados mostraron que la actividad enzimática era similar a la del tipo intestinal no maligno. Sin embargo, este estudio reveló que sin la influencia del butirato de sodio, la actividad de la fosfatasa alcalina es bastante baja en las células cancerosas. [55] Un estudio basado en los efectos del butirato de sodio en las células cancerosas transmite que tiene un efecto en la expresión del corregulador del receptor de andrógenos, la actividad de transcripción y también en la acetilación de histonas en las células cancerosas. [56] Esto explica por qué la adición de butirato de sodio muestra una mayor actividad de la fosfatasa alcalina en las células cancerosas del colon humano. [55] Además, esto respalda aún más la teoría de que la actividad de la enzima fosfatasa alcalina está realmente presente en las células cancerosas. [57]

En otro estudio, se cultivaron células de coriocarcinoma en presencia de 5-bromo-2'-desoxiuridina y los resultados mostraron un aumento de 30 a 40 veces en la actividad de la fosfatasa alcalina. Este procedimiento de mejora de la actividad de la enzima se conoce como inducción enzimática . La evidencia muestra que de hecho hay actividad de la fosfatasa alcalina en las células tumorales, pero es mínima y necesita ser mejorada. Los resultados de este estudio indican además que las actividades de esta enzima varían entre las diferentes líneas celulares de coriocarcinoma y que la actividad de la proteína fosfatasa alcalina en estas células es menor que en las células de placenta no malignas. [58] [59] pero los niveles son significativamente más altos en niños y mujeres embarazadas. Los análisis de sangre siempre deben interpretarse utilizando el rango de referencia del laboratorio que realizó la prueba. Pueden ocurrir altos niveles de fosfatasa alcalina si los conductos biliares están obstruidos. [60]

Además, el nivel de fosfatasa alcalina aumenta si hay una formación ósea activa, ya que la enzima es un subproducto de la actividad de los osteoblastos (como es el caso de la enfermedad ósea de Paget ). [57]

El nivel de fosfatasa alcalina es mucho más elevado en las células de cáncer de próstata metastásico que en las células de cáncer de próstata no metastásico. [61] Los niveles elevados de ALP en pacientes con cáncer de próstata se asocian con una disminución significativa de la supervivencia. [61]

Los niveles también están elevados en personas con enfermedad celíaca no tratada . [62] Los niveles reducidos del nivel de fosfatasa alcalina son menos comunes que los niveles elevados. La fuente de los niveles elevados se puede deducir obteniendo los niveles séricos de γ-glutamiltransferasa . Los aumentos concomitantes de fosfatasa alcalina con γ-glutamiltransferasa deben aumentar la sospecha de enfermedad hepatobiliar. [63]

Algunas enfermedades no afectan los niveles de fosfatasa alcalina, por ejemplo, la hepatitis C. Un nivel alto de esta enzima no refleja ningún daño en el hígado, aunque niveles altos de fosfatasa alcalina pueden resultar de un bloqueo del flujo en el tracto biliar o un aumento en la presión del hígado. [64]

Niveles elevados

A partir de 2020, los niveles normales de ALP "no estaban bien definidos" y tienden a existir variaciones según el sexo y el origen racial, [65] y según la edad, y los niños y adolescentes tienen niveles marcadamente más altos. [66]

Existen muchas explicaciones posibles para la elevación de la fosfatasa alcalina. Cuando la causa no está clara, los estudios de isoenzimas mediante electroforesis pueden confirmar la fuente del aumento. La fosfatasa alcalina placentaria (que se localiza en los osteoblastos y las capas extracelulares de la matriz recién sintetizada) se libera a la circulación mediante un mecanismo aún no claro. [67] La ​​fosfatasa alcalina placentaria está elevada en los seminomas [68] y las formas activas del raquitismo , así como en las siguientes enfermedades y afecciones: [69]

Niveles reducidos

Las siguientes condiciones o enfermedades pueden provocar niveles reducidos de fosfatasa alcalina:

Usos pronósticos

Se ha demostrado que la medición de la fosfatasa alcalina (junto con el antígeno prostático específico) durante y después de seis meses de tratamiento con hormonas para el cáncer de próstata metastásico predice la supervivencia de los pacientes. [75]

Fosfatasa alcalina leucocitaria

La fosfatasa alcalina leucocítica se encuentra en los glóbulos blancos maduros . Los niveles de fosfatasa alcalina leucocítica en los glóbulos blancos pueden ayudar en el diagnóstico de ciertas enfermedades. [76]

Estructura y propiedades

La fosfatasa alcalina es una enzima homodímera, lo que significa que está formada por dos moléculas. Tres iones metálicos, dos Zn y uno Mg, están contenidos en los sitios catalíticos, y ambos tipos son cruciales para que se produzca la actividad enzimática. Las enzimas catalizan la hidrólisis de monoésteres en ácido fosfórico que, además, puede catalizar una reacción de transfosforilación con grandes concentraciones de aceptores de fosfato. Si bien las principales características del mecanismo catalítico y la actividad se conservan entre el fosfato alcalino de mamíferos y bacterias, la fosfatasa alcalina de mamíferos tiene una actividad específica y valores de K m más altos , por lo tanto, una afinidad menor, un pH óptimo más alcalino, una estabilidad térmica menor y, por lo general, está unida a la membrana y es inhibida por l-aminoácidos y péptidos a través de un mecanismo no competitivo. Estas propiedades difieren notablemente entre las diferentes isoenzimas de la fosfatasa alcalina de mamíferos y, por lo tanto, muestran una diferencia en las funciones in vivo . [78]

La fosfatasa alcalina tiene homología con una gran cantidad de otras enzimas y forma parte de una superfamilia de enzimas con varios aspectos catalíticos y rasgos de sustrato superpuestos. Esto explica por qué las características estructurales más destacadas de las fosfatasas alcalinas de los mamíferos son las que son y hacen referencia a su especificidad de sustrato y homología con otros miembros de la familia de isoenzimas nucleósido pirofosfatasa/fosfodiesterasa. [42] La investigación ha demostrado una relación entre los miembros de la familia de las fosfatasas alcalinas y las aril sulfatasas. Las similitudes en la estructura indican que estas dos familias de enzimas provienen de un ancestro común. Un análisis posterior ha vinculado los fosfatos alcalinos y las aril sulfatasas a una superfamilia más grande. Algunos de los genes comunes encontrados en esta superfamilia son los que codifican fosfodiesterasas y autotoxinas. [79]

Véase también

Referencias

  1. ^ ab PDB : 1ALK ​: Kim EE, Wyckoff HW (marzo de 1991). "Mecanismo de reacción de la fosfatasa alcalina basado en estructuras cristalinas. Catálisis de iones de dos metales". Journal of Molecular Biology . 218 (2): 449–64. doi :10.1016/0022-2836(91)90724-K. PMID  2010919.
  2. ^ abc Lowe D, Sanvictores T, Zubair M, et al. (4 de noviembre de 2022). "Fosfatasa alcalina". StatPearls. PMID  29083622. Consultado el 22 de julio de 2023 .
  3. ^ Shipman KE, Holt AD, Gama R (abril de 2013). "Interpretación de un nivel elevado aislado de fosfatasa alcalina sérica en un paciente asintomático". BMJ . 346 : f976. doi :10.1136/bmj.f976. PMID  23553977. S2CID  20385424.
  4. ^ abc Gronowski AM (2004). "Embarazo humano". Manual de pruebas de laboratorio clínico durante el embarazo . Humana Press. págs. 1–13. doi :10.1007/978-1-59259-787-1_1. ISBN 978-1-4684-9862-2.
  5. ^ Kaplow LS (octubre de 1955). "Un procedimiento histoquímico para localizar y evaluar la actividad de la fosfatasa alcalina leucocítica en frotis de sangre y médula ósea" (PDF) . Sangre . 10 (10): 1023–9. doi : 10.1182/blood.v10.10.1023.1023 . PMID  13260361.
  6. ^ ab Schlesinger MJ, Barrett K (noviembre de 1965). "La disociación reversible de la fosfatasa alcalina de Escherichia coli. I. Formación y reactivación de subunidades" (PDF) . The Journal of Biological Chemistry . 240 (11): 4284–92. doi : 10.1016/S0021-9258(18)97057-2 . PMID  4954367.
  7. ^ Ninfa A (2010). Enfoques fundamentales de laboratorio para bioquímica y biotecnología . Estados Unidos de América: John Wiley & Sons, INC. p. 230. ISBN 978-0-470-08766-4.
  8. ^ Rao NN, Torriani A (julio de 1990). "Aspectos moleculares del transporte de fosfato en Escherichia coli". Microbiología molecular . 4 (7): 1083–90. doi :10.1111/j.1365-2958.1990.tb00682.x. PMID  1700257. S2CID  43220370.
  9. ^ Willsky GR, Bennett RL, Malamy MH (febrero de 1973). "Transporte de fosfato inorgánico en Escherichia coli: participación de dos genes que desempeñan un papel en la regulación de la fosfatasa alcalina". Journal of Bacteriology . 113 (2): 529–39. doi :10.1128/JB.113.2.529-539.1973. PMC 285262 . PMID  4570598. 
  10. ^ Horiuchi T, Horiuchi S, Mizuno D (mayo de 1959). "Un posible fenómeno de retroalimentación negativa que controla la formación de fosfomonoesterasa alcalina en Escherichia coli ". Nature . 183 (4674): 1529–30. Bibcode :1959Natur.183.1529H. doi :10.1038/1831529b0. PMID  13666805. S2CID  4294310.
  11. ^ ab Coleman JE (1992). "Estructura y mecanismo de la fosfatasa alcalina". Revisión anual de biofísica y estructura biomolecular . 21 : 441–83. doi :10.1146/annurev.bb.21.060192.002301. PMID  1525473. S2CID  34764597.
  12. ^ Ammerman JW, Azam F (marzo de 1985). "5-nucleotidasa bacteriana en ecosistemas acuáticos: un nuevo mecanismo de regeneración del fósforo". Science . 227 (4692): 1338–40. Bibcode :1985Sci...227.1338A. doi :10.1126/science.227.4692.1338. PMID  17793769. S2CID  24216177.
  13. ^ "Fosfato de p-nitrofenilo (PNPP)". New England Biolabs . Consultado el 15 de mayo de 2017 .
  14. ^ Wanner BL, Latterell P (octubre de 1980). "Mutantes afectados en la expresión de la fosfatasa alcalina: evidencia de múltiples reguladores positivos del regulón de fosfato en Escherichia coli". Genética . 96 (2): 353–66. doi :10.1093/genetics/96.2.353. PMC 1214304 . PMID  7021308. 
  15. ^ Garen A, Levinthal C (marzo de 1960). "Un estudio genético y químico de la estructura fina de la enzima fosfatasa alcalina de E. coli. I. Purificación y caracterización de la fosfatasa alcalina". Biochimica et Biophysica Acta . 38 : 470–83. doi :10.1016/0006-3002(60)91282-8. PMID  13826559.
  16. ^ Harada M, Udagawa N, Fukasawa K, Hiraoka BY, Mogi M (febrero de 1986). "Actividad de pirofosfatasa inorgánica de la fosfatasa alcalina de pulpa bovina purificada a pH fisiológico". Revista de investigación dental . 65 (2): 125–7. doi :10.1177/00220345860650020601. PMID  3003174. S2CID  20508311.
  17. ^ Yeh MF, Trela ​​JM (mayo de 1976). "Purificación y caracterización de una fosfatasa alcalina reprimible de Thermus aquaticus" (PDF) . The Journal of Biological Chemistry . 251 (10): 3134–9. doi : 10.1016/S0021-9258(17)33509-3 . PMID  5454.
  18. ^ Hehir MJ, Murphy JE, Kantrowitz ER (diciembre de 2000). "Caracterización de fosfatasas alcalinas heterodímeras de Escherichia coli: una investigación de complementación intragénica". Journal of Molecular Biology . 304 (4): 645–56. doi :10.1006/jmbi.2000.4230. PMID  11099386.
  19. ^ Mandecki W, Shallcross MA, Sowadski J, Tomazic-Allen S (octubre de 1991). "La mutagénesis de residuos conservados dentro del sitio activo de la fosfatasa alcalina de Escherichia coli produce enzimas con un aumento de kcat". Ingeniería de proteínas . 4 (7): 801–4. doi :10.1093/protein/4.7.801. PMID  1798702.
  20. ^ Maxam AM, Gilbert W (1980). "Secuenciación de ADN marcado en el extremo con escisiones químicas específicas de base". Nucleic Acids Part I (Ácidos nucleicos, parte I ). Methods in Enzymology (Métodos en enzimología). Vol. 65. págs. 499–560. doi :10.1016/S0076-6879(80)65059-9. ISBN . 978-0-12-181965-1. Número PMID  6246368.
  21. ^ Green, Michael R.; Sambrook, Joseph (3 de agosto de 2020). "Fosfatasa alcalina". Protocolos de Cold Spring Harbor . 2020 (8): pdb.top100768. doi :10.1101/pdb.top100768. ISSN  1940-3402. PMID  32747588.
  22. ^ Beumer, Chantal; Wulferink, Marty; Raaben, Willem; Fiechter, Daniëlle; Brands, Ruud; Seinen, Willem (30 de noviembre de 2003). "La fosfatasa alcalina intestinal de ternera, un nuevo fármaco terapéutico para enfermedades mediadas por lipopolisacáridos (LPS), atenúa la toxicidad de LPS en ratones y lechones". Revista de farmacología y terapéutica experimental . 307 (2): 737–744. doi :10.1124/jpet.103.056606. ISSN  0022-3565. PMID  12970380.
  23. ^ Birkett DJ, Done J, Neale FC, Posen S (mayo de 1966). "Fosfatasa alcalina sérica en el embarazo; un estudio inmunológico". British Medical Journal . 1 (5497): 1210–2. doi :10.1136/bmj.1.5497.1210. JSTOR  25407775. PMC 1845009. PMID  5933831 . 
  24. ^ Benham FJ, Harris H (agosto de 1979). "Líneas celulares humanas que expresan fosfatasa alcalina intestinal". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 76 (8): 4016–9. Bibcode :1979PNAS...76.4016B. doi : 10.1073/pnas.76.8.4016 . JSTOR  69758. PMC 383967 . PMID  291061. 
  25. ^ Hua JC, Berger J, Pan YC, Hulmes JD, Udenfriend S (abril de 1986). "Secuenciación parcial de fosfatasas alcalinas intestinales humanas adultas, fetales y bovinas: comparación con las isoenzimas hepáticas y placentarias humanas". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 83 (8): 2368–72. Bibcode :1986PNAS...83.2368H. doi : 10.1073/pnas.83.8.2368 . JSTOR  27284. PMC 323298 . PMID  3458202. 
  26. ^ de Backer, Maaike; McSweeney, Sean; Rasmussen, Hanne B.; Riise, Bjørn W.; Lindley, Peter; Hough, Edward (17 de mayo de 2002). "La estructura cristalina de 1,9 Å de la fosfatasa alcalina de camarón termolábil". Journal of Molecular Biology . 318 (5): 1265–1274. doi :10.1016/S0022-2836(02)00035-9. PMID  12083516.
  27. ^ Liu, Lin; Chang, Yong; Lou, Jiaxin; Zhang, Shuo; Yi, Xinyao (11 de septiembre de 2023). "Descripción general del desarrollo de inmunoensayos ópticos ligados a fosfatasa alcalina". Moléculas . 28 (18): 6565. doi : 10.3390/molecules28186565 . ISSN  1420-3049. PMC 10536125 . PMID  37764341. 
  28. ^ "Apéndice E: Marcadores de células madre". Información sobre células madre . Institutos Nacionales de Salud, Departamento de Salud y Servicios Humanos de los Estados Unidos. Archivado desde el original el 21 de septiembre de 2015. Consultado el 24 de septiembre de 2013 .
  29. ^ Szulc P, Seeman E, Delmas PD (2000). "Medidas bioquímicas del recambio óseo en niños y adolescentes". Osteoporosis International . 11 (4): 281–94. doi :10.1007/s001980070116. PMID  10928217. S2CID  8223812.
  30. ^ Kay H (1935). "Algunos resultados de la aplicación de una prueba simple para la eficiencia de la pasteurización". The Lancet . 225 (5835): 1516–1518. doi :10.1016/S0140-6736(01)12532-8.
  31. ^ Hoy WA, Neave FK (1937). "La prueba de fosfatasa para una pasteurización eficiente". The Lancet . 230 (5949): 595–598. doi :10.1016/S0140-6736(00)83378-4.
  32. ^ "BS EN ISO 11816-1:2013 - Leche y productos lácteos. Determinación de la actividad de la fosfatasa alcalina. Método fluorimétrico para leche y bebidas a base de leche". British Standards Institution (BSI) . Consultado el 23 de agosto de 2016 .
  33. ^ Aschaffenburg R, Mullen JE (1949). "Una prueba rápida y sencilla de fosfatasa para la leche". Journal of Dairy Research . 16 (1): 58–67. doi :10.1017/S0022029900005288. S2CID  85673728.
  34. ^ Aschaffenburg, R.; Mullen, JEC (1 de junio de 2009). "381. Una prueba rápida y sencilla de fosfatasa para la leche". Revista de investigación láctea . 16 (1): 58–67. doi :10.1017/s0022029900005288. ISSN  0022-0299.
  35. ^ Lakra, Sunil; Jadhav, Vijay J.; Garg, SR (2016). "Desarrollo de un método cromatográfico para la determinación de la actividad de la fosfatasa alcalina en la leche pasteurizada". Métodos analíticos de alimentos . 9 (7): 2002–2009. doi :10.1007/s12161-015-0380-7. ISSN  1936-9751.
  36. ^ Sharma U, Pal D, Prasad R (julio de 2014). "Fosfatasa alcalina: una descripción general". Indian Journal of Clinical Biochemistry . 29 (3): 269–78. doi :10.1007/s12291-013-0408-y. PMC 4062654 . PMID  24966474. 
  37. ^ Iqbal J (julio de 2011). "Un microensayo inmovilizado enzimático en electroforesis capilar para estudios de caracterización e inhibición de fosfatasas alcalinas". Analytical Biochemistry . 414 (2): 226–31. doi :10.1016/j.ab.2011.03.021. PMID  21439261.
  38. ^ Ganellin CR, Triggle DJ, eds. (1999). Diccionario de agentes farmacológicos (1.ª ed.). Londres: Chapman & Hall. ISBN 978-0-412-46630-4.
  39. ^ Tan X, Machmuller MB, Wang Z, Li X, He W, Cotrufo MF, Shen W (abril de 2018). "La temperatura mejora la afinidad de la fosfatasa alcalina del suelo por el Cd". Chemosphere . 196 : 214–222. Bibcode :2018Chmsp.196..214T. doi :10.1016/j.chemosphere.2017.12.170. PMID  29304459.
  40. ^ Reiss I, Inderrieden D, Kruse K (enero de 1996). "Bestimmung der knochenspezifischen alkalischen Phosphatase bei Störungen des Kalziumstoffwechsels im Kindesalter". Monatsschrift Kinderheilkunde . 144 (9): 885–890. doi :10.1007/s001120050054. S2CID  12764174.
  41. ^ Azpiazu, Daniel; Gonzalo, Sergio; Villa-Bellosta, Ricardo (12 de marzo de 2019). "Fosfatasa alcalina no específica tisular y calcificación vascular: un objetivo terapéutico potencial". Current Cardiology Reviews . 15 (2): 91–95. doi :10.2174/1573403x14666181031141226. ISSN  1573-403X. PMC 6520574 . PMID  30381085. 
  42. ^ ab Millán JL (junio de 2006). "Fosfatasas alcalinas: estructura, especificidad de sustrato y relación funcional con otros miembros de una gran superfamilia de enzimas". Señalización purinérgica . 2 (2): 335–41. doi :10.1007/s11302-005-5435-6. PMC 2254479 . PMID  18404473. 
  43. ^ Alam SN, Yammine H, Moaven O, et al. (abril de 2014). "La fosfatasa alcalina intestinal previene la susceptibilidad inducida por antibióticos a los patógenos entéricos". Anales de Cirugía . 259 (4): 715–22. doi :10.1097/sla.0b013e31828fae14. PMC 3855644 . PMID  23598380. 
  44. ^ Lallès JP (febrero de 2014). "Fosfatasa alcalina intestinal: nuevas funciones y efectos protectores". Nutrition Reviews . 72 (2): 82–94. doi : 10.1111/nure.12082 . PMID  24506153.
  45. ^ Ghosh SS, Gehr TW, Ghosh S (diciembre de 2014). "Curcumina y enfermedad renal crónica (ERC): principal modo de acción a través de la estimulación de la fosfatasa alcalina intestinal endógena". Moléculas . 19 (12): 20139–56. doi : 10.3390/molecules191220139 . PMC 6271001 . PMID  25474287. 
  46. ^ Vaishnava S, Hooper LV (2007). "Fosfatasa alcalina: manteniendo la paz en la superficie epitelial intestinal". Cell Host & Microbe . 2 (6): 365–367. doi : 10.1016/j.chom.2007.11.004 . PMID  18078687.
  47. ^ abc Bilski J, Mazur-Bialy A, Wojcik D, et al. (2017). "El papel de la fosfatasa alcalina intestinal en los trastornos inflamatorios del tracto gastrointestinal". Mediadores de la inflamación . 2017 : 9074601. doi : 10.1155/2017/9074601 . PMC 5339520. PMID  28316376 . 
  48. ^ Molnár K, Vannay A, Szebeni B, et al. (julio de 2012). "Fosfatasa alcalina intestinal en la mucosa colónica de niños con enfermedad inflamatoria intestinal". Revista Mundial de Gastroenterología . 18 (25): 3254–9. doi : 10.3748/wjg.v18.i25.3254 (inactivo 2024-09-12). PMC 3391762 . PMID  22783049. {{cite journal}}: CS1 maint: DOI inactivo a partir de septiembre de 2024 ( enlace )
  49. ^ Narisawa S, Huang L, Iwasaki A, Hasegawa H, Alpers DH, Millán JL (noviembre de 2003). "Absorción acelerada de grasa en ratones deficientes en fosfatasa alcalina intestinal". Biología molecular y celular . 23 (21): 7525–30. doi :10.1128/mcb.23.21.7525-7530.2003. PMC 207564 . PMID  14560000. 
  50. ^ Akiba Y, Mizumori M, Guth PH, Engel E, Kaunitz JD (diciembre de 2007). "La actividad de la fosfatasa alcalina intestinal del borde en cepillo duodenal afecta la secreción de bicarbonato en ratas". American Journal of Physiology. Fisiología gastrointestinal y hepática . 293 (6): G1223–33. doi :10.1152/ajpgi.00313.2007. PMID  17916646. S2CID  3091278.
  51. ^ Le-Vinh, B; Akkuş-Dağdeviren, ZB; Le, NMN; Nazir, I; Bernkop-Schnürch, A (2022). "Fosfatasa alcalina: un socio endógeno confiable para la administración y el diagnóstico de fármacos". Advanced Therapeutics . 5 (2): 2100219. doi : 10.1002/adtp.202100219 . S2CID  245865286.
  52. ^ Tantra, T; Singh, Y; Patekar, R; Kulkarni, S; Kumar, P; Thareja, S (2023). "Profármacos de fosfato: un enfoque para mejorar la biodisponibilidad de fármacos aprobados clínicamente". Curr. Med. Chem . 30 (3): 336–357. doi :10.2174/0929867330666230209094738. PMID  36757029. S2CID  256697019.
  53. ^ Le, NN; Steinbring, C; Le-Vinh, B; Jalil, A; Matuszczak, B; Bernkop-Schnürch, A (2021). "Recubrimientos de polifosfato: una estrategia prometedora para superar el dilema de los policationes". J. Colloid Interface Sci . 587 : 279–289. Bibcode :2021JCIS..587..279L. doi : 10.1016/j.jcis.2020.12.019 . PMID  33360901. S2CID  229694823.
  54. ^ Greene PJ, Sussman HH (octubre de 1973). "Comparación estructural de la fosfatasa alcalina placentaria ectópica y normal". Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 70 (10): 2936–40. Bibcode :1973PNAS...70.2936G. doi : 10.1073/pnas.70.10.2936 . JSTOR  63137. PMC 427142 . PMID  4517947. 
  55. ^ ab Herz F, Schermer A, Halwer M, Bogart LH (septiembre de 1981). "Fosfatasa alcalina en HT-29, una línea celular de cáncer de colon humano: influencia del butirato de sodio y la hiperosmolalidad". Archivos de bioquímica y biofísica . 210 (2): 581–91. doi :10.1016/0003-9861(81)90224-1. PMID  7305346.
  56. ^ Paskova L, Smesny Trtkova K, Fialova B, Benedikova A, Langova K, Kolar Z (agosto de 2013). "Diferentes efectos del butirato de sodio en células de próstata cancerosas y normales". Toxicology in Vitro . 27 (5): 1489–95. Bibcode :2013ToxVi..27.1489P. doi :10.1016/j.tiv.2013.03.002. PMID  23524101.
  57. ^ ab Lowe, Dhruv; Sanvictores, Terrence; Zubair, Muhammad; John, Savio (2024), "Fosfatasa alcalina", StatPearls , Treasure Island (FL): StatPearls Publishing, PMID  29083622 , consultado el 28 de abril de 2024
  58. ^ Chou JY, Robinson JC (julio de 1977). "Inducción de la fosfatasa alcalina placentaria en células de coriocarcinoma por 5-bromo-2′-desoxiuridina". In Vitro . 13 (7): 450–60. doi :10.1007/bf02615106. JSTOR  4291955. PMID  18400. S2CID  6726390.
  59. ^ "Prueba de isoenzima ALP". Enciclopedia Médica MedlinePlus . Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU.
  60. ^ "ALP: The Test - Fosfatasa alcalina". Pruebas de laboratorio en línea . Asociación Estadounidense de Química Clínica (AACC) . Consultado el 23 de agosto de 2016 .
  61. ^ ab Rao SR, Snaith AE, Marino D, Cheng X (2017). "La fosfatasa alcalina derivada de tumores regula el crecimiento tumoral, la plasticidad epitelial y la supervivencia libre de enfermedad en el cáncer de próstata metastásico". British Journal of Cancer . 116 (2): 227–236. doi :10.1038/bjc.2016.402. PMC 5243990 . PMID  28006818. 
  62. ^ Pruessner HT (marzo de 1998). "Detección de la enfermedad celíaca en sus pacientes". American Family Physician . 57 (5): 1023–34, 1039–41. PMID  9518950.
  63. ^ Vroon D (1990). "Fosfatasa alcalina y gamma glutamiltransferasa". Métodos clínicos: historia clínica, exámenes físicos y de laboratorio. Tercera edición . Butterworths. ISBN 9780409900774. Número de identificación personal  21250047.
  64. ^ "Fosfatasa alcalina: prueba de función hepática - hepatitis viral". www.hepatitis.va.gov . Consultado el 2 de mayo de 2016 .
  65. ^ Gonzalez H, Imam Z, Wong R, Li J, Lu M, Trudeau S, Gordon S, Imam M, Gish R (octubre de 2020). "Los niveles normales de fosfatasa alcalina dependen de la raza/etnia: datos de la Encuesta de Examen de Salud y Nutrición de NationalGEP". BMJ Open Gastroenterology . 7 (1): e000502. doi :10.1136/bmjgast-2020-000502. PMC 7559036 . PMID  33055108. 
  66. ^ Gholami Bahnemiri M, Mirabedini S, Mohammadi P, Barmaki H, Qaffaripour Z, Rezapour M, Alijanpour M (2022). "Determinación de la fosfatasa alcalina sérica de referencia en niños sanos de 1 a 18 años". Caspian Journal of Internal Medicine . 13 (4): 749–756. doi :10.22088/cjim.13.4.749. PMC 9659844 . PMID  36420337. 
  67. ^ Delmas PD (diciembre de 1991). "¿Qué sabemos sobre los marcadores óseos bioquímicos?". Baillière's Clinical Obstetrics and Gynaecology . 5 (4): 817–30. doi :10.1016/s0950-3552(05)80289-5. PMID  1822819 . Consultado el 1 de mayo de 2016 .
  68. ^ Lange PH, Millan JL, Stigbrand T, Vessella RL, Ruoslahti E, Fishman WH (agosto de 1982). "Fosfatasa alcalina placentaria como marcador tumoral de seminoma". Cancer Research . 42 (8): 3244–7. PMID  7093962.
  69. ^ Dugdale DC. "Análisis de sangre ALP: Enciclopedia médica MedlinePlus". MedlinePlus . Consultado el 26 de febrero de 2014 .
  70. ^ Foucault P, Foucault MH, Kucharewicz B, Bureau F, Alix M, Drosdowsky MA (1991). "[Valor del estudio de las fosfatasas alcalinas totales y de la isoenzima ósea en una población de sujetos con osteoporosis]". Annales de Biologie Clinique . 49 (9): 477–81. PMID  1789501.
  71. ^ "Fosfatasa alcalina: prueba médica de MedlinePlus". medlineplus.gov . Consultado el 30 de abril de 2024 .
  72. ^ McComb RB, Bowers GN, Posen S (1979). "Utilización clínica de las mediciones de fosfatasa alcalina". Fosfatasa alcalina . Springer US. págs. 525–786. doi :10.1007/978-1-4613-2970-1_9. ISBN 978-1-4613-2972-5.
  73. ^ Mueller MN, Kappas A (octubre de 1964). "Farmacología del estrógeno. I. La influencia del estradiol y el estriol en la eliminación hepática de la sulfobromoftaleína (BSP) en el hombre". J Clin Invest . 43 (10): 1905–14. doi :10.1172/JCI105064. PMC 289635 . PMID  14236214. 
  74. ^ "Fosfatasa alcalina: prueba médica de MedlinePlus". medlineplus.gov . Consultado el 30 de abril de 2024 .
  75. ^ Robinson D, Sandblom G, Johansson R, Garmo H, Stattin P, Mommsen S, Varenhorst E (enero de 2008). "Predicción de la supervivencia del cáncer de próstata metastásico basada en mediciones seriadas tempranas del antígeno prostático específico y la fosfatasa alcalina". The Journal of Urology . 179 (1): 117–22, discusión 122–3. doi :10.1016/j.juro.2007.08.132. PMID  17997442.
  76. ^ Garattini, Enrico; Gianni, Maurizio (1 de julio de 2009). "Fosfatasa alcalina leucocítica, un marcador específico para el granulocito neutrófilo posmitótico: regulación en la leucemia promielocítica aguda". Leucemia y linfoma . 23 (5–6): 493–503. doi :10.3109/10428199609054858. ISSN  1042-8194. PMID  9031080.
  77. ^ Arceci RJ, Hann IM, Smith OP, eds. (2006). Hematología pediátrica (3.ª ed.). Wiley-Blackwell. pág. 763. ISBN 978-1-4051-3400-2.
  78. ^ Millán, José Luis (17 de junio de 2006). "Fosfatasas alcalinas: estructura, especificidad de sustrato y relación funcional con otros miembros de una gran superfamilia de enzimas". Señalización purinérgica . 2 (2): 335–341. doi :10.1007/s11302-005-5435-6. ISSN  1573-9538. PMC 2254479 . PMID  18404473. 
  79. ^ O'Brien PJ, Herschlag D (mayo de 2001). "Interrelaciones funcionales en la superfamilia de la fosfatasa alcalina: actividad de la fosfodiesterasa de la fosfatasa alcalina de Escherichia coli". Bioquímica . 40 (19): 5691–9. CiteSeerX 10.1.1.322.8876 . doi :10.1021/bi0028892. PMID  11341834. 

Lectura adicional

Enlaces externos