[2]​ Hacia el año de 1975 la ciudad enfrentaba severos problemas de transportación y tráfico, lo que hizo que el gobierno del estado buscase una solución para mejorar la movilidad urbana.

En el año 1981 las dos rutas existente fueron modificadas en sus recorrido, quedando de la siguiente manera; Panteón Nuevo–Zapopan y Tlaquepaque–Plaza del Sol.

[6]​[7]​ En ese mismo año a las rutas en operación se les asignaron numerales del 100 al 500.

En agosto del mismo año un trolebús modelo Ridder E fue puesto en pruebas en la ruta 400 durante una semana en tanto se seguía en la espera de las nuevas unidades, cuya operación se estimó enprincipio para diciembre.

[24]​ Actualmente es la única línea en operación, corre del Monumento de Los Arcos al Mercado Felipe Ángeles.

[25]​ Su recorrido es el siguiente:[26]​ Además la línea cuenta con conexión al sistema Mi Macro Calzada en la parada Independencia, así como con el tren eléctrico en la estación Juárez, desde donde comparte una parte su trayecto con la Línea 1 de SITREN, hasta la terminal de Los Arcos.

Desde 1995 a su desaparición en la ruta circulaban las unidades más antiguas MASA SOMEX 1981 Números económicos 1001-1140 aunque su gran mayoría estaban en el taller por falta de mantenimiento, algunas demasiado canibalizadas para que otras unidades pudiesen circular,[27]​[28]​ donde se encuentran los talleres de Sistecozome.

Ésta ruta se inauguró en el año de 1984 junto con la ruta 400, ésta pasa por puntos importantes como lo son el centro histórico como la Plaza Tapatía, Hospicio Cabañas, el centro comercial Centro Magno, Monumento Los Arcos de Guadalajara, Estación del Tren Ligero 1 y 2, Glorieta Artesanos Mariano Azuela-Av.

República-Aquiles Serdán-Calzada Juan Pablo II - Belisario Domínguez Centro Médico entre otros.

[32]​ La ruta desapareció en el año del 2009, pues todo su recorrido fue reemplazado por Mi Macro Calzada.

A lo largo de varias avenidas se instalaron postes y catenaria, los cuales hasta la fecha siguen en abandono.

[35]​ Todos los trolebuses están equipados con una alcancía para el pago, que cuenta además con un lector de tarjeta electrónica.