Tinción diferencial
Puede usarse una aguja estéril para colocar una pequeña cantidad de un cultivo bacteriano en la superficie del portaobjetos.
Este material es suspendido en una gota de agua o solución salina previamente colocada sobre el portaobjetos.
El Yodo entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal de violeta.
1.- Extendido.- se debe de tomar en cuenta que el extendido en la lámina con el cultivo bacteriano (muestra) debe ser fina, caso contrario no será visible en el lente del microscopio, es decir, que las estructuras no se podrán evidenciar.
Mycobacterium no se unen fácilmente a colorantes simples y hay que teñirlas con un tratamiento más fuerte, este tratamiento se trata de calentar una mezcla de fucsina básica y fenol.
Una vez que la fucsina ha penetrado con la ayuda del calor y el fenol, las células ácido alcohol resistentes no se decoloran con una solución ácido-alcohólica, permaneciendo de color rojo.
La tinción negativa revela la presencia de cápsulas alrededor de la bacteria, para realizar esta tinción se mezcla las bacterias con tinta china o nigrosina y se extiende en una capa fina sobre un portaobjeto, en el microscopio se podrá observar que aparecen cuerpos más claros debido a que la tinta no penetra ni la célula ni la cápsula Los flagelos para que sean visibles en un microscopio es necesario aumentar su grosor con mordientes tales como: ácido tánico, alumbre de potasio, pararosanilina o fucsian..
