El Campeonato de Primera Aficionados 1965 fue la décima quinta temporada del certamen de la cuarta categoría del fútbol argentino.
El certamen consagró campeón por primera vez a General Mitre, que obtuvo el único ascenso de la temporada.
Los cuatro equipos mejor ubicados de cada zona clasificaron a un torneo octogonal final.
El equipo con mayor puntaje se consagró campeón y obtuvo el ascenso.
No hubo otros ascensos ni desafiliaciones.