El Campeonato Ecuatoriano de Fútbol Serie B 2001, conocido oficialmente como «Campeonato Nacional de Fútbol Serie B 2001», fue la 24.ª edición de la Serie B del Campeonato nacional de fútbol profesional en Ecuador, mientras que fue la 37.ª edición incluyendo los torneos cortos conocidas como etapas.

El campeón del certamen fue Liga Deportiva Universitaria.

Por tercera vez, los equipos del Guayas no jugaron en la Serie B.

Por segundo año consecutivo, se repitió exactamente el formato previo: un torneo de 36 fechas por el sistema de todos contra todos a dos etapas, ida y vuelta.

PJ = Partidos jugados; PG = Partidos ganados; PE = Partidos empatados; PP = Partidos perdidos; GF = Goles a favor; GC = Goles en contra; DG = Diferencia de gol; PTS = Puntos Fuente: Ecuador 2001 - RSSSF Fuente: RSSSF - Ecuador 2001 - Goleadores