Fue enarbolada por primera vez por el ejército de los Treinta y Tres Orientales durante la Cruzada Libertadora el 19 de abril de 1825 en su camino para liberar a la Provincia Oriental del dominio del Imperio del Brasil.

[1]​ Inspirada en la bandera artiguista de la Provincia Oriental izada en 1815 en la ciudad de Montevideo que consistía con los mismos colores en el mismo orden pero sin la inscripción central.

En la franja central lleva inscrita la leyenda "Libertad o Muerte".

La bandera original permaneció en el Museo Nacional hasta el año 1969 cuando fue robada por la organización guerrillera anarquista OPR-33, su destino es desconocido hasta la fecha.

Un cuadro al óleo de Juan Manuel Blanes llamado "El Juramento de los Treinta y Tres Orientales" representa al jefe de los Treinta y Tres Juan Antonio Lavalleja, a su segundo Manuel Oribe y al resto de los patriotas enarbolando esta bandera apenas desembarcados en la playa de la Agraciada.