Los ensayos de liberación de interferón gamma ( IGRA ) son herramientas de diagnóstico para la infección tuberculosa latente (LTBI). Son marcadores sustitutos de la infección por Mycobacterium tuberculosis e indican una respuesta inmune celular a M. tuberculosis si este último está presente.
Los IGRA no pueden distinguir entre infección latente y enfermedad de tuberculosis (TB) activa, y no deben usarse como método único para el diagnóstico de tuberculosis activa, que es un diagnóstico microbiológico. Un resultado positivo de IGRA puede no indicar necesariamente una infección por tuberculosis, sino que también puede ser causado por una infección por micobacterias no tuberculosas. Un IGRA negativo no descarta la enfermedad de tuberculosis activa; Varios estudios han demostrado que hasta una cuarta parte de los pacientes con tuberculosis activa tienen resultados IGRA negativos.
Debido a que los IGRA no se ven afectados por el estado de vacunación con Bacille Calmette-Guérin (BCG), los IGRA son útiles para evaluar la LTBI en personas vacunadas con BCG, particularmente en entornos donde la vacuna BCG se administra después de la infancia o se administran múltiples vacunas (de refuerzo). Por el contrario, la especificidad de la prueba cutánea de tuberculina (TST) varía según el momento de la BCG y si se administran vacunas repetidas (de refuerzo).
QuantiFERON , también conocido como QFT, es la marca registrada de un ensayo de liberación de interferón gamma (IGRA) para el diagnóstico de tuberculosis fabricado por QIAGEN . El ensayo QFT-GIT es una prueba de sangre total basada en ELISA que utiliza péptidos de tres antígenos de tuberculosis (ESAT-6, CFP-10 y TB7.7) en un formato en tubo. El resultado se informa como cuantificación de IFN-gamma en unidades internacionales (UI) por ml. Se considera que un individuo es positivo para la infección por M. tuberculosis si la respuesta de IFN-gamma a los antígenos de tuberculosis está por encima del límite de la prueba (después de restar la respuesta de fondo de IFN-gamma en el control negativo).
Dado que las IGRA son más costosas y técnicamente complejas de realizar que la prueba de Mantoux , en su declaración de política de 2011, la OMS no recomendó reemplazar la prueba de Mantoux por IGRA como intervención de salud pública en países de ingresos bajos y medianos. [1]
QuantiFERON-TB Gold In-Tube (QFT-GIT), la prueba de tercera generación, reemplazó a QuantiFERON-TB (QFT) y QuantiFERON-Gold, que ya no se comercializan.
Según los Centros para el Control de Enfermedades de EE. UU. , [2] en 2001, la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) aprobó la prueba QuantiFERON-TB (QFT) como ayuda para detectar la infección latente por Mycobacterium tuberculosis . Esta prueba es una ayuda de diagnóstico in vitro que mide un componente de la reactividad inmune mediada por células frente a M. tuberculosis . La prueba se basa en la cuantificación del interferón gamma (IFN-γ) liberado por linfocitos sensibilizados en sangre entera incubada durante la noche con derivado proteico purificado (PPD) de M. tuberculosis y antígenos de control.
La prueba cutánea de tuberculina (TST) se ha utilizado durante años como ayuda en el diagnóstico de la infección tuberculosa latente (LTBI) e incluye la medición de la respuesta de hipersensibilidad de tipo retardado 48 a 72 horas después de la inyección intradérmica de PPD. TST y QFT no miden los mismos componentes de la respuesta inmunológica y no son intercambiables. La evaluación de la precisión de estas pruebas está limitada por la falta de un estándar para confirmar la LTBI. [ cita necesaria ]
Como prueba de diagnóstico, QFT:
En comparación con TST, los resultados de QFT están menos sujetos a sesgos y errores del lector. En un ensayo multicéntrico patrocinado por los CDC, los resultados de QFT y TST fueron moderadamente concordantes (valor kappa general = 0,60). El nivel de concordancia se vio afectado negativamente por la vacunación previa con el bacilo de Calmette-Guérin (BCG) , la reactividad inmune a las micobacterias no tuberculosas (NTM) y una TST positiva previa. [3] Además del estudio multicéntrico, otros dos estudios publicados han demostrado una concordancia moderada entre TST y QFT. [4] [5] Sin embargo, uno de los cinco sitios involucrados en el estudio de los CDC informó menos acuerdo. [6] Aunque ha habido estudios que confirman el mayor riesgo futuro de tuberculosis activa en personas con TST positiva, no ocurrió lo mismo con aquellos con un resultado IGRA positivo. Un estudio publicado recientemente [7] demostró que un resultado positivo de IGRA predice el riesgo futuro de tuberculosis activa. Además, IGRA fue al menos igual de sensible y más específica en comparación con la TST tradicional. En este estudio de contactos cercanos inmunocompetentes recientemente expuestos de casos de tuberculosis activa, la tasa de progresión a enfermedad activa entre los individuos positivos para QFT no tratados fue significativamente mayor que para los positivos para TST no tratados (14,6% frente a 2,3%). Aunque las cifras eran pequeñas, todos los contactos cercanos que desarrollaron tuberculosis activa fueron positivos para QFT, pero solo el 83% fueron positivos para TST. [ cita necesaria ]
Como se señaló anteriormente, la vacunación previa con BCG puede producir resultados falsos positivos de la TST. En un estudio del personal militar que regresaba de misiones, aproximadamente la mitad de los TST positivos fueron falsamente positivos. [8] En un estudio más reciente sobre militares que regresan de misiones, Franken et al. [9] informaron evidencia que sugiere que los resultados falsos positivos de la TST son comunes y que la prueba QFT podría guiar un tratamiento más específico y aliviar el tratamiento antituberculoso innecesario.
El punto de corte de la FDA para un resultado positivo se estableció en >0,34 unidades internacionales/mililitro (UI/ml), aunque esto ha demostrado ser funcionalmente problemático en áreas de baja prevalencia, como entre los trabajadores de la salud de EE. UU. y Canadá. En áreas de bajo riesgo y baja prevalencia, el valor predictivo positivo de cualquier prueba disminuye. En el caso de los trabajadores de la salud norteamericanos evaluados en serie, los resultados de QFT justo por encima de este punto de corte producen resultados falsos positivos que, al repetir las pruebas, vuelven a ser negativos, [10] donde la detección de tuberculosis a menudo es obligatoria anualmente. [11] Una investigación realizada en la Universidad de Stanford y la Administración de Veteranos ha informado que el uso de una zona de repetición de pruebas (o límite) por debajo de 1,1 UI/ml mitiga el 76% de los falsos positivos o reversiones. [12] [13]
Las limitaciones de QFT incluyen la necesidad de extraer sangre y procesarla dentro de las 16 horas posteriores a la extracción y la experiencia clínica y de laboratorio limitada con el ensayo. Es necesario realizar más estudios sobre la utilidad de QFT para predecir la progresión a tuberculosis activa, particularmente en niños y huéspedes inmunocomprometidos. [12]
Para su desventaja, QFT puede producir resultados falsos positivos con Mycobacterium szulgai , Mycobacterium kansasii y Mycobacterium marinum . [14]
La prueba QuantiFERON-TB Gold (QFT-G) es una prueba de sangre total que se utiliza como ayuda en el diagnóstico de la infección por Mycobacterium tuberculosis , incluida la infección tuberculosa latente (LTBI) y la enfermedad de tuberculosis (TB). [15] Esta prueba fue aprobada por la Administración de Medicamentos y Alimentos de EE. UU. (FDA) en 2005.
Las muestras de sangre se mezclan con antígenos (sustancias que pueden producir una respuesta inmune) y controles. Para QFT-G, los antígenos incluyen mezclas de péptidos sintéticos que representan dos proteínas de M. tuberculosis , ESAT-6 y CFP-10 . Después de la incubación de la sangre con antígenos durante 16 a 24 horas, se mide la cantidad de interferón gamma (IFN-gamma).
Si el paciente está infectado con M. tuberculosis , sus glóbulos blancos liberarán IFN-gamma en respuesta al contacto con los antígenos de la tuberculosis . Los resultados de QFT-G se basan en la cantidad de IFN-gamma que se libera en respuesta a los antígenos.
Se necesitan evaluaciones clínicas y pruebas adicionales (como una radiografía de tórax , una muestra de esputo y un cultivo) para diferenciar entre un diagnóstico de tuberculosis latente o tuberculosis activa.
Las ventajas de la prueba son:
Las desventajas y limitaciones de la prueba son:
El 10/10/2007, la FDA de EE. UU. [19] aprobó la comercialización del Quantiferon TB Gold In Tube en EE. UU.
La FDA afirma:
Aprobación para una modificación del quantiferon-tb gold a un sistema de recolección en tubo que consta de tres tubos de recolección de sangre, cero, antígeno de tuberculosis y mitógeno. El dispositivo, modificado, se comercializará con el nombre comercial quantiferon-tb gold in-tube y está indicado para su uso como prueba de diagnóstico in vitro utilizando un cóctel de péptidos que simula las proteínas esat-6, cfp-10 y tb 7.7(p4). para estimular las células en sangre entera heparinizada extraída directamente en tubos de extracción de sangre especializados. La detección de interferón-y mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (elisa) se utiliza para identificar respuestas in vitro a estos antígenos peptídicos asociados con la infección por Mycobacterium tuberculosis.
Según el prospecto aprobado por la FDA [20] Quantiferon TB Gold In Tube tiene una especificidad constante de >99% en individuos de bajo riesgo y una sensibilidad de hasta 92% en individuos con enfermedad activa, dependiendo del entorno y la extensión de la enfermedad. La especificidad en dos estudios de unos pocos cientos de personas es del 96-98% en una población sanitariamente inmunizada.
El prospecto también informa que el kit proporciona tres tubos de recolección a los que se les han secado los antígenos en sus paredes y que estos tubos deben transferirse a una incubadora dentro de las 16 horas posteriores a la extracción de sangre.
El 25 de junio de 2010, los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) de EE. UU. actualizaron las directrices sobre pruebas de tuberculosis (TB) para brindar orientación a los funcionarios de salud pública, médicos y trabajadores de laboratorio de EE. UU. con respecto a la detección y el diagnóstico de la infección por tuberculosis. Las directrices actualizadas proporcionan una nueva dirección para el control de la tuberculosis en los EE. UU. [11]
Anteriormente, QuantiFERON®-TB Gold podía usarse en cualquier situación en la que se utilizara la prueba cutánea de tuberculina (TST), sin preferencia. Las directrices de 2010 establecen un nuevo punto de referencia porque recomiendan los IGRA como el método de prueba de tuberculosis preferido en muchos pacientes, incluidos aquellos que están vacunados con BCG o que es poco probable que regresen para una prueba de prueba de tuberculosis. [ cita necesaria ]
En los Estados Unidos, la prueba está ampliamente disponible en laboratorios estatales de salud pública, hospitales y laboratorios comerciales .
En enero de 2008, los CDC informaron - a través de su boletín TB Notes [21] - a los controladores de TB y otras personas sobre un enlace [22] a una lista de laboratorios en los EE. UU. y Canadá que ofrecían realizar la prueba Quantiferon Gold.
La Asociación de Controladores de Tuberculosis de California también ha proporcionado una lista de laboratorios de salud pública [23] en California que están realizando pruebas con Quantiferon.