stringtranslate.com

Ionización por electrospray con desorción láser asistida por matriz

La ionización por electrospray con desorción láser asistida por matriz ( MALDESI ) se introdujo por primera vez en 2006 como una nueva técnica de ionización ambiental que combina los beneficios de la ionización por electrospray (ESI) y la desorción/ionización láser asistida por matriz (MALDI) . [1] Se puede utilizar un láser infrarrojo (IR) o ultravioleta (UV) en MALDESI para excitar resonantemente una matriz endógena o exógena. El término " matriz " se refiere a cualquier molécula que esté presente en gran exceso y absorba la energía del láser, facilitando así la desorción de moléculas de analito. El diseño original de MALDESI se implementó utilizando matrices orgánicas comunes , similares a las utilizadas en MALDI, junto con un láser UV. La fuente MALDESI actual emplea agua endógena o una capa delgada de hielo depositado exógenamente como matriz de absorción de energía donde los enlaces de estiramiento simétricos y asimétricos de OH se excitan resonantemente mediante un láser de infrarrojo medio. [2]

Esquema de la fuente de imágenes IR-MALDESI

La fuente IR-MALDESI se puede utilizar para la obtención de imágenes por espectrometría de masas (MSI) , una técnica que utiliza datos de MS analizados de un área de muestra para detectar cientos a miles de biomoléculas y visualizar sus distribuciones espaciales. La fuente IR-MALDESI MSI se diseñó e implementó en 2013, [3] y está acoplada a un espectrómetro de masas híbrido Quadrupole - Orbitrap de alto poder de resolución . La platina motorizada controlada por computadora y una cámara con dispositivo de carga acoplada (CCD) se colocan en un recinto purgado con nitrógeno donde se pueden regular los iones ambientales y la humedad relativa. Se utiliza una placa termoeléctrica Peltier enfriada por agua para controlar la temperatura de la platina de muestra (de −10 °C a 80 °C). La fuente tiene capacidades de disparo único o múltiple con fluencia láser ajustable, tasa de repetición y retraso entre el disparador láser y la acumulación de iones MS.

En los últimos diez años, los avances transformadores en la tecnología láser, [4] adquisición de datos, software de control de motores (RastirX [5] ) y software de procesamiento de imágenes (MSiReader [6] [7] ) han promovido IR-MALDESI como una herramienta poderosa para el análisis directo y MSI de diversas muestras biológicas, forenses y farmacéuticas.

Principios de funcionamiento

En un experimento típico de espectroscopia de masas MALDESI, se deposita una fina capa de hielo sobre la muestra como medio de absorción de energía. Se utiliza un láser de infrarrojo medio [4] que excita el modo de estiramiento de OH del agua para desorber los materiales neutros de las muestras biológicas. La columna de compuestos desorbidos interactúa con una columna de electropulverización ortogonal donde se dividen en gotitas de electropulverización cargadas y se ionizan mediante un proceso similar a la ESI. Posteriormente, los iones se introducen en un espectrómetro de masas. [2] El mecanismo de ionización similar a la ESI se ha demostrado experimentalmente y estudiado en profundidad, [8] [9] [10] mostrando una suavidad equivalente a la ESI y permitiendo la detección de complejos proteicos intactos.

La formación de la matriz de hielo comienza con la purga del recinto a una humedad relativa inferior al 12 % con la fuente de gas nitrógeno seco antes de enfriar la etapa Peltier a -10 °C. Después, la muestra enfriada se expone a la humedad relativa ambiente, lo que provoca la rápida formación de una capa de hielo sobre la muestra. El espesor del hielo se mantiene durante todo el experimento manteniendo la humedad relativa del recinto al 10 % ± 2 % a través del recinto purgado con nitrógeno. [2] Anteriormente, se utilizaba hielo como matriz en los experimentos IR-MALDI; [11] sin embargo, los rendimientos de iones para dichos experimentos han sido muy bajos. La postionización por electrospray empleada en IR-MALDESI ayuda a aliviar los problemas asociados con el bajo rendimiento de ionización. Se ha demostrado que una matriz de hielo depositada exógenamente mejora la abundancia de iones en un factor de aproximadamente 15. [12]

MALDESI es un sistema interactivo complejo, lo que hace que sea un desafío generar la geometría óptima en un solo experimento. Los ajustes experimentales involucrados en la comunicación entre la etapa de muestreo, el espectrómetro de masas y la desorción láser, como la altura de la etapa, la distancia del punto ESI y la tasa de repetición del láser, han experimentado una optimización progresiva mediante varios diseños de experimentos (DOE). [13] [9] [2] Además de la optimización de la geometría de la fuente, la composición del solvente de electrospray tiene un efecto en las señales MALDESI (es decir, influye en la cobertura molecular y la abundancia de iones). En un estudio para mejorar la detección de lípidos específicos de tejido, los parámetros de electrospray se han adaptado para polaridades de ionización positiva y negativa. Bajo los parámetros óptimos, las abundancias de lípidos aumentaron 3 veces con un 15% más de cobertura en polaridad positiva, mientras que en modo negativo la abundancia de lípidos logró un aumento de 1,5 veces con un 10% más de cobertura. [14]

Mientras que la primera generación del sistema MALDESI estaba acoplada a un espectrómetro de masas de resonancia de ciclotrón iónico con transformada de Fourier (FT), [3] la fuente actual está interconectada con un espectrómetro de masas Thermo Exploris 240 o Q Exactive Plus equipado con un analizador de masas Orbitrap . Estos analizadores de masas ofrecen mediciones de masa igualmente precisas, pero generalmente acortan la duración de la adquisición de datos. La fuente MALDESI también se puede acoplar a un espectrómetro de masas de movilidad iónica de tubo de deriva (IMS-MS) para una detección de alto rendimiento. [15] Estas integraciones proporcionan datos brutos más confiables para MSI, así como análisis directo de varias muestras biológicas porque un tiempo de análisis prolongado podría causar cambios fisiológicos en las muestras bajo interrogación.

Lector MSi

MSiReader es una aplicación de Matlab que proporciona visualización y análisis de datos de masa precisos de alta resolución recopilados a través de MALDESI. MSiReader se desarrolló en la Universidad Estatal de Carolina del Norte y se lanzó por primera vez en 2013. [6] Ahora se ha convertido en una de las opciones de software gratuito y de código abierto más importantes para datos MSI, [7] y es compatible con los formatos de datos MSI más comunes (por ejemplo, mzXML, imzML, img, ASCII ). Hay muchas funciones esenciales disponibles en MSiReader, a saber, generación de mapas de calor con alta precisión de medición de masa, [7] normalización de picos, [16] cuantificación absoluta y relativa, [7] [17] y cambio de polaridad. [18] También se han agregado a MSiReader funciones avanzadas como análisis de componentes principales (MSiPCA), MSiCorrelation, [19] y visualización 3D [20] [21] . Hasta la fecha, más de 1250 investigadores utilizan MSiReader y lo citan en más de 325 publicaciones desde 2013. Se publica bajo la licencia de código abierto BSD 3 y se puede descargar de forma gratuita desde el sitio web público de MSiReader www.msireader.com. También está disponible una versión independiente que no requiere una licencia de Matlab.

RastirX

El software Rastir, también construido sobre una plataforma Matlab, fue desarrollado para permitir a los usuarios definir visualmente una región de interés (ROI) rectangular que rodea una sección de tejido para experimentos MALDESI. Rastir genera automáticamente comandos de control de movimiento y parámetros de sincronización del láser y del instrumento para mover la platina de muestra bajo el haz láser para adquirir los datos MS vóxel por vóxel. La última versión del software, denominada RastirX, permite a los usuarios dibujar ROI arbitrarias en una imagen de video en vivo de una muestra con el mouse de la computadora. La ROI se puede modificar escaneo por escaneo, lo que conduce a un tiempo de adquisición significativamente más corto y menos contaminación de compuestos fuera del tejido que utilizando una ROI rectangular. Esta herramienta de ROI arbitraria se ha aplicado en varios proyectos. [5] [22]

Aplicaciones

Desde su debut en 2006, MALDESI ha experimentado grandes avances en tecnología láser (desde láseres UV hasta varios láseres de longitud de onda de infrarrojo medio), [1] [4] [23] configuraciones ESI [9] [13] [14] y software asociado. [5] [6] [7] [8] [9] Todo el progreso ha hecho de IR-MALDESI una herramienta competitiva de análisis directo y de imágenes para investigar una amplia variedad de muestras biológicas. Al asociar m/z con posiciones donde se adquieren, se pueden generar mapas de iones únicos de analitos, lo que proporciona información valiosa para distribuciones espaciales de lípidos , péptidos , metabolómica y otras biomoléculas pequeñas de muestras de mamíferos [1] [12] [21] [23] [14] [24] a tejidos vegetales. [25] [26] [27]

Biológico

Proteínas y péptidos

El proceso similar a ESI permitió a MALDESI detectar péptidos y proteínas con carga múltiple, algo que no se podía lograr con MALDI porque MALDI genera principalmente iones con carga simple y doble. [1]

Lípidos y metabolómica

La técnica IR-MALDESI se ha aplicado con éxito para visualizar las distribuciones de lípidos a nivel de todo el cuerpo, en particular en ratones neonatos [24] y peces cebra. [28] Al emplear el método de sobremuestreo [29], donde la distancia de movimiento de la platina es menor que el diámetro del haz láser, se logró la MSI IR-MALDESI a nivel celular a una distancia de punto a punto de ~10 micrómetros. [30] Además, se ha demostrado la detectabilidad lipidómica de la técnica IR-MALDESI a nivel de una sola célula con células HeLa aisladas . [31]

Además de los tejidos blandos (por ejemplo, ovarios de gallina [32] y tejidos de hígado de rata [10] ), IR-MALDESI es capaz de detectar metabolitos de huesos de ratón sanos y afectados por accidente cerebrovascular no modificados incrustados en yeso de París, lo que da como resultado 826 y 669 especies específicas de tejido supuestamente anotadas. [22]

El IR-MALDESI es una herramienta invaluable para estudiar el metabolismo de muestras de plantas y vegetales, ya que estas muestras son naturalmente ricas en agua. Recientemente se informó sobre un extenso análisis metabolómico de tomates cherry mediante IR-MALDESI. [25] En el análisis de plántulas de Arabidopsis , las cantidades de compuestos relacionados con la auxina se cuantificaron relativamente utilizando ácido indol-3-acético (IAA) marcado con isótopos estables (SIL). Además, en este estudio, se utilizó agarosa como sustrato apropiado por primera vez en IR-MALDESI. [27]

Neurotransmisores

El IR-MALDESI ha demostrado la capacidad de medir neurotransmisores seleccionados en cerebros de ratas expuestos al retardante de llama tetrabromobisfenol A sin ninguna derivatización química. [33] El trabajo de seguimiento que se centró en los neurotransmisores y sus metabolitos relacionados con las vías en secciones de placenta de ratas informó 49 neurotransmisores y metabolitos identificados supuestamente. [34]

Glicanos

Los glicanos son moléculas estructuralmente complejas que plantean muchos desafíos analíticos. Se presentó el análisis directo de glicanos N -ligados de fetuina bovina mediante IR-MALDESI en modos de ionización tanto positivos como negativos, lo que indica que IR-MALDESI puede ser una técnica alternativa para el perfil de glicanos N -ligados. [35]

MSI tridimensional

Aunque la mayoría de las MSI 3D tradicionales se basan en la reconstrucción de imágenes 2D de analitos a partir de secciones seriadas, la obtención de imágenes 3D basada en secciones seriadas requiere mucho tiempo y puede perder información biológica significativa. IR-MALDESI es una técnica basada en la ablación, que puede medir y generar mapas de calor 3D de biomoléculas a partir de comprimidos farmacéuticos [20] y piel de ratón desnuda [21] mediante la obtención de imágenes secuenciales de una muestra con eventos de ablación consecutivos.

Farmacéutico

En un estudio de prueba de concepto, se obtuvieron imágenes y cuantificaron los medicamentos antirretrovirales contra el VIH en tejidos cervicales incubados utilizando IR-MALDESI, y los resultados se evaluaron mediante un método LC-MS/MS validado. [12] Hasta ahora, la aplicación farmacéutica de IR-MALDESI se ha extendido desde secciones de tejido [12] [24] [36] hasta hebras de cabello individuales. [17]

Forense

Las fibras textiles son una forma importante de evidencia para la investigación criminal. Una de las características de las fibras que se puede utilizar para distinguir a la víctima del sospechoso es el color generado por un tinte de fibra junto con sus impurezas asociadas. [37] Se realizó con éxito un análisis directo del tinte de la tela utilizando IR-MALDESI sin separación previa por cromatografía . [38] [39]

Técnicas relacionadas

Existen otros métodos de ionización híbridos que combinan la desorción láser resonante o no resonante con la ionización posterior por electropulverización. Un ejemplo es la ionización por desorción láser por electropulverización (ELDI), que utiliza un láser ultravioleta para formar iones irradiando la muestra directamente y luego interactuando con la columna de electropulverización sin utilizar ninguna matriz. [40] La versión infrarroja de ELDI se ha denominado ionización por electropulverización por ablación láser (LAESI). IR-MALDESI se diferencia de estos dos métodos en que se utiliza una matriz de hielo exógeno para mejorar la desorción de la muestra, así como los parámetros geométricos de la fuente. Otra técnica, la fotoionización por presión atmosférica por desorción (DAPPI), utiliza un chorro de vapor de disolvente calentado para desorber analitos de la superficie de la muestra a través de un microchip nebulizador. Las moléculas desorbidas se ionizan luego mediante fotones emitidos por una lámpara UV y se introducen en espectrómetros de masas. [41]

Referencias

  1. ^ abcd Sampson, Jason S.; Hawkridge, Adam M.; Muddiman, David C. (diciembre de 2006). "Generación y detección de péptidos y proteínas con carga múltiple mediante espectrometría de masas por resonancia de iones ciclotrónica por transformada de Fourier con desorción láser asistida por matriz (MALDESI)". Revista de la Sociedad Americana de Espectrometría de Masas . 17 (12): 1712–1716. doi : 10.1016/j.jasms.2006.08.003 . ISSN  1044-0305. PMID  16952462. S2CID  1727083.
  2. ^ abcd Robichaud, Guillaume; Barry, Jeremy A.; Muddiman, David C. (3 de enero de 2014). "Imágenes de secciones de tejido biológico mediante espectrometría de masas IR-MALDESI utilizando hielo como matriz". Revista de la Sociedad Americana de Espectrometría de Masas . 25 (3): 319–328. Bibcode :2014JASMS..25..319R. doi :10.1007/s13361-013-0787-6. ISSN  1044-0305. PMC 3950934 . PMID  24385399. 
  3. ^ ab Robichaud, Guillaume; Barry, Jeremy A.; Garrard, Kenneth P.; Muddiman, David C. (4 de diciembre de 2012). "Fuente de imágenes de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI) acoplada a un espectrómetro de masas FT-ICR". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 24 (1): 92–100. doi :10.1007/s13361-012-0505-9. ISSN  1044-0305. PMC 3689149 . PMID  23208743. 
  4. ^ abc Ekelöf, Måns; Manni, Jeffrey; Nazari, Milad; Bokhart, Mark; Muddiman, David C. (17 de febrero de 2018). "Caracterización de un nuevo sistema láser infrarrojo en modo ráfaga miniaturizado para imágenes de espectrometría de masas IR-MALDESI". Química analítica y bioanalítica . 410 (9): 2395–2402. doi :10.1007/s00216-018-0918-9. ISSN  1618-2642. PMC 5851870 . PMID  29455285. 
  5. ^ abc Garrard, Kenneth P.; Ekelöf, Måns; Khodjaniyazova, Sitora; Bagley, M. Caleb; Muddiman, David C. (2 de diciembre de 2020). "Una plataforma versátil para la obtención de imágenes de patrones espaciales arbitrarios mediante espectrometría de masas". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (12): 2547–2552. doi :10.1021/jasms.0c00128. ISSN  1044-0305. PMC 8761386 . PMID  32539373. S2CID  219700969. 
  6. ^ abc Robichaud, Guillaume; Garrard, Kenneth P.; Barry, Jeremy A.; Muddiman, David C. (28 de marzo de 2013). "MSiReader: una interfaz de código abierto para ver y analizar archivos de imágenes MS de alta resolución en la plataforma Matlab". Revista de la Sociedad Americana de Espectrometría de Masas . 24 (5): 718–721. Bibcode :2013JASMS..24..718R. doi :10.1007/s13361-013-0607-z. ISSN  1044-0305. PMC 3693088 . PMID  23536269. 
  7. ^ abcde Bokhart, Mark T.; Nazari, Milad; Garrard, Kenneth P.; Muddiman, David C. (20 de septiembre de 2017). "MSiReader v1.0: software de obtención de imágenes por espectrometría de masas de código abierto en evolución para análisis dirigidos y no dirigidos". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 29 (1): 8–16. doi :10.1007/s13361-017-1809-6. ISSN  1044-0305. PMC 5786496 . PMID  28932998. 
  8. ^ ab Dixon, R. Brent; Muddiman, David C. (2010). "Estudio del mecanismo de ionización en técnicas de desorción basadas en láser híbrido". The Analyst . 135 (5): 880–2. Bibcode :2010Ana...135..880D. doi :10.1039/b926422a. ISSN  0003-2654. PMID  20419234.
  9. ^ abcd Rosen, Elias P.; Bokhart, Mark T.; Ghashghaei, H. Troy; Muddiman, David C. (4 de abril de 2015). "Influencia de las condiciones de desorción en la sensibilidad del analito y la energía interna en imágenes discretas de tejido o cuerpo entero por IR-MALDESI". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 26 (6): 899–910. Bibcode :2015JASMS..26..899R. doi :10.1007/s13361-015-1114-1. ISSN  1044-0305. PMC 4425634 . PMID  25840812. 
  10. ^ ab Tu, Anqi; Muddiman, David C. (9 de septiembre de 2019). "Deposición de energía interna en la ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja con y sin el uso de hielo como matriz". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 30 (11): 2380–2391. Bibcode :2019JASMS..30.2380T. doi :10.1007/s13361-019-02323-2. ISSN  1044-0305. PMC 6937789 . PMID  31502226. 
  11. ^ Nelson, R.; Rainbow, M.; Lohr, D.; Williams, P (22 de diciembre de 1989). "Volatilización de ADN de alto peso molecular mediante ablación láser pulsada de soluciones acuosas congeladas". Science . 246 (4937): 1585–1587. Bibcode :1989Sci...246.1585N. doi :10.1126/science.2595370. ISSN  0036-8075. PMID  2595370.
  12. ^ abcd Barry, Jeremy A.; Robichaud, Guillaume; Bokhart, Mark T.; Thompson, Corbin; Sykes, Craig; Kashuba, Angela DM; Muddiman, David C. (18 de abril de 2014). "Mapeo de fármacos antirretrovirales en tejido mediante MSI IR-MALDESI acoplado al Q Exactive y comparación con el ensayo LC-MS/MS SRM". Revista de la Sociedad Americana de Espectrometría de Masas . 25 (12): 2038–2047. Bibcode :2014JASMS..25.2038B. doi :10.1007/s13361-014-0884-1. ISSN  1044-0305. PMC 4201889 . PMID  24744212. 
  13. ^ ab Barry, Jeremy A.; Muddiman, David C. (8 de noviembre de 2011). "Optimización global de la fuente de ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR MALDESI) para espectrometría de masas mediante diseño estadístico de experimentos". Rapid Communications in Mass Spectrometry . 25 (23): 3527–3536. Bibcode :2011RCMS...25.3527B. doi :10.1002/rcm.5262. ISSN  0951-4198. PMC 3781580 . PMID  22095501. 
  14. ^ abc Bagley, M. Caleb; Ekelöf, Måns; Muddiman, David C. (5 de febrero de 2020). "Determinación de parámetros óptimos de electrospray para lipidómica en imágenes de espectrometría de masas de ionización por electrospray con desorción láser asistida por matriz infrarroja". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (2): 319–325. doi :10.1021/jasms.9b00063. ISSN  1044-0305. PMC 10861021 . PMID  32031399. S2CID  211045862. 
  15. ^ Ekelöf, Måns; Dodds, James; Khodjaniyazova, Sitora; Garrard, Kenneth P.; Baker, Erin S.; Muddiman, David C. (4 de marzo de 2020). "Acoplamiento de IR-MALDESI con espectrometría de masas de movilidad iónica de tubo de deriva para aplicaciones de detección e imagen de alto rendimiento". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (3): 642–650. doi :10.1021/jasms.9b00081. ISSN  1044-0305. PMC 7263366 . PMID  31971795. 
  16. ^ Tu, Anqi; Muddiman, David C. (25 de junio de 2019). "Evaluación sistemática de la repetibilidad de IR-MALDESI-MS y estrategias de normalización para corregir la variación analítica y mejorar la calidad de la imagen". Química analítica y bioanalítica . 411 (22): 5729–5743. doi :10.1007/s00216-019-01953-5. ISSN  1618-2642. PMC 6706294 . PMID  31240357. 
  17. ^ ab Rosen, Elias P.; Thompson, Corbin G.; Bokhart, Mark T.; Prince, Heather MA; Sykes, Craig; Muddiman, David C.; Kashuba, Angela DM (19 de enero de 2016). "Análisis de antirretrovirales en hebras individuales de cabello para la evaluación de la adherencia al fármaco con imágenes de espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja". Química analítica . 88 (2): 1336–1344. doi :10.1021/acs.analchem.5b03794. ISSN  0003-2700. PMC 5301654 . PMID  26688545. 
  18. ^ Nazari, Milad; Muddiman, David C. (4 de enero de 2016). "Obtención de imágenes por espectrometría de masas con cambio de polaridad de secciones de tejido ovárico de gallina sana y cancerosa mediante ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI)". Analista . 141 (2): 595–605. Bibcode :2016Ana...141..595N. doi :10.1039/C5AN01513H. ISSN  1364-5528. PMC 4701606 . PMID  26402586. 
  19. ^ Ekelöf, Måns; Garrard, Kenneth P.; Judd, Rika; Rosen, Elias P.; Xie, De-Yu; Kashuba, Angela DM; Muddiman, David C. (1 de diciembre de 2018). "Evaluación de métodos de reconocimiento de imágenes digitales para el análisis de datos de imágenes de espectrometría de masas". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 29 (12): 2467–2470. Bibcode :2018JASMS..29.2467E. doi :10.1007/s13361-018-2073-0. ISSN  1044-0305. PMC 6250575 . PMID  30324263. 
  20. ^ ab Bai, Hongxia; Khodjaniyazova, Sitora; Garrard, Kenneth P.; Muddiman, David C. (5 de febrero de 2020). "Imágenes tridimensionales con espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (2): 292–297. doi :10.1021/jasms.9b00066. ISSN  1044-0305. PMC 8284694 . PMID  32031410. 
  21. ^ abc Bai, Hongxia; Linder, Keith E.; Muddiman, David C. (2 de enero de 2021). "Imágenes tridimensionales (3D) de lípidos en tejidos de la piel con espectrometría de masas de ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja (MALDESI)". Química analítica y bioanalítica . 413 (10): 2793–2801. doi : 10.1007/s00216-020-03105-6 . ISSN  1618-2650. PMC 8285079 . PMID  33388847. S2CID  230110155. 
  22. ^ ab Khodjaniyazova, Sitora; Hanne, Nicholas J.; Cole, Jacqueline H.; Muddiman, David C. (28 de noviembre de 2019). "Imágenes por espectrometría de masas (MSI) de huesos frescos utilizando ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI)". Métodos analíticos . 11 (46): 5929–5938. doi :10.1039/C9AY01886G. ISSN  1759-9679. PMC 8018523 . PMID  33815571. 
  23. ^ ab Sampson, Jason S.; Murray, Kermit K.; Muddiman, David C. (1 de abril de 2009). "Caracterización intacta y descendente de biomoléculas y análisis directo mediante ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja acoplada a espectrometría de masas FT-ICR". Revista de la Sociedad Americana de Espectrometría de Masas . 20 (4): 667–673. doi :10.1016/j.jasms.2008.12.003. ISSN  1044-0305. PMC 3717316 . PMID  19185512. 
  24. ^ abc Bokhart, Mark T.; Rosen, Elias; Thompson, Corbin; Sykes, Craig; Kashuba, Angela DM; Muddiman, David C. (1 de marzo de 2015). "Obtención de imágenes cuantitativas por espectrometría de masas de emtricitabina en un modelo de tejido cervical mediante ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja". Química analítica y bioanalítica . 407 (8): 2073–2084. doi :10.1007/s00216-014-8220-y. ISSN  1618-2650. PMC 4495968 . PMID  25318460. 
  25. ^ ab Bagley, M. Caleb; Pace, Crystal L.; Ekelöf, Måns; Muddiman, David C. (2020). "Análisis de imágenes por espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI) de metabolitos endógenos en tomates cherry". The Analyst . 145 (16): 5516–5523. Bibcode :2020Ana...145.5516B. doi :10.1039/d0an00818d. ISSN  0003-2654. PMC 7423647 . PMID  32602477. 
  26. ^ Kalmar, Jaclyn Gowen; Oh, Yeonyee; Dean, Ralph A.; Muddiman, David C. (23 de noviembre de 2019). "Investigación de interacciones metametabólicas entre el huésped y el patógeno de la cebada infectada con Magnaporthe oryzae mediante espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja". Química analítica y bioanalítica . 412 (1): 139–147. doi :10.1007/s00216-019-02216-z. ISSN  1618-2642. PMID  31760448. S2CID  208261491.
  27. ^ ab Bagley, M. Caleb; Stepanova, Anna N.; Ekelöf, Måns; Alonso, Jose M.; Muddiman, David C. (2020). "Desarrollo de un método de cuantificación relativa para la obtención de imágenes por espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja de plántulas de Arabidopsis". Comunicaciones rápidas en espectrometría de masas . 34 (6): e8616. doi : 10.1002/rcm.8616 . ISSN  1097-0231. PMID  31658400.
  28. ^ Stutts, Whitney L.; Knuth, Megan M.; Ekelöf, Måns; Mahapatra, Debabrata; Kullman, Seth W.; Muddiman, David C. (1 de abril de 2020). "Métodos para criosección e imágenes de espectrometría de masas de pez cebra de cuerpo entero". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (4): 768–772. doi :10.1021/jasms.9b00097. ISSN  1044-0305. PMC 9375048 . PMID  32129621. S2CID  212407131. 
  29. ^ Jurchen, John C.; Rubakhin, Stanislav S.; Sweedler, Jonathan V. (octubre de 2005). "Obtención de imágenes MALDI-MS de características más pequeñas que el tamaño del haz láser". Journal of the American Society for Mass Spectrometry . 16 (10): 1654–1659. doi : 10.1016/j.jasms.2005.06.006 . ISSN  1044-0305. PMID  16095912. S2CID  23884944.
  30. ^ Nazari, Milad; Muddiman, David C. (1 de marzo de 2015). "Obtención de imágenes por espectrometría de masas a nivel celular mediante ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI) mediante sobremuestreo". Química analítica y bioanalítica . 407 (8): 2265–2271. doi :10.1007/s00216-014-8376-5. ISSN  1618-2650. PMC 4359048 . PMID  25486925. 
  31. ^ Xi, Ying; Tu, Anqi; Muddiman, David C. (1 de noviembre de 2020). "Perfil lipidómico de células de mamíferos individuales mediante ionización por electropulverización por desorción láser asistida por matriz infrarroja (IR-MALDESI)". Química analítica y bioanalítica . 412 (29): 8211–8222. doi :10.1007/s00216-020-02961-6. ISSN  1618-2650. PMC 7606626 . PMID  32989513. 
  32. ^ Lakeh, Mahsa Akbari; Tu, Anqi; Muddiman, David C.; Abdollahi, Hamid (2019). "Discriminación de regiones normales dentro del tejido ovárico canceroso de gallina mediante análisis de imágenes hiperespectrales multivariadas". Comunicaciones rápidas en espectrometría de masas . 33 (4): 381–391. Bibcode :2019RCMS...33..381A. doi :10.1002/rcm.8362. ISSN  1097-0231. PMID  30468547. S2CID  53715626.
  33. ^ Bagley, M. Caleb; Ekelöf, Måns; Rock, Kylie; Patisaul, Heather; Muddiman, David C. (1 de diciembre de 2018). "Imágenes por espectrometría de masas IR-MALDESI de neurotransmisores no derivatizados en tejido cerebral de ratas expuestas a tetrabromobisfenol A". Química analítica y bioanalítica . 410 (30): 7979–7986. doi :10.1007/s00216-018-1420-0. ISSN  1618-2650. PMC 6235718 . PMID  30317443. 
  34. ^ Pace, Crystal L.; Horman, Brian; Patisaul, Heather; Muddiman, David C. (1 de junio de 2020). "Análisis de neurotransmisores en placenta de rata expuesta a retardantes de llama mediante imágenes de espectrometría de masas IR-MALDESI". Química analítica y bioanalítica . 412 (15): 3745–3752. doi :10.1007/s00216-020-02626-4. ISSN  1618-2650. PMC 7228838 . PMID  32300844. 
  35. ^ Pace, Crystal L.; Muddiman, David C. (5 de agosto de 2020). "Análisis directo de glicanos nativos ligados a N mediante IR-MALDESI". Revista de la Sociedad Estadounidense de Espectrometría de Masas . 31 (8): 1759–1762. doi :10.1021/jasms.0c00176. ISSN  1044-0305. PMC 8285077 . PMID  32603137. 
  36. ^ Thompson, Corbin G.; Bokhart, Mark T.; Sykes, Craig; Adamson, Lourdes; Fedoriw, Yuri; Luciw, Paul A.; Muddiman, David C.; Kashuba, Angela DM; Rosen, Elias P. (1 de mayo de 2015). "La espectrometría de masas revela una distribución heterogénea de efavirenz en los reservorios putativos del VIH". Agentes antimicrobianos y quimioterapia . 59 (5): 2944–2948. doi :10.1128/AAC.04952-14. ISSN  0066-4804. PMC 4394831 . PMID  25733502. 
  37. ^ Goodpaster, John V.; Liszewski, Elisa A. (1 de agosto de 2009). "Análisis forense de fibras textiles teñidas". Química analítica y bioanalítica . 394 (8): 2009–2018. doi :10.1007/s00216-009-2885-7. ISSN  1618-2650. PMID  19543886. S2CID  33680156.
  38. ^ Cochran, Kristin H.; Barry, Jeremy A.; Muddiman, David C.; Hinks, David (15 de enero de 2013). "Análisis directo de tejidos textiles y tintes mediante espectrometría de masas de ionización por electropulverización con desorción láser asistida por matriz infrarroja". Química analítica . 85 (2): 831–836. doi :10.1021/ac302519n. ISSN  0003-2700. PMC 3654692 . PMID  23237031. 
  39. ^ Cochran, Kristin H.; Barry, Jeremy A.; Robichaud, Guillaume; Muddiman, David C. (1 de enero de 2015). "Análisis de fibras traza mediante imágenes IR-MALDESI acopladas con espectrometría de masas de alta resolución". Química analítica y bioanalítica . 407 (3): 813–820. doi :10.1007/s00216-014-8042-y. ISSN  1618-2650. PMC 4967535 . PMID  25081013. 
  40. ^ Shiea, Jentaie; Huang, Min-Zon; HSu, Hsiu-Jung; Lee, Chi-Yang; Yuan, Cheng-Hui; Beech, Iwona; Sunner, Jan (2005). "Espectrometría de masas de desorción/ionización láser asistida por electrospray para análisis ambiental directo de sólidos". Rapid Communications in Mass Spectrometry . 19 (24): 3701–3704. Bibcode :2005RCMS...19.3701S. doi :10.1002/rcm.2243. ISSN  1097-0231. PMID  16299699.
  41. ^ Haapala, Markus; Pól, Jaroslav; Saarela, Ville; Arvola, Ville; Kotiaho, Tapio; Ketola, Raimo A.; Franssila, Sami; Kauppila, Tiina J.; Kostiainen, Risto (1 de octubre de 2007). "Fotoionización a presión atmosférica por desorción". Química Analítica . 79 (20): 7867–7872. doi :10.1021/ac071152g. ISSN  0003-2700. PMID  17803282.