Debutó como corista a los 14 años, pasando a integrar las filas del célebre Cotton Club de Harlem donde actuaban Duke Ellington, Billie Holiday, Louis Armstrong y Ethel Waters, quien la impactó con la canción «Stormy Weather».
En 1941 se incorpora a la banda de Charlie Barnet, consiguiendo un éxito discográfico con el tema «Good for nothing Joe»,[2] y después actuaría asiduamente con la banda del pianista Teddy Wilson.
En 1984 fue una de las artistas del año homenajeada con la condecoración Kennedy Center Honor en Washington.
En un principio su color de piel clara hizo que la llamaran la "Hedy Lamarr café con leche" o "Chocolate chanteuse", se le prohibió pernoctar en hoteles para blancos hasta 1942.
[7] En 2003, ABC anunció que Janet Jackson interpretaría a Lena Horne en una película biográfica de televisión.
Oprah Winfrey declaró a Alicia Keys durante una entrevista de 2005 en The Oprah Winfrey Show que posiblemente podría considerar producir la película biográfica ella misma, eligiendo a Keys como Horne.
Esto convirtió a Horne en el 41.er homenajeado en la serie de sellos Black Heritage.