El campeonato provincial de fútbol de Segunda Categoría de Guayas 2021 fue la 55.º edición del torneo de la Segunda Categoría de la provincia de Guayas.
El torneo fue organizado por la Asociación de Fútbol del Guayas (AFG) y avalado por la Federación Ecuatoriana de Fútbol.
El torneo inició el 28 de mayo y finalizó el 14 de agosto.
Participaron 15 clubes de fútbol y entregó cuatro cupos a los play-offs del Ascenso Nacional 2021 por el ascenso a la Serie B, además el campeón provincial clasificó a la primera fase de la Copa Ecuador 2022.
[1] El sistema determinado para esta edición por la Asociación de Fútbol del Guayas fue de la siguiente maneraː Fuente: Aso GuayasCriterios de clasificación: 1) Puntos; 2) Diferencia de goles; 3) Goles marcados Fuente: Aso GuayasCriterios de clasificación: 1) Puntos; 2) Diferencia de goles; 3) Goles marcadosNotas: Fuente: Aso GuayasCriterios de clasificación: 1) Puntos; 2) Diferencia de goles; 3) Goles marcados Fuente: Aso GuayasCriterios de clasificación: 1) Puntos; 2) Diferencia de goles; 3) Goles marcados