La operación Upshot-Knothole fue una serie de once pruebas nucleares llevadas a cabo por Estados Unidos en 1953 en el Sitio de Pruebas de Nevada.
La operación Upshot-Knothole fue precedida por la operación Ivy (en la que se detonó la primera bomba de hidrógeno) y sucedida por la operación Castle.
Esta serie de pruebas es notable porque se disparó por primera vez un proyectil de artillería atómica (el tiro Grable), y por las dos primeras bombas atómicas construidas por el Laboratorio de Radiación de la Universidad de California en Livermore (actualmente denominado Lawrence Livermore National Laboratory).
Se utilizó para probar algunos de los componentes termonucleares que se utilizarían para la serie masiva termonuclear de la operación Castle.
En conjunción con este disparo, más de 21.000 soldados participaron en tierra en el ejercicio Desert Rock V, con la presencia de un número de altos oficiales militares.