IO.SYS es un archivo esencial de MS-DOS y Windows 9x.
Contiene los controladores de dispositivos por defecto de MS-DOS (rutinas de interfaz de hardware) y el programa de inicialización de DOS En la secuencia de arranque del ordenador, el primer sector del disco de arranque es leído y ejecutado.
Si es el sector de arranque del DOS, carga los primeros tres sectores de IO.SYS en la memoria y le transfiere el control a él.
IO.SYS luego: El IBM PC DOS y el DR-DOS utilizan el archivo IBMBIO.COM para el mismo propósito, el cual lee IBMDOS.COM De otra forma el sistema no arrancará.