La trama describe la historia del Rey Espartano Leónidas (Gerard Butler) y sus 300 guerreros espartanos que pelearon a muerte contra el "dios-rey" persa Jerjes I (Rodrigo Santoro) y su ejército de más de 100 000 soldados.Los Éforos consultan al Oráculo y este decreta que Esparta no debe ir a la guerra durante las Carneas.Enfadado, Leónidas parte, después aparece un emisario de Jerjes para recompensar a los Éforos por su apoyo encubierto.Ante Leónidas se presenta Efialtes, un hombre deforme y jorobado, el cual fue salvado por su madre para no ser descartado en Esparta.Sin embargo la esposa del monarca no está dispuesta a que su marido muera sin ayuda en las Termópilas y acepta el chantaje del político el cual consiste en tener relaciones sexuales a cambio de que este le otorgue la posibilidad de poder comparecer ante el Consejo.El heleno rechaza el ultimátum del portavoz persa e inicia un último ataque, tirando una lanza a Jerjes e hiriéndolo en el rostro, haciéndole sangrar como prometió, por lo que el ejército persa hace valer su abrumadora ventaja y aniquila a todos los espartanos.[7] Snyder fotocopió paneles de la historieta con los cuales desarrollo las tramas anteriores y siguientes al cuadro.[8] Una principal excepción a la adaptación directa fue el uso del personaje de Dilios como narrador.[9] Snyder también agrega la trama paralela con la cual la reina Gorgo intenta convocar el apoyo del consejo gobernante para su esposo.[13] Utilizando la técnica croma, y con la ayuda de pantallas azules, Snyder rodó en los ahora desaparecidos Icestorm Studios en Montreal.Butler declara que aunque no se sentía restringido con la dirección de Snyder, el apego a la historieta imponía ciertas limitaciones en su actuación.Ghislain St-Pierre, quien dirigiera el equipo de artistas, describió el efecto: «Todo parece real, pero tiene un sentido áspero e ilustrativo».[20] El director de la película, Zack Snyder, declara que «los sucesos son correctos en un noventa por ciento.Los extravagantes números de Heródoto se utilizan para poblar el ejército persa, y la discusión de Plutarco sobre las mujeres griegas, específicamente las espartanas, se inserta erróneamente en el diálogo entre el embajador persa "misógino" y el rey espartano.[33] Robby Eksiel, crítico griego de cine, declaró que el auditorio quedaría impresionado con la «acción digital» pero les irritaría las «ostentosas interpretaciones y los personajes unidimensionales».[34] La película ha sido parodiada mayoritariamente en la escena en que Leonidas está hablando con el mensajero persa, y cuya conversación enfurece a Leónidas, que contesta la frase "This is madness..." ("Esto es una locura...") dicha por el persa con su frase "This is Sparta!!"como respuesta, dándole una brusca patada en el pecho y lanzándolo a un gran pozo situado detrás del persa.En 2007 se presentó la parodia 300 bolas de los Premios Hetores transmitido por primera vez en el canal Cosmovisión (en Colombia) y siendo Nominada a la Categoría Doblado.Como muchas otras películas, la serie animada South Park muestra una parodia en el episodio 6 de su temporada 11, donde la señora Garrison lucha junto a 30 lesbianas frente a un grupo persa liderado por Jerjes, quien quiere comprar el bar que ellas frecuentan.[36] Legendary Pictures ha anunciado que Frank Miller está escribiendo la novela gráfica de seguimiento y Zack Snyder estaba interesado en dirigir la adaptación, pero desde entonces ha pasado a desarrollar y dirigir El hombre de acero.[37][38] En esta ocasión Noam Murro sustituirá tras las cámaras al realizador Zack Snyder quien ejercerá como productor y coguionista, esto último junto a Kurt Johnstad, guionista también de 300.