La feniletanolamina N -metiltransferasa ( PNMT ) es una enzima que se encuentra principalmente en la médula suprarrenal y que convierte la noradrenalina en epinefrina . [1] También se expresa en pequeños grupos de neuronas en el cerebro humano [2] y en poblaciones seleccionadas de cardiomiocitos . [3]
La PNMT es una proteína cuyo gen codificante se encuentra en el cromosoma 17 en los humanos. Consta de 4 exones y es una proteína de 30 kDa. Comparte muchas propiedades encontradas entre las otras metiltransferasas . Es la más cercana en secuencia a la glicina- N -metil transferasa ( GNMT ). También comparte muchas propiedades estructurales como la forma del labio plegable con la catecol-O-metil transferasa (COMT), aunque comparte menos identidad de secuencia. Varias características de la estructura como este labio plegable sugieren que la PNMT es una adaptación reciente a la familia de enzimas sintetizadoras de catecolaminas, evolucionando más tarde que la COMT, pero antes que otras metiltransferasas como la GNMT. [5]
La S -adenosil- L -metionina (SAM) es un cofactor necesario. [6] La región de unión del sitio activo para el cofactor SAM contiene una gran cantidad de enlaces pi de residuos de fenilalanina y tirosina en el sitio activo que ayudan a mantenerlo en su bolsillo de unión a través del apilamiento de pi . Entre todas las variantes de PNMT conocidas en la naturaleza, hay 7 residuos aromáticos cruciales conservados en el sitio activo. [5]
El residuo glutamina 185 es necesario para la unión del sustrato catecolamina. La sustitución de este residuo por otro reduce la eficiencia catalítica de la PNMT de diez a trescientas veces. [7]
En ausencia de un inhibidor o ligando, un grupo fosfato se une al sitio activo para estabilizar esta región. [8]
La PNMT humana forma dímeros en solución. Cuando los cristales de PNMT se cultivan en soluciones no reductoras, se forman dos enlaces disulfuro entre las cisteínas 48 y 139 en cadenas opuestas. Esta dimerización no tiene efecto sobre la actividad catalítica de la enzima. [9]
La PNMT cataliza la transferencia de un grupo metilo de SAM a norepinefrina, convirtiéndola en epinefrina. Funciona al acercar el cofactor SAM y el sustrato, de modo que el grupo metilo reactivo pueda ser atacado por la amina primaria de la molécula de norepinefrina u otro sustrato de catecolamina . El grupo metilo de SAM es muy reactivo, por lo que la estructura y la ubicación tanto de la norepinefrina como de SAM son cruciales para un patrón de metilación correcto en el producto.
Mientras que la PNMT metila la noradrenalina en el compuesto activo epinefrina , la noradrenalina también puede ser metilada por la catecol-O-metiltransferasa (COMT), otra metiltransferasa que agrega un grupo metilo en una ubicación diferente, produciendo a su vez el compuesto inactivo metanefrina . Las metiltransferasas son muy comunes en las vías de síntesis y desactivación de catecolaminas. [10]
La PNMT también participa en la biosíntesis de aminas traza N -metiladas : metaboliza la fenetilamina en N -metilfenetilamina (un isómero posicional de la anfetamina ), la p - octopamina en sinefrina y la p - tiramina en N -metiltiramina . [11] [12]
La expresión elevada de PNMT es una de las formas en que la respuesta al estrés se retroalimenta positivamente. Un aumento de las hormonas del estrés o de los impulsos nerviosos debido al estrés puede hacer que la PNMT convierta más noradrenalina en epinefrina. Esto aumenta la potencia del sistema de respuesta de las catecolaminas, lo que aumenta la producción simpática y hace que la respuesta al estrés sea más profunda. [14]
Se sabe que la PNMT está regulada por glucocorticoides producidos en la glándula suprarrenal . Una forma en que puede regular la expresión de PNMT es mediante la influencia positiva de la corticosterona en el mantenimiento del ARNm de PNMT. [15] También se ha demostrado que los glucocorticoides aumentan la vida media biológica de la enzima in vitro. [16] En animales a los que se les ha extirpado la glándula pituitaria, la adición de glucocorticoides alarga significativamente la vida media de las enzimas PNMT. [16]
Los niveles elevados de PNMT también pueden ser desencadenados por impulsos nerviosos esplácnicos . Los impulsos nerviosos aumentan la síntesis de ARNm de PNMT al afectar ciertas secuencias promotoras. [16]
También se ha demostrado que la inmovilización bajo estrés durante unas horas aumenta la actividad de la PNMT en ratas. Este tratamiento tarda aproximadamente una semana en manifestar una diferencia en los niveles de PNMT. [17]
El SAM no sólo actúa como cofactor de la PNMT, sino que también ayuda a estabilizar la enzima y a aumentar su vida media haciéndola más resistente al corte por la proteasa tripsina . [16]
Se ha descubierto que la síntesis de epinefrina y, por lo tanto, la localización de la PNMT se encuentran en gran medida en la médula suprarrenal o la glándula suprarrenal de la mayoría de las especies. La PNMT se ha localizado en la mayoría de los mamíferos adultos en el citoplasma de estas células medulares. [1]
Estudios más recientes también muestran que el ARNm y la proteína PNMT se expresan en otras regiones del cuerpo. Ahora se están dilucidando ciertos tractos neuronales, la retina [18] y tanto las aurículas como los ventrículos en los corazones como sitios de expresión de PNMT. [ 19 ] La epinefrina se produce en pequeños grupos de neuronas en el cerebro humano que expresan PNMT; [2] estas neuronas se proyectan desde un núcleo adyacente (ventrolateral) al área postrema y desde un núcleo en la región dorsal del tracto solitario . [2]
La función normal y los defectos del PNMT están asociados con múltiples enfermedades y trastornos.
En la piel de pacientes con vitíligo se observan niveles disminuidos de actividad de PNMT medidos por epinefrina y norepinefrina en los queratinocitos , que normalmente tienen una actividad de PNMT más alta. [20]
Dos potentes inhibidores de la PNMT (LY134046 y LY78335) fueron antagonistas duraderos tanto de la intoxicación por etanol como de la sedación. Esto sugiere un papel central que la PNMT y la epinefrina desempeñan en la síntesis de etanol y la sedación e intoxicación inducidas por pentobarbital . [21]
La enfermedad de Alzheimer también se ha asociado con una actividad reducida de la PNMT humana en las regiones del cerebro más asociadas con la degeneración en la enfermedad. También se han observado asociaciones significativas entre los polimorfismos de la PNMT y la aparición temprana de la enfermedad de Alzheimer. [22]
Los inhibidores clásicos de la PNMT incluyen benzimidazoles , quinolonas y purinas . [8] La inhibición también se puede producir mediante la adición de S-desoxiadenosil L-homocisteína, un reemplazo para el cofactor SAM, que se le parece, pero le falta el grupo metilo, por lo que no es posible la transferencia de metilo. [23] Otro ejemplo es CGS19281A. [24]
