Durante este tiempo, un shinobi errante llamado Ukonzaemon Usui, conocido por muchos como Búho, adoptó a un niño huérfano sin nombre, al que nombró Lobo, y lo entrenó en los caminos del shinobi.
Dos décadas más tarde, el clan Ashina está al borde del colapso debido a que Isshin está ahora anciano y enfermo y a que los enemigos del clan se fueron acercando constantemente por todos lados.
Sin embargo, ya que recibió la sangre del dragón de Kuro tres años atrás, Lobo sobrevive a sus heridas y se despierta en un templo abandonado.
En el templo, se encuentra con el Escultor, un antiguo shinobi llamado Orangután que ahora esculpe estatuas de Buda, y Lobo encuentra que su brazo perdido ha sido reemplazado por la Prótesis Shinobi, un brazo artificial sofisticado que puede empuñar una gran variedad de artilugios y armas.
Con la Prótesis Shinobi, Lobo asalta el Castillo Ashina y se enfrenta a Genichiro nuevamente, derrotándolo, aunque este último es capaz de escapar gracias a que bebió las aguas Rejuvenecedoras, que es una réplica hecha por el hombre de la sangre del dragón.
A continuación, utiliza los elementos que ha reunido para entrar en el palacio del manantial.
Lobo encuentra a Kuro y Genichiro heridos, empuñando una segunda Hoja Mortal.
Posee una condición divina conocida como "el acervo del dragón" que le otorga la inmortalidad, así como la incapacidad de sangrar (sólo la hoja mortal puede herirlo) y la habilidad de volver inmortales a otras personas.
Isshin fue temido en su juventud como un legendario espadachín sin igual que desarrolló habilidades terribles con la espada luchando en incontables combates a muerte.
Tanto es así que, incluso aunque durante los acontecimientos del juego es ya un anciano extremadamente enfermo, sigue siendo un rival letal y temible para sus enemigos.
Un poderoso y mortífero samurái dotado de un misterioso poder que le permite invocar el rayo.
Un misterioso monje budista que habita en un viejo templo donde pasa casi todo su tiempo esculpiendo budas de aspecto airado.
Isshin le cortó un brazo para evitar que se convirtiese en un Shura, acabando así con su vida como shinobi pero salvándole de ser devorado por las llamas del odio.
Se caracteriza por su astucia y por sus habilidades pulidas hasta el extremo pese a su avanzada edad.
Es una letal maestra del arte de las ilusiones, y al igual que Búho, posee una mortífera destreza pese a su evidente vejez.
Dama Mariposa es un personaje misterioso cuyas motivaciones nunca se llegan a explicar, pero se sabe que es aliada de Búho, pues lo ayudó en sus planes durante el asalto a la hacienda Hirata.
Una amable y misteriosa niña que habita en santasactorum del templo Senpo.
[8] Sekiro: Shadows Die Twice fue "universalmente aclamado" por la crítica, siendo galardonado como "Juego del año" en The Game Awards 2019.