Los ensayos de liberación de interferón gamma ( IGRA ) son herramientas de diagnóstico para la infección tuberculosa latente (LTBI). Son marcadores sustitutos de la infección por Mycobacterium tuberculosis e indican una respuesta inmunitaria celular a M. tuberculosis si esta última está presente.
Los IGRA no pueden distinguir entre infección latente y enfermedad tuberculosa (TB) activa, y no deben utilizarse como método único para el diagnóstico de TB activa, que es un diagnóstico microbiológico. Un resultado positivo de IGRA no necesariamente indica infección por TB, sino que también puede ser causado por infección con micobacterias no tuberculosas. Un resultado negativo de IGRA no descarta la enfermedad tuberculosa activa; varios estudios han demostrado que hasta una cuarta parte de los pacientes con TB activa tienen resultados negativos de IGRA.
Dado que los IGRA no se ven afectados por el estado de vacunación con el bacilo de Calmette-Guérin (BCG), los IGRA son útiles para la evaluación de la infección latente por tuberculosis en personas vacunadas con BCG, en particular en entornos en los que la vacuna BCG se administra después de la infancia o se administran múltiples vacunas BCG (de refuerzo). Por el contrario, la especificidad de la prueba cutánea de la tuberculina (TST) varía según el momento de la administración de la BCG y si se administran vacunas repetidas (de refuerzo).
QuantiFERON , también conocido como QFT, es la marca registrada de un ensayo de liberación de interferón gamma (IGRA) para el diagnóstico de tuberculosis fabricado por QIAGEN . El ensayo QFT-GIT es una prueba de sangre completa basada en ELISA que utiliza péptidos de tres antígenos de tuberculosis (ESAT-6, CFP-10 y TB7.7) en un formato en tubo. El resultado se informa como cuantificación de IFN-gamma en unidades internacionales (UI) por ml. Se considera que un individuo es positivo para la infección por M. tuberculosis si la respuesta de IFN-gamma a los antígenos de tuberculosis está por encima del valor de corte de la prueba (después de restar la respuesta de IFN-gamma de fondo en el control negativo).
Dado que las IGRA son más costosas y técnicamente más complejas de realizar que la prueba de Mantoux , en su declaración de política de 2011, la OMS no recomendó reemplazar la prueba de Mantoux por IGRA como una intervención de salud pública en países de ingresos bajos y medios. [1]
QuantiFERON-TB Gold In-Tube (QFT-GIT), la prueba de tercera generación, ha reemplazado a QuantiFERON-TB (QFT) y QuantiFERON-Gold, que ya no se comercializan.
Según los Centros para el Control y Prevención de Enfermedades de Estados Unidos , [2] en 2001, la prueba QuantiFERON-TB (QFT) fue aprobada por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) como una ayuda para detectar la infección latente por Mycobacterium tuberculosis . Esta prueba es una ayuda diagnóstica in vitro que mide un componente de la reactividad inmunitaria mediada por células a M. tuberculosis . La prueba se basa en la cuantificación del interferón gamma (IFN-γ) liberado por los linfocitos sensibilizados en sangre completa incubada durante la noche con derivado proteico purificado (PPD) de M. tuberculosis y antígenos de control.
La prueba cutánea de la tuberculina (TST) se ha utilizado durante años como ayuda para diagnosticar la infección tuberculosa latente (LTBI) e incluye la medición de la respuesta de hipersensibilidad de tipo retardado 48 a 72 horas después de la inyección intradérmica de PPD. La TST y la QFT no miden los mismos componentes de la respuesta inmunológica y no son intercambiables. La evaluación de la precisión de estas pruebas está limitada por la falta de un estándar para confirmar la LTBI. [ cita requerida ]
Como prueba diagnóstica, la QFT:
En comparación con la TST, los resultados de la QFT están menos sujetos a sesgos y errores del lector. En un ensayo multicéntrico patrocinado por los CDC, los resultados de la QFT y la TST fueron moderadamente concordantes (valor kappa general = 0,60). El nivel de concordancia se vio afectado negativamente por la vacunación previa con bacilo de Calmette-Guérin (BCG) , la reactividad inmunitaria a las micobacterias no tuberculosas (MNT) y una TST positiva previa. [3] Además del estudio multicéntrico, otros dos estudios publicados han demostrado una concordancia moderada entre la TST y la QFT. [4] [5] Sin embargo, uno de los cinco sitios involucrados en el estudio de los CDC informó menos concordancia. [6] Aunque ha habido estudios que confirman el aumento del riesgo futuro de tuberculosis activa en individuos con TST positiva, lo mismo no fue cierto para aquellos con un resultado positivo de IGRA. Un estudio publicado recientemente [7] demostró que un resultado positivo de IGRA predice el riesgo futuro de tuberculosis activa. Además, IGRA fue al menos tan sensible y más específico en comparación con la TST tradicional. En este estudio de contactos cercanos inmunocompetentes recientemente expuestos a casos de TB activa, la tasa de progresión a enfermedad activa entre individuos positivos en la prueba QFT no tratados fue significativamente mayor que entre los positivos en la prueba TST no tratados (14,6 % versus 2,3 %). Aunque las cifras fueron pequeñas, todos los contactos cercanos que desarrollaron TB activa fueron positivos en la prueba QFT, pero solo el 83 % fueron positivos en la prueba TST. [ cita requerida ]
Como se señaló anteriormente, la vacunación previa con BCG puede producir resultados falsos positivos en la prueba de la tuberculina. En un estudio sobre personal militar que regresaba de misiones, aproximadamente la mitad de los resultados positivos de la prueba de la tuberculina fueron falsos positivos. [8] En un estudio más reciente sobre militares que regresaban de misiones, Franken et al. [9] informaron de pruebas que sugieren que los resultados falsos positivos de la prueba de la tuberculina son comunes y que las pruebas QFT podrían orientar un tratamiento más específico y aliviar el tratamiento antituberculoso innecesario.
El punto de corte de la FDA para un resultado positivo se estableció en >0,34 unidades internacionales/mililitro (UI/ml), aunque esto ha demostrado ser funcionalmente problemático en áreas de baja prevalencia, como entre los trabajadores de la salud de EE. UU. y Canadá. En áreas de bajo riesgo y baja prevalencia, el valor predictivo positivo de cualquier prueba se reduce. En el caso de los trabajadores de la salud norteamericanos examinados en serie, los resultados de QFT justo por encima de este punto de corte producen resultados de prueba falsos positivos que, al repetirse las pruebas, vuelven a ser negativos [10] , donde a menudo se exige la detección de tuberculosis anualmente. [11] La investigación en la Universidad de Stanford y la Administración de Veteranos ha informado que el uso de una zona de repetición de pruebas (o límite) por debajo de 1,1 UI/ml mitiga el 76 % de los falsos positivos o reversiones. [12] [13]
Las limitaciones de la QFT incluyen la necesidad de extraer sangre y procesarla dentro de las 16 horas posteriores a la recolección y la experiencia clínica y de laboratorio limitada con el ensayo. Es necesario realizar más estudios sobre la utilidad de la QFT para predecir la progresión a tuberculosis activa, en particular en niños y huéspedes inmunodeprimidos. [12]
Como desventaja, la QFT puede producir resultados falsos positivos con Mycobacterium szulgai , Mycobacterium kansasii y Mycobacterium marinum . [14]
La prueba QuantiFERON-TB Gold (QFT-G) es una prueba de sangre completa que se utiliza como ayuda para diagnosticar la infección por Mycobacterium tuberculosis , incluida la infección tuberculosa latente (LTBI) y la enfermedad de tuberculosis (TB). [15] Esta prueba fue aprobada por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) en 2005.
Las muestras de sangre se mezclan con antígenos (sustancias que pueden producir una respuesta inmunitaria) y controles. Para la QFT-G, los antígenos incluyen mezclas de péptidos sintéticos que representan dos proteínas de M. tuberculosis , ESAT-6 y CFP-10 . Después de la incubación de la sangre con antígenos durante 16 a 24 horas, se mide la cantidad de interferón gamma (IFN-gamma).
Si el paciente está infectado con M. tuberculosis , sus glóbulos blancos liberarán IFN-gamma en respuesta al contacto con los antígenos de la tuberculosis . Los resultados de la prueba QFT-G se basan en la cantidad de IFN-gamma que se libera en respuesta a los antígenos.
Se necesitan evaluación clínica y pruebas adicionales (como una radiografía de tórax , un frotis de esputo y un cultivo) para diferenciar entre un diagnóstico de tuberculosis latente o una tuberculosis activa.
Las ventajas de la prueba son:
Las desventajas y limitaciones de la prueba son:
El 10/10/2007 la FDA de EE. UU. [19] dio aprobación para que el Quantiferon TB Gold In Tube se comercializara en EE. UU.
La FDA afirma:
Aprobación para una modificación del quantiferon-tb gold en un sistema de recolección en tubo que consta de tres tubos de recolección de sangre, nil, antígeno tb y mitógeno. El dispositivo, tal como se modificó, se comercializará con el nombre comercial quantiferon-tb gold in-tube y está indicado para su uso como prueba de diagnóstico in vitro utilizando un cóctel de péptidos que simula las proteínas esat-6, cfp-10 y tb 7.7(p4) para estimular las células en sangre completa heparinizada extraída directamente en tubos de recolección de sangre especializados. La detección de interferón-y mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (elisa) se utiliza para identificar respuestas in vitro a estos antígenos peptídicos que están asociados con la infección por Mycobacterium tuberculosis.
Según el prospecto aprobado por la FDA [20], Quantiferon TB Gold In Tube tiene una especificidad constante de >99 % en individuos de bajo riesgo y una sensibilidad de hasta el 92 % en individuos con enfermedad activa, según el contexto y la extensión de la enfermedad. La especificidad en dos estudios de unos pocos cientos de personas es del 96-98 % en una población inmunizada sana.
El prospecto también advierte que el kit incluye tres tubos de recolección en cuyas paredes se han secado antígenos y que estos tubos deben transferirse a una incubadora dentro de las 16 horas siguientes a la recolección de sangre.
El 25 de junio de 2010, los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) de los Estados Unidos actualizaron las directrices para la realización de pruebas de tuberculosis (TB), que brindan orientación a los funcionarios de salud pública, los médicos y los trabajadores de laboratorio de los Estados Unidos sobre la detección y el diagnóstico de la infección de TB. Las directrices actualizadas brindan una nueva dirección para el control de la TB en los Estados Unidos. [11]
Anteriormente, QuantiFERON-TB Gold podía utilizarse en cualquier situación en la que se utilizara la prueba cutánea de la tuberculina (TST), sin preferencia. Las directrices de 2010 establecen un nuevo punto de referencia porque recomiendan las IGRA como el método de prueba de tuberculosis preferido en muchos pacientes, incluidos aquellos que están vacunados con BCG o que es poco probable que regresen para la lectura de la TST. [ cita requerida ]
En los Estados Unidos, la prueba está ampliamente disponible en laboratorios de salud pública estatales, hospitales y laboratorios comerciales .
En enero de 2008, los CDC informaron, a través de su boletín TB Notes [21] , a los controladores de tuberculosis y a otros acerca de un enlace [22] a una lista de laboratorios en los EE. UU. y Canadá que ofrecían realizar la prueba Quantiferon Gold.
La Asociación de Controladores de Tuberculosis de California también ha proporcionado una lista de laboratorios de salud pública [23] en California que están realizando pruebas con Quantiferon.