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Endonucleasa del colgajo

Las endonucleasas de flap (FEN, también conocidas como 5' durgs en referencias más antiguas) son una clase de enzimas nucleolíticas que actúan como exonucleasas 5'-3' y endonucleasas específicas de estructura en estructuras de ADN especializadas que ocurren durante los procesos biológicos de replicación de ADN , reparación de ADN y recombinación de ADN. Las endonucleasas de flap se han identificado en eucariotas , procariotas , arqueas y algunos virus . Los organismos pueden tener más de un homólogo de FEN ; esta redundancia puede dar una indicación de la importancia de estas enzimas. En procariotas, la enzima FEN se encuentra como un dominio N-terminal de la ADN polimerasa I, pero algunos procariotas parecen codificar un segundo homólogo. [1] [2] [3]

La actividad endonucleasa de las FEN se identificó inicialmente como actuando sobre un dúplex de ADN que tiene un saliente 5' monocatenario en una de las hebras [4] (denominado "colgajo 5'", de ahí el nombre de endonucleasa de colgajo [5] ). Las FEN catalizan la escisión hidrolítica del enlace fosfodiéster en la unión del ADN monocatenario y bicatenario. [6] Algunas FEN también pueden actuar como exonucleasas 5'-3' en el extremo 5' de la hebra del colgajo y en sustratos de ADN "mellados" .

Los modelos de estructura de proteínas basados ​​en datos de cristalografía de rayos X sugieren que las FEN tienen un arco flexible creado por dos hélices α a través de las cuales puede pasar la única hebra 5' de la estructura de la aleta 5'. [7]

Las endonucleasas de colgajo se han utilizado en biotecnología , por ejemplo, el ensayo de PCR Taqman [8] y el ensayo Invader para la detección de mutaciones y polimorfismos de un solo nucleótido (SNP). [9] [10]

Véase también

Referencias

  1. ^ Sayers, Jon R. (1994). "Identificación asistida por computadora de un posible gen de exonucleasa 5'-3' codificado por Escherichia coli". Revista de biología teórica . 170 (4): 415–21. doi :10.1006/jtbi.1994.1202. PMID  7996866.
  2. ^ Liu, Yuan; Kao, Hui-I; Bambara, Robert A. (2004). "FLAP ENDONUCLEASE 1: Un componente central del metabolismo del ADN". Revisión anual de bioquímica . 73 : 589–615. doi :10.1146/annurev.biochem.73.012803.092453. PMID  15189154.
  3. ^ Ceska, T; Sayers, JR (1998). "Escisión de ADN específica de la estructura por nucleasas 5'". Tendencias en ciencias bioquímicas . 23 (9): 331–6. doi :10.1016/S0968-0004(98)01259-6. PMID  9787638.
  4. ^ Lyamichev, Victor; Brow, Mary Ann D.; Dahlberg, James E. (1993). "Escisión endonucleolítica de ácidos nucleicos con estructura específica por polimerasas de ADN eubacterianas". Science . 260 (5109): 778–783. Bibcode :1993Sci...260..778L. doi :10.1126/science.7683443. PMID  7683443.
  5. ^ Harrington, John J.; Lieber, Michael R. (1994). "La caracterización de una endonucleasa específica de la estructura del ADN de mamíferos". The EMBO Journal . 13 (5): 1235–46. doi :10.1002/j.1460-2075.1994.tb06373.x. PMC 394933 . PMID  8131753. 
  6. ^ Kaiser, Michael W.; Lyamicheva, N.; Ma, W.; Miller, C.; Neri, B.; Fors, L.; Lyamichev, V. (1999). "Una comparación de 5′-exonucleasas específicas de estructura de eubacterias y arqueas". Journal of Biological Chemistry . 274 (30): 21387–21394. doi : 10.1074/jbc.274.30.21387 . PMID  10409700.
  7. ^ Ceska, TA; Sayers, JR; Stier, G.; Suck, D. (1996). "Un arco helicoidal que permite que el ADN monocatenario pase a través de la 5'-exonucleasa T5". Nature . 382 (6586): 90–3. Bibcode :1996Natur.382...90C. doi :10.1038/382090a0. PMID  8657312. S2CID  11159640.
  8. ^ "Principios Taqman". Archivado desde el original el 9 de diciembre de 2006. Consultado el 27 de diciembre de 2006 .[ Se necesita cita completa ]
  9. ^ Lyamichev, V.; Mast, AL; Hall, JG; Prudent, JR; Kaiser, MW; Takova, T.; Kwiatkowski, R.; Sander, T.; deArruda, M.; Arco, D.; Neri, BP; Brow, MA (1999). "Identificación de polimorfismos y detección cuantitativa de ADN genómico mediante escisión invasiva de sondas de oligonucleótidos". Nature Biotechnology . 17 (3): 292–296. doi :10.1038/7044. PMID  10096299. S2CID  37888925.
  10. ^ Olivier, Michael (2005). "El ensayo Invader® para la genotipificación de SNP". Investigación sobre mutaciones/Mecanismos fundamentales y moleculares de la mutagénesis . 573 (1–2): 103–10. doi :10.1016/j.mrfmmm.2004.08.016. PMC 2771639. PMID  15829241 . 

Enlaces externos

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