Knotts y sus tres hermanos fueron criados por su madre, quien dirigía una casa de huéspedes en Morgantown, Virginia Occidental.
Están enterrados en el panteón familiar en Beverly Hills Memorial Park, en Morgantown, Virginia Occidental.
Obtuvo una licenciatura en educación con especialización en oratoria en la Universidad de Virginia Occidental en Morgantown, graduándose en 1948.
Además de hacer monólogos en clubes, actuó en la radio e interpretó al sabelotodo «Windy Wales» en un western radiofónico llamado «Bobby Benson and the B-Bar-B Riders».
[8] Knotts tuvo su primera oportunidad en televisión en la telenovela Search for Tomorrow, en la que apareció de 1953 a 1955.
[12] En 1986, Knotts se reencontró con Andy Griffith en la película para televisión Regreso a Mayberry, retomando su papel de Barney Fife.
Fue producida por Martin Rips y Joseph Staretski, que habían trabajado anteriormente en Three's Company.
En 1988, Knotts se unió a Andy Griffith en la serie Matlock, en el papel recurrente del molesto vecino Les Calhoun, hasta 1992.
[1] Después de eso, sus papeles fueron esporádicos, incluyendo un cameo en la película Big Bully (1996) como el director del instituto.
[13] Él y sus compañeros de reparto asistieron al funeral cuatro días después.
Knotts había aparecido con Ritter por última vez en 2003 en un cameo en 8 Simple Rules for Dating My Teenage Daughter, en un episodio que rendía homenaje a su anterior serie de televisión.
Durante este periodo, la degeneración macular de ambos ojos provocó que Knotts, quedara prácticamente ciego.
Parodió ese papel una última vez en «Stone Cold Crazy», un episodio de la sitcom That '70s Show, donde interpretó al casero.
[14][15] Betty Lynn, una de sus coprotagonistas en The Andy Griffith Show, lo describió como un «hombre muy tranquilo.