El MTT, un tetrazol amarillo, se reduce a formazán morado en las células vivas.El formazán formado además es soluble en agua, evitando el paso final de solubilización.[5] Las sales de tetrazolio solubles en agua son alternativas más recientes al MTT.Se necesitan extremar precauciones para garantizar la precisión al usar este ensayo y existen argumentos sólidos para confirmar los resultados de MTS utilizando observaciones cualitativas bajo un microscopio.[7] WST-1 y WST-8 (2-(2-metoxi-4-nitrofenil)-3-(4-nitrofenil)-5-(2,4-disulfofenil)-2H-tetrazolio), presentan una ventaja sobre MTT ya que se reducen fuera de las células, al combinarse con el mediador de electrones PMS, produciendo un formazán soluble en agua.Finalmente, los ensayos WST se pueden leer directamente sin necesidad de un paso de solubilización, dan una señal más efectiva que el MTT y disminuyen la toxicidad celular (a diferencia del MTT y su formazán, que se acumula en el interior de las células).
Una
placa de 96 pozos
después de un ensayo MTT. A mayor cantidad de células, aumenta la coloración púrpura.
En el ensayo de MTT, la reductasa mitocondrial convierte el MTT (izquierda) en formazán (derecha).
