La safranina ( Safranina O o rojo básico 2 ) es una tinción biológica utilizada en histología y citología . La safranina se utiliza como contratinción en algunos protocolos de tinción, coloreando de rojo los núcleos celulares . Esta es la contratinción clásica tanto en las tinciones de Gram como en la tinción de endosporas . También se puede utilizar para la detección de cartílago , [2] mucina y gránulos de mastocitos .
La safranina tiene típicamente la estructura química que se muestra a la derecha (a veces se la describe como dimetilsafranina ). También existe la trimetilsafranina , que tiene un grupo metilo agregado en la posición orto (ver Patrón de sustitución de arenos ) del anillo inferior. Ambos compuestos se comportan esencialmente de manera idéntica en aplicaciones de tinción biológica, y la mayoría de los fabricantes de safranina no distinguen entre los dos. Las preparaciones comerciales de safranina a menudo contienen una mezcla de ambos tipos.
La safranina también se utiliza como indicador redox en química analítica .
Las safraninas son compuestos azonio de la 2,8-dimetil-3,7-diaminofenazina simétrica . Se obtienen por oxidación conjunta de una molécula de para -diamina con dos moléculas de una amina primaria ; por condensación de compuestos para -aminoazo con aminas primarias, y por acción de para -nitrosodialquilanilinas con bases secundarias como la difenilmetafenilendiamina. Son sólidos cristalinos que muestran un brillo metálico verde característico ; son fácilmente solubles en agua y se tiñen de rojo o violeta. Son bases fuertes y forman sales monácidas estables . Su solución alcohólica muestra una fluorescencia amarillo-roja . [3]
La fenosafranina no es muy estable en estado libre [ cita requerida ] ; su cloruro forma placas verdes [ aclaración necesaria ] . Se puede diazotar fácilmente y la sal de diazonio cuando se hierve con alcohol produce aposafranina o benceno indulina, C 18 H 12 N 3 . Friedrich Kehrmann demostró que la aposafranina se podía diazotar en presencia de ácido sulfúrico concentrado frío y la sal de diazonio al hervir con alcohol producía sales de fenilfenazonio. La aposafranona, C 18 H 12 N 2 O, se forma calentando la aposafranina con ácido clorhídrico concentrado . Estos tres compuestos tal vez se puedan representar como orto o paraquinonas . La "safranina" del comercio es una orto - tolusafranina . El primer colorante de anilina que se preparó a escala industrial fue la malva , que fue obtenida por Sir William Henry Perkin calentando anilina cruda con dicromato de potasio y ácido sulfúrico. [3]
La mauveína fue convertida en parasafranina (1,8-dimetilsafranina) por Perkin en 1878 por pérdida oxidativa / reductiva del grupo 7 N - para -tolilo. [4] Otra safranina bien conocida es la fenosafranina (CI 50200, cloruro de 3,7-diamino-5-fenilfenazinio) ampliamente utilizada como colorante histológico, fotosensibilizador y sonda redox. [5]
