Una repetición terminal larga ( LTR ) es un par de secuencias idénticas de ADN , de varios cientos de pares de bases de longitud, que se encuentran en los genomas eucariotas en cada extremo de una serie de genes o pseudogenes que forman un retrotransposón o un retrovirus endógeno o un provirus retroviral . Todos los genomas retrovirales están flanqueados por LTR, mientras que hay algunos retrotransposones sin LTR. Normalmente, un elemento flanqueado por un par de LTR codificará una transcriptasa inversa y una integrasa , lo que permite que el elemento se copie e inserte en una ubicación diferente del genoma. A menudo se pueden encontrar copias de un elemento flanqueado por LTR cientos o miles de veces en un genoma. Los retrotransposones LTR comprenden aproximadamente el 8% del genoma humano . [1]
Las primeras secuencias LTR fueron descubiertas por AP Czernilofsky y J. Shine en 1977 y 1980. [2] [3]
Transcripción
Las secuencias flanqueadas por LTR se transcriben parcialmente en un intermediario de ARN, seguido de una transcripción inversa en ADN complementario (ADNc) y, en última instancia, ADN de doble cadena (ADN bicatenario) con LTR completos. Los LTR luego median la integración del ADN a través de una integrasa específica de LTR en otra región del cromosoma huésped .
Los retrovirus como el virus de la inmunodeficiencia humana ( VIH ) utilizan este mecanismo básico.
Datación de inserciones retrovirales
Como los LTR 5' y 3' son idénticos en el momento de la inserción, la diferencia entre los LTR emparejados se puede utilizar para estimar la edad de las inserciones retrovirales antiguas. Este método de datación es utilizado por los paleovirólogos , aunque no tiene en cuenta factores de confusión como la conversión genética y la recombinación homóloga . [4]
VIH-1
La LTR del VIH-1 tiene una longitud de 634 pb [5] y, al igual que otras LTR retrovirales , está segmentada en las regiones U3, R y U5. U3 y U5 se han subdividido aún más según los sitios de factores de transcripción y su impacto en la actividad de la LTR y la expresión génica viral. El proceso de múltiples pasos de la transcripción inversa da como resultado la colocación de dos LTR idénticas, cada una de las cuales consta de una región U3, R y U5, en cada extremo del ADN proviral. Los extremos de las LTR participan posteriormente en la integración del provirus en el genoma del huésped . Una vez que el provirus se ha integrado, la LTR en el extremo 5' sirve como promotor de todo el genoma retroviral, mientras que la LTR en el extremo 3' proporciona la poliadenilación del ARN viral naciente y, en el VIH-1, el VIH-2 y el VIS, codifica la proteína accesoria, Nef . [6]
Todas las señales necesarias para la expresión genética se encuentran en las LTR: potenciador, promotor (puede tener tanto potenciadores transcripcionales como elementos reguladores), iniciación de la transcripción (como capping), terminador de la transcripción y señal de poliadenilación. [7]
En el VIH-1, la región 5'UTR se ha caracterizado según diferencias funcionales y estructurales en varias subregiones:
El TAR , o elemento de respuesta a la transactivación , desempeña un papel fundamental en la activación transcripcional a través de su interacción con las proteínas virales. Forma una estructura de tallo-bucle altamente estable que consta de 26 pares de bases con una protuberancia en su estructura secundaria que interactúa con la proteína activadora de la transcripción viral Tat . [8]
La poli A desempeña funciones tanto en la dimerización como en el empaquetamiento del genoma, ya que es necesaria para la escisión y la poliadenilación . Se ha informado que se necesitan secuencias aguas arriba (región U3) y aguas abajo (región U5) para que el proceso de escisión sea eficiente. [9]
PBS , o sitio de unión del cebador , tiene 18 nucleótidos de longitud y una secuencia específica que se une al cebador de ARNt Lys necesario para el inicio de la transcripción inversa. [10]
Psi (Ψ), o elemento de empaquetamiento Psi , es un motivo único que interviene en la regulación del empaquetamiento del genoma viral en la cápside . Está compuesto por cuatro estructuras de tallo-bucle (SL) con un sitio donante de empalme principal incrustado en el segundo SL. [11]
DIS , o sitio de iniciación del dímero, es una secuencia de interacción ARN-ARN altamente conservada que constituye el tallo-bucle SL1 en el elemento de empaquetamiento Psi de muchos retrovirus. DIS se caracteriza por un tallo conservado y un bucle palindrómico que forma un complejo de bucle de beso entre los genomas de ARN del VIH-1 para dimerizarlos para la encapsidación . [12]
La transcripción comienza al principio de R, se protege y continúa a través de U5 y el resto del provirus, generalmente terminando con la adición de un tracto poli A justo después de la secuencia R en el LTR 3'.
El hallazgo de que ambas LTR del VIH pueden funcionar como promotores transcripcionales no es sorprendente, ya que ambos elementos son aparentemente idénticos en la secuencia de nucleótidos. En cambio, la LTR 3' actúa en la terminación de la transcripción y la poliadenilación. Sin embargo, se ha sugerido que la actividad transcripcional de la LTR 5' es mucho mayor que la de la LTR 3', una situación que es muy similar a la de otros retrovirus. [7]
Durante la transcripción del provirus del virus de inmunodeficiencia humana tipo 1, las señales de poliadenilación presentes en la repetición terminal larga (LTR) 5' se ignoran, mientras que las señales de poliadenilación idénticas presentes en la LTR 3' se utilizan de manera eficiente. Se ha sugerido que las secuencias transcritas presentes dentro de la región U3 de la LTR del VIH-1 actúan en cis para mejorar la poliadenilación dentro de la LTR 3'. [13]
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Enlaces externos
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